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Fase elástica de Linkam escolhida controlar o esforço no crescimento do colagénio humano pela Universidade de Liverpool

A microscopia controlada temperatura dos Fabricantes, Instrumentos Científicos de Linkam, foi escolhida pelo Departamento de Física da Universidade de Liverpool estudar os efeitos de controlar os esforços aplicados durante o crescimento do colagénio segregado das pilhas humanas do fibroblasto. O objetivo da pesquisa do Assistente de Pesquisa Superior, do Dr. Caroline Smith, e dos seus colegas na Universidade de Liverpool é avançar o tratamento dos ferimentos do tendão desenvolvendo um método de crescer o colagénio humano orientado.

Para conseguir isto e ganhar uma compreensão fundamental do processo, o Dr. Smith está usando a técnica óptica da espectroscopia da anisotropia da reflexão para monitorar a extensão a que o colagénio, crescido por pilhas do fibroblasto do rato em carcaças elastomeric, é orientado quando sujeitado a um esforço uniaxial regular montado em uma fase elástica de Linkam TST350.

Para a experiência, os poços pequenos capazes de guardarar o líquido foram fabricados do polydimethylsiloxane (PDMS) para caber no Verificador do Esforço Elástico. O efeito de esticar o PDMS em função de esforço aplicado foi investigado inicialmente para determinar o efeito do esforço na carcaça. (J. Phys. D: Appl. Phys. 43, 245301 (2010)). Os fibroblasto que L929 murine as pilhas foram cultivadas em 37˚C em uma atmosfera do CO2 de 5% em Dulbeccos Alteraram o Media de Eagles (DMEM) (Sigma) suplementado com os antibióticos Fetais do Soro Bovino de 5% (Invitrogen) e da Penicilina/Estreptomicina de 1% (Sigma). O media de cultura foi reabastecido diariamente durante o período de ciclismo. As pilhas eram então sujeitas ao esforço cíclico por 7 dias. Após 7 dias, os poços foram removidos da incubadora e lavado com Fosfato de Dulbecco Protegeu Salino (DPBS, Sigma). A camada da pilha foi dispersada em 0.05% Trypsin/EDTA (Sigma) incubado para 3 mínimos e sujeitado à agitação delicada para remover as pilhas sem danificar a camada do colagénio. Após a remoção das pilhas o colagénio segregado das pilhas podia ser investigado pela microscopia e pela espectroscopia ópticas da anisotropia da reflexão.

A capacidade para escolher uma vasta gama de velocidades cíclicas relacionar-se de volta ao crescimento do colagénio é muito útil. Inicialmente, o Dr. Smith pensado sobre a factura de seu próprio TESTE mas ter uma unidade pequena que poderia controlar o esforço cíclico e igualmente medir curvas do esforço/tensão no mesmos seria muito difícil fabricar a em-casa. Daqui, a unidade de Linkam foi comprada.

A fase TST350 é construída com os dois parafusos movimentadores de aço inoxidável à terra da precisão para manter o alinhamento vertical e horizontal uniforme perfeito. As maxilas da amostra movem-se em sentidos opostos para manter a amostra no campos refletidos e transmitidos do microscópio da vista. O controle e a precisão de Temperatura são excelentes com uma escala de -196°C a 350°C com controle 0.01°C e até as taxas 30°C/min, com virtualmente nenhum feedback da temperatura à medida da força. As Amostras podem rapidamente ser carregadas nas maxilas e um ensaio pode ser executado nos segundos. O feedback de dados da em-casa projetada e construída do transdutor da força, pode ser usado para indicar um lote em linha da força/distância quando as maxilas se estão movendo na velocidade constante ou quando a velocidade é variada para manter uma força constante. A velocidade das maxilas, força aplicado e a distância movida pode tudo ser variada relativo à temperatura da pilha. A câmara da amostra é selada e pode ser controlada com vários gáss inertes através das válvulas aptas do clique da precisão construídas em lados da fase.

Source: www.linkam.co.uk

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