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Exames preliminares do método novo, que pode detectar o cancro em uma amostra com somente 50 pilhas

Encontrar o cancro em uma gota minúscula do líquido de corpo que contem relativamente poucas pilhas agora pode ser possível com um método novo de analisar genes múltiplos nas amostras pequenas de ADN, os blocos de apartamentos celulares de nosso código genético. O teste molecular pode ser especialmente útil em detectar células cancerosas no líquido do peito.

Os exames preliminares do método novo, que pode detectar o cancro em uma amostra com somente 50 pilhas, foram conduzidos em um pequeno número de amostras de tecido do peito e são relatados na introdução do 1º de julho da investigação do cancro. “Nosso objetivo é adicionar uma solução molecular aos problemas no cancro que o diagnóstico onde a amostra não é adequada ou a avaliação microscópica das pilhas é obscura,” diz Sara Sukumar, Ph.D., Barbara B. Rubenstein professor da oncologia no centro do cancro de Johns Hopkins Kimmel. “Se os estudos adicionais provam a possibilidade deste teste, fornecerá indícios moleculars aos resultados celulares da patologia e da mamografia que podem ajudar a decidir se o cancro esta presente.”

O teste, chamado PCR methylation-específico multiplex quantitativo ou QM-MSP, trabalha procurando raramente níveis elevados de moléculas encaixadas por um processo chamado methylation dentro das regiões críticas de ADN. Neste processo, os grupos metílicos pequenos regulam o processo da mensagem-fabricação do ADN anexando ao interruptor de "ON" dos genes. Os níveis anormais de methylation desligam impropriamente o interruptor do gene, que conduz finalmente à perda de proteínas críticas encontradas em pilhas normais. Isto adiciona à cascata dos eventos genéticos que conduzem ao cancro.

“Até aqui, os níveis exactos de methylation em muitos genes eram ao mesmo tempo impossíveis sem testes repetidos, e com uma amostra pequena, nós não tivemos bastante ADN para executar todos aqueles testes,” diz Mary Jo Fackler, Ph.D., investigador associado no centro do cancro de Kimmel e primeiro autor do estudo. “Agora, nós tomamos dois tipos existentes de testes de MSP e unimo-los, que minimiza a quantidade de amostra necessário.”

QM-MSP determina a porcentagem do methylation actual em cada um de quatro a cinco genes do cancro da mama. As porcentagens são adicionadas junto para uma contagem cumulativa, que seja comparada a um valor de ponto inicial. Os níveis acima do ponto inicial indicam que a presença potencial de células cancerosas e abaixo do ponto inicial sugere que as amostras sejam normais.

No primeiro grupo de experiências, os cientistas de Hopkins testaram QM-MSP em amostras de tecido usando um painel dos genes cujos os testes padrões anormais do methylation são sabidos para ser associados com o cancro da mama. O teste detectou o cancro em 84 por cento (16 de 19) de amostras do tumor do peito, e não encontrou nenhum cancro em tecidos normais de 89 por cento (oito de nove).

Em seguida, a equipe testou QM-MSP nas amostras fluidas do canal do peito obtidas com um processo chamado o lavage ductal, uma lavagem salina através de um cateter rosqueado através do bocal. De sete pacientes em de alto risco para o cancro da mama e nenhum presente conhecido do cancro, seis não tiveram nenhum nível detectável de methylation anormal em suas pilhas do peito, e uma mulher teve baixos níveis de methylation anormal em um gene. QM-MSP detectou cancro em dois de quatro cancro da mama paciente, que, os investigador dizem, indica que esta ferramenta da avaliação mantem alguma promessa e está sendo avaliada em estudos maiores em Johns Hopkins.

De acordo com a equipe de Hopkins, a técnica de QM-MSP poderia ser aplicada à análise do methylation em outros cancros, tais como o lavage oral na cabeça e no pescoço, ou ao escarro para o câncer pulmonar em que as amostras de tecido são tipicamente pequenas.

Esta pesquisa foi financiada pelo instituto nacional para o cancro, pela fundação de Avon, pela Susan G. Komen Fundação, e pelo Departamento de Defesa.

Outros cientistas que participam nesta pesquisa são Pedram Argani, M.D., Julie Lange, M.D., Elizabeth Garrett, Ph.D., Megan McVeigh, Jyoti Mehrotra, Ph.D., Marissa A. Blum, e Amanda Lapides da Faculdade de Medicina da Universidade Johns Hopkins.