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A terapia genética para a artrite é praticável e segura

A terapia genética para a artrite e o outro não-terminal, as circunstâncias debilitantes e as doenças são praticáveis e seguro, relate os pesquisadores que conduziram as primeiras do mundo tal teste na aproximação nos pacientes com artrite reumatóide avançada.

Os resultados, publicados na edição em linha desta semana das continuações da Academia Nacional das Ciências (PNAS), indicam que isso introduzir um gene novo tem o potencial obstruir o processo destrutivo da inflamação que ocorre dentro das junções artríticas. Numa altura em que os recuos moldaram a dúvida no futuro da terapia genética, os resultados igualmente oferecem a garantia que pode ser executada sem causar o dano impróprio aos pacientes.

O ensaio clínico, que foi conduzido na universidade de uma Faculdade de Medicina de Pittsburgh entre 1996 e 1999, envolvido nove mulheres que tinham alterado genetically pilhas injectou em suas juntas artríticas e marcado a primeira vez um gene foi introduzido em uma junção humana. Os pesquisadores dizem que seu mostrar dos resultados que transferência bem sucedida do gene pode visar a inflamação comum abre a porta à revelação de terapias gene-baseadas melhoradas para reumatóide e a osteodistrofia mais comum, que afectam junto aproximadamente 66 milhões de pessoas nos Estados Unidos. Quando o estudo de Pitt usou o mesmo vector - um vírus neutralizado que shuttles um gene em pilhas - como uma experimentação francesa mais recente para a imunodeficiência combinada severa X-ligada (X-SCID) em que três crianças desenvolveram mais tarde a leucemia, os pesquisadores indicam que esta é a única similaridade entre as duas experimentações. Os estudos foram estados relacionados com os genes diferentes e com os alvos diferentes, e na experimentação da artrite, as pilhas transduced foram removidas após uma semana durante a cirurgia comum rotineira da substituição. Todavia, com segurança um interesse chave, os autores relata a nenhuns efeitos secundários clínicos até cinco anos depois que o procedimento e nenhuma evidência que o vector, um retrovirus réplica-defeituoso chamado vírus Murine da leucemia de Maloney, se tem tornado desde capaz da réplica em seus pacientes.

“Ao princípio, nosso objetivo preliminar provava a segurança da terapia genética, especialmente para uma aplicação clínica a uma doença nonlethal, tal como a artrite. Uma vez que nós aprendemos dos eventos adversos na experimentação de X-SCID, nós decidimos que era o melhor estender o seguimento de nossos pacientes a cinco anos de modo que devesse haver pouca pergunta sobre a segurança a longo prazo,” Christopher explicado H. Evans, Ph.D., D.Sc., autor principal do estudo, agora director do centro para a ortopedia molecular no professor de Brigham e de hospital e de Robert Lovett das mulheres da cirurgia ortopédica na Faculdade de Medicina de Harvard.

Na artrite reumatóide, as pilhas de sistema imunitário chamaram macrófagos e os linfócitos colonizam o forro das junções onde liberam as proteínas chamadas os cytokines que modulam uma comunicação entre as pilhas imunes e pilhas synovial, as pilhas que alinham a junção. Como os pesquisadores descobertos em uns estudos animais mais adiantados, as pilhas synovial têm um receptor em sua superfície que é um ajuste perfeito para um cytokine, um interleukin-1, ou um IL-1 particular. Como um interruptor, quando IL-1 liga a este receptor, a pilha desencadeia os agentes bioquímicos adicionais, que causam por sua vez uma inflamação mais local. Como as construções da inflamação, pacientes experimentam uma dor e uma rigidez progressivamente mais ruins em suas junções afetadas.

Para obstruir este processo, a equipe procurou uma maneira de impedir que o actor principal, IL-1, ligue às pilhas synovial, e daqui, ajustando fora a reacção em cadeia destrutiva que segue. Essencialmente, elas necessários uma maneira de obstruir acima do receptor e de encontrar tal dispositivo em um gene que codifica o antagonista do receptor IL-1, ou Ra IL-1.

Porque era a primeira experimentação de seu tipo e a segurança era um interesse chave, o protocolo foi projectado de modo que o gene fosse entregado às pilhas que tinham sido removidas previamente dos pacientes e então, depois que transferência do gene, reintroduzida diversas semanas mais tarde após a selecção intensiva e determinação da expressão genética.

“Dado que a terapia genética era tão nova e nós estávamos tratando uma população paciente de outra maneira saudável, ex vivo o protocolo era a aproximação a mais apropriada a tomar naquele tempo,” Paul indicado Robbins, Ph.D., professor da genética molecular e a bioquímica e cirurgia ortopédica na universidade da Faculdade de Medicina de Pittsburgh, que era o investigador co-principal e então o director do estudo da universidade da facilidade viral do núcleo do vector de Pittsburgh.

De acordo com seus resultados, as junções tratadas com as pilhas genetically alteradas exibiram os níveis elevados do Ra IL-1, indicando transferência bem sucedida do gene. Os conjuntos de pilhas que expressaram grandes quantidades do gene estaram presente na superfície do tecido synovial e produziram significativamente menos do IL-6 e do PGE deprovocação 2 do que pilhas dentro das junções que não foram tratadas com o gene.

As nove mulheres registradas na experimentação estavam entre 49 e 73 anos de idade e têm vivido com a artrite reumatóide por entre 10 e 26 anos. Cada um foi programado para a cirurgia comum da substituição que envolve as quatro juntas em uma de suas mãos e de uma junção adicional. Nas semanas antes da cirurgia comum da substituição, o tecido synovial foi removido da junção adicional que exigiu a cirurgia. As pilhas do tecido foram cultivadas então por diversas semanas, depois do qual a metade das pilhas teve o gene do Ra IL-1 introduzido e a metade permaneceu não tratada. Seis a sete semanas mais tarde, seguindo a selecção extensiva do laboratório das pilhas genetically alteradas, os pacientes retornaram à clínica, onde as pilhas foram injectadas em quatro juntas em uma forma dobro-cega, com as duas juntas que recebem as pilhas gene-alteradas, e em duas juntas que recebem injecções das pilhas sem o gene adicionado. Uma semana mais tarde, na altura da cirurgia previamente programada do paciente, as quatro juntas foram removidas para o estudo e substituídas com as junções artificiais.

Em seus estudos animais que precederam o ensaio clínico, os pesquisadores tinham notado que uma porcentagem pequena de pilhas injetadas poderia escapar a outros tecidos dentro de uma semana. Mas com cinco anos continue, os autores não viram nenhuma evidência que estas pilhas genetically alteradas causaram todos os eventos adversos em seus nove pacientes.

Embora ex vivo a aproximação prove o cofre forte e possa confer à expressão genética dentro das junções artríticas, os autores afirmam que igualmente era fastidiosa, demorada e cara. Neste momento defenderiam in vivo uma aproximação mais directa - introduzindo o gene directamente a tecido afetado - que usa-se como o vector que um vírus adeno-associado (AAV) em vez do vector se usou na experimentação relatou em PNAS. AAV parece ter um bom perfil de segurança e, nos animais, facilita uma expressão genética mais prolongada. Os investigador esperam conduzir ensaios clínicos adicionais na osteodistrofia e na artrite reumatóide usando AAV para transportar o gene.

Além do que o afastamento cilindro/rolo. Evans e Robbins, outros autores são James H. Herndon, M.D., também agora em Harvard; Steven C. Ghivizzani, Ph.D., agora na universidade de Florida; Mary Chester Wasko, M.D., Molly Vogt, Ph.D., Theresa L. Whiteside, Ph.D., pessoa idosa de Elaine, Ph.D., e Simon C. Watkins, Ph.D., toda a universidade de Pittsburgh; Matthew M. Tomaino, M.D., agora na universidade da Faculdade de Medicina de Rochester; e Richard Kang, M.D., e Thomas A. Muzzonigro, M.D., que são ambos agora em privado pratica.