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Stade de tension de Linkam choisi pour régler le stress dans l'accroissement du collagène humain par l'Université de Liverpool

La microscopie à température contrôlée de Constructeurs, Instruments Scientifiques de Linkam, ont été choisies par le Service de Physique de l'Université de Liverpool pour étudier les effets de régler des stress appliqués pendant l'accroissement du collagène sécrété à partir des cellules humaines de fibroblaste. L'objectif de recherches de l'Aide à la Recherche Supérieure, du M. Caroline Smith, et de ses collègues à l'Université de Liverpool est d'avancer la demande de règlement des préjudices de tendon en développant une méthode d'élever le collagène humain installé.

Pour réaliser ceci et gagner une compréhension principale du procédé, M. Smith emploie la technique optique de la spectroscopie d'anisotropie de réflexion pour surveiller le point auquel le collagène, développé par des cellules de fibroblaste de souris sur les substrats élastomères, est installé une fois soumis à un stress uniaxial régulier monté à un stade de tension de Linkam TST350.

Pour l'expérience, de petits puits capables de retenir le liquide ont été fabriqués du polydimethylsiloxane (PDMS) pour s'ajuster dans l'Appareil De Contrôle de Contrainte De Traction. L'effet d'étirer le PDMS en fonction du stress appliqué a été vérifié au commencement pour déterminer l'effet du stress sur le substrat. (J. Phys. D : APPL. Phys. 43, 245301 (2010)). Les fibroblastes L929 murins que des cellules ont été cultivées à 37˚C dans une ambiance de CO2 de 5 % dans Dulbeccos Ont Modifié le Support d'Eagles (DMEM) (Sigma) complété avec des antibiotiques Foetaux de Sérum De Boeuf de 5 % (Invitrogen) et de Pénicilline/Streptomycine de 1 % (Sigma). Le milieu de culture a été complété le niveau quotidiennement au cours de la période de recyclage. Les cellules étaient sujettes alors au stress cyclique pendant 7 jours. Après 7 jours, les puits ont été retirés de l'incubateur et lavés avec Saline Tamponné aux phosphates de Dulbecco (DPBS, Sigma). La couche de cellules a été dispersée dans 0.05 % Trypsin/EDTA (Sigma) incubé pour 3 minimum et soumis à l'agitation douce pour retirer les cellules sans endommager la couche de collagène. Après démontage des cellules le collagène sécrété des cellules a pu être vérifié par microscopie et spectroscopie optiques d'anisotropie de réflexion.

La capacité de choisir un large éventail de vitesses de répétition pour associer de nouveau à l'accroissement du collagène est très utile. Au Commencement, il serait très difficile fabriquer M. Smith pensé à effectuer son propre TEST mais à avoir un petit ensemble qui pourrait régler le stress cyclique et également mesurer des courbures d'effort/contrainte à la même chose intérieurement. Par Conséquent, l'ensemble de Linkam a été acheté.

Le stade TST350 est établi avec deux vis sans fin au sol d'acier inoxydable de précision pour mettre à jour le cadrage vertical et horizontal uniforme parfait. Les maxillaires témoin déménagent les sens inverses pour mettre à jour l'échantillon dans les champs de vision réfléchis et transmis de microscope. Le Contrôle de température et l'exactitude est excellent avec un domaine de -196°C à 350°C avec le contrôle 0.01°C et jusqu'aux tarifs 30°C/min, avec pratiquement aucun contrôle par retour de l'information de la température à la mesure de la force. Des Échantillons peuvent être rapidement chargés dans les maxillaires et un essai peut être exécuté en quelques secondes. Le contrôle par retour de l'information de données du transducteur de force, conçu et établi intérieurement, peut être employé pour afficher un traçage en ligne de la force/de distance quand les maxillaires déménagent à la vitesse constante ou quand la vitesse est variée pour mettre à jour une force constante. La vitesse des maxillaires, forcent appliqué et la distance déménagée peut tout être variée relativement à la température de cellules. La cavité témoin est scellée et peut être réglée avec les gaz inertes variés par l'intermédiaire des soupapes en bonne santé de claquement de précision établies sur des côtés du stade.

Source : www.linkam.co.uk

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