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Quel est ACP quantitatif en temps réel (qPCR) ?

L'amplification en chaîne par polymérase (PCR) est une méthode utilisée généralement pour amplifier l'ADN, qui peut alors être employé pour le clonage de gène, ordonnançant, et pour la manipulation de gène. La technique a été également appliquée au diagnostic de la maladie.

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Il est important d'étudier l'ADN pour déterminer la fonction des gènes et l'effet des mutations sur la maladie. L'analyse de l'ADN tient compte également du développement des remèdes. Dans l'ACP, l'ADN est extrait d'une cellule et amplifié, produisant des milliers de copies pour l'analyse.

L'amplification est réalisée par l'utilisation des nucléotides et des matrices d'ARN connus sous le nom d'amorces. Une polymérase appelée de Taq d'enzymes étend les amorces utilisant les nucléotides libres, produisant des copies identiques de la région d'intérêt.

Quel est ACP quantitatif en temps réel (qPCR) ?

L'ACP quantitatif en temps réel (également connu sous le nom de qPCR) est une voie de découvrir quelle quantité de partie spécifique d'ADN là est dans un échantillon, en temps réel. Ceci permet à des parties d'ADN (ou, acides nucléiques) d'être examinées simultanément.

Il utilise les teintures fluorescentes non spécifiques, ou les sondes ADN de séquence-détail contenant des oligonucléotides de fluorescent-journaliste (de plus grands fragments d'ADN) pour trouver les produits d'ACP pendant qu'ils sont produits. Pouvoir voir directement la présence d'un nucléotide spécifique peut montrer si ou non un organisme spécifique est présent et peut mettre en valeur des anomalies spécifiques de gène, telles que le gène de CTFR connu pour entraîner la mucoviscidose.

La mesure du nombre d'acides nucléiques spécifiques actuels peut être faite de deux voies : par quantification relative ou quantification d'absolu. La quantification absolue donne compare l'échantillon à une norme d'ADN pour analyser le chiffre exact des molécules d'ADN d'objectif actuelles. Cependant, la quantification relative emploie les gènes internes de référence (gènes dans l'échantillon ADN lui-même) pour déterminer la quantité du présent de gène cible.

Le qPCR est-il la meilleure méthode de mesurer l'ADN ?

L'ACP quantitatif en temps réel est très sensible aux changements de l'expression d'ADN. C'est comparé avantageux à d'autres méthodes actuelles, telles que des puces ADN, car le résultat final peut être vu avant le point final, donnant plus d'heure pour l'analyse approfondie. En revanche, le qPCR exige beaucoup d'entrer l'ARN au début de la réaction, et est plus sensible pour jeûner, des réactions de haut-débit, qui augmente les possibilités de l'échec.

Où est le qPCR utilisé généralement ?

Dans la recherche et les laboratoires d'hôpital, le qPCR est employé principalement pour la recherche d'ADN et dans le diagnostic de viral, de bactérien, et des maladies génétiques telles que le cancer et les maladies congénitales.

L'ACP quantitatif en temps réel est également employé dans l'industrie. Par exemple, il peut être employé pour analyser le bioburden des produits ou des matières premières telles que la nourriture et les médicaments. La méthode peut également être employée pour découvrir si ou non un produit alimentaire contient OGM (organisme génétiquement modifié), en cherchant la présence d'un transgène dans l'ADN des produits végétaux.

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Last Updated: Aug 23, 2018

Written by

Phoebe Hinton-Sheley

Phoebe Hinton-Sheley has a B.Sc. (Class I Hons) in Microbiology from the University of Wolverhampton. Due to her background and interests, Phoebe mostly writes for the Life Sciences side of News-Medical, focussing on Microbiology and related techniques and diseases. However, she also enjoys writing about topics along the lines of Genetics, Molecular Biology, and Biochemistry.

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