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As ajudas do sistema do xCELLigence de Roche estudam a viabilidade da pilha, morte celular ao testar compostos citotóxicos

A monitoração da viabilidade da pilha e a toxicidade são críticas a muitas áreas da pesquisa biológica e biomedicável. Isto é verdadeiro para compreender os caminhos moleculars e bioquímicos que regulam a viabilidade da pilha, para desenvolver os agentes terapêuticos que modulam a viabilidade da pilha e para identificar efeitos secundários citotóxicos potenciais de agentes terapêuticos potenciais.

Os ensaios da viabilidade e da citotoxidade são usados rotineiramente para determinar como os vários tratamentos molestam potencial a homeostase da pilha que conduz à viabilidade diminuída e à citotoxidade aumentada. Muitos agentes usados para a terapêutica do cancro modulam o balanço intrincado entre a proliferação de pilha e a morte celular. O alvo final da terapia do cancro é reduzir ou eliminar pilhas cancerígenos no corpo, assim deslocando o balanço pela morte celular crescente ou diminuindo a proliferação de pilha.

Em um estudo recente de Ning KE e de Yama Abassi da ciência biológica de ACEA em San Diego, Roche (folhas cor-de-rosa: RHHBY) (SWX: RO) (SWX: O sistema do xCELLigence de ROG) tinha sido usado estudando a viabilidade e a morte celular da pilha ao testar vários compostos citotóxicos. O tempo real impedância-baseou analisadores da pilha, tais como o instrumento do SP de RTCA e a E-Placa 96, poderia identificar o início da citotoxidade usando a monitoração impedância-baseada contínua da viabilidade da pilha, localizando quando os efeitos máximos ocorrem. Além disso, o instrumento identificou o melhor ponto do tempo, isto é, quando os valores do CI estão no seu mais baixo, para conduzir os ensaios funcionais do valor-limite que examinam transições do destino da pilha, tais como o apoptosis e o ciclismo de pilha, em maiores detalhes. O sistema do xCELLigence igualmente provado ser apropriado para identificar a cultura jorra com números impróprios da pilha no início do ensaio, assim minimizando o papel de produtos manufacturados da borda da placa da semeação e de cultura da pilha durante a análise de dados.

A morte celular ocorre com um espectro dos caminhos morfológicos e bioquímicos distintos que culminam no apoptosis, na necrose e em autophagy. É importante compreender os modos diferentes de morte celular negociados por agentes citotóxicos para decifrar os mecanismos da acção da droga e para identificar efeitos secundários significativos. O efeito directo do tratamento composto na morte celular é frequentemente transiente e difícil de capturar usando ensaios padrão do valor-limite. Por exemplo, o apoptosis ocorre somente durante um indicador curto do tempo, frequentemente dentro apenas das horas, e é seguido freqüentemente por eventos necrotic secundários. É conseqüentemente crucial conduzir ensaios relevantes, viabilidade de medição da pilha ou morte celular, nos pontos experimentais óptimos do tempo. Considerando que a cinética da matança da pilha é provável ser diferente para compostos diferentes, é importante monitorar continuamente a viabilidade e a toxicidade da pilha, localizar os pontos óptimos do tempo para ensaios de condução do valor-limite e ganhar a informação mecanicista necessária.

O sistema do xCELLigence permite a monitoração do tempo real, a etiqueta-livre e a dinâmica de mudanças fenotípicas celulares medindo a impedância elétrica. O sistema mede a impedância usando os microelétrodos interdigitated integrados na parte inferior de cada um bem das E-Placas 96 da cultura do tecido. As medidas da impedância são indicadas como os valores de deslocamento predeterminado (CI) da pilha, fornecendo a informação quantitativa sobre o estado biológico das pilhas, incluindo o número da pilha, a viabilidade da pilha e a morfologia da pilha. a monitoração Impedância-baseada da viabilidade da pilha correlaciona ao número da pilha e ao readout MTT-baseado. O aspecto cinético de medidas impedância-baseadas da viabilidade da pilha fornece a informação temporal necessária, por exemplo, quando os compostos do interesse são usados para induzir efeitos citotóxicos. Em particular, o sistema do xCELLigence é ideal para localizar pontos os melhores do tempo, isto é, quando os compostos citotóxicos conseguem seu efeito máximo, como indicado pelos mais baixos valores do CI em ensaios da citotoxidade e da morte celular.

Source:

 Roche