La nuova tecnica può individuare le tracce minuscole di DNA tumorale in liquidi biologici

Forse sarà possibile, nell'immediato futuro, individuare il cancro da un sangue o da un esame delle urine semplice. Infatti, i biologi dalle università del CNRS, di Inserm, di Parigi Cartesio e di Strasburgo hanno sviluppato una tecnica capace di rilevazione delle tracce minuscole di DNA tumorale presenti nei liquidi biologici dei pazienti che soffrono dal cancro. Il metodo consiste nelle analisi molecolari ultrasensibili d'avanzamento nelle goccioline microscopiche. Provato con successo sui geni in questione in vari cancri, compreso cancro del colon e la leucemia, ha il potenziale di trasformarsi in uno strumento potente per gli oncologi, sia nella fabbricazione della diagnosi che nella prescrizione del trattamento. Uno studio clinico già è preveduto per valutare questa tecnica. L'opera è pubblicata sul sito Web del laboratorio del giornale su un chip.

Quando le celle tumorali muoiono, rovesciano i loro contenuti nel media extracellulare. Questi contenuti, in particolare il DNA delle celle, poi sono trovati nei liquidi biologici del paziente: sangue, linfa, urina, ecc. Poiché lo sviluppo della maggior parte dei cancri comprende i fattori genetici, un sangue o un esame delle urine semplice potrebbe nella teoria rivelare la presenza di DNA tumorale e così di cancro non appena le prime celle cancerogene muoiono, in altre parole molto ad una fase iniziale.

Malgrado questa grande promessa, c'è una smagliatura che spiega perché i medici non possono ancora rintracciare i cancri in liquidi biologici: il DNA tumorale è soltanto presente nelle tracce in questi liquidi. Nel sangue, per esempio, rappresenta meno di 0,01% del DNA totale trovato nel modulo diluito. Tuttavia, i metodi di analisi convenzionali del DNA non sono abbastanza sensibili individuare tali piccole quantità. Quindi l'interesse della tecnica sviluppata dai ricercatori dal CNRS, da Inserm, dal Université de Strasburgo e dal Université Parigi Cartesio, in collaborazione con un gruppo tedesco dal Max Planck Institute (Göttingen) e una società americana (tecnologie di Raindance). Il considerevole vantaggio di questa tecnica è che permette di individuare le soglie del DNA 20.000 volte più basse precedentemente del caso in cliniche.

Come funziona? Un primo punto consiste nella distribuzione del DNA estratto da un campione biologico in milioni di goccioline, che sono sufficiente piccole contenere soltanto un singolo gene ciascuno dell'obiettivo. Poi, questo DNA è ampliato per mezzo di metodi molecolari moderni di moltiplicazione. Simultaneamente, le molecole fluorescenti specifiche ad ogni gene interagiscono con il DNA. Questa fase chiave fornisce una specie di codice colore del gene. Le goccioline poi sono guidate, uno per uno, nelle scanalature microscopiche in cui sono analizzate dal laser: il colore delle molecole fluorescenti poi indica quale gene è presente nella gocciolina. Se la gocciolina emette la fluorescenza rossa, per esempio, il DNA è sano. Se è verde, è tumorale. Se la gocciolina non emette alcuna fluorescenza, non contiene il gene mirato a. Un conteggio semplice dei punti colorati poi permette di determinare la concentrazione tumorale nel DNA.

I ricercatori hanno applicato con successo il loro metodo ad un oncogene (un gene che ha il potenziale di causare il cancro) conosciuto come KRAS (connesso con la leucemia ed i vari cancri, quali cancro del colon, il pancreas ed il polmone). Il DNA che sopporta questo gene è stato derivato dalle linee cellulari del laboratorio. Questo nuovo metodo analitico ora deve essere provato in un contesto terapeutico. Uno studio clinico già è preveduto. Se è un successo, i medici avranno “un'arma anticancro„ efficiente, non appena per la rilevazione della presenza di tumori ma anche per la proposta dei trattamenti. L'aggressività del cancro, la sua risposta ai trattamenti attuali ed il suo rischio di ricorrenza dopo il trattamento locale: tutte questi informazioni sono contenute parzialmente nel DNA tumorale. Decifrandola con la tecnologia di microdroplet, gli oncologi potrebbero trarre giovamento da uno strumento diagnostico potente per contribuire a predire l'evoluzione della malattia ed a determinare una strategia terapeutica.

Source:

Strasbourg Universitiy