Aviso: Esta página é uma tradução automática da página original em inglês. Por favor note uma vez que as traduções são geradas por máquinas, não tradução tudo será perfeita. Este site e suas páginas da Web destinam-se a ler em inglês. Qualquer tradução deste site e suas páginas da Web pode ser imprecisas e imprecisos no todo ou em parte. Esta tradução é fornecida como uma conveniência.

Os pesquisadores descobrem a proteína NPC1 como crucial para que o vírus de Ebola incorpore pilhas de anfitrião

Embora as manifestações sejam raras, o vírus de Ebola, a causa da febre hemorrágica de Ebola (EHF), é um dos vírus conhecidos os mais mortais que afetam seres humanos. De acordo com a Organização Mundial de Saúde (WHO), aproximadamente 1.850 casos do EHF com mais de 1.200 mortes foram documentados desde que o vírus foi identificado em 1976.

A apresentação clínica do EHF pode ser devastador: a febre, a fraqueza intensa, e as dores da junção e do músculo progridem à diarreia, vômito, e em alguns casos, sangramento interno e externo causado desintegrando vasos sanguíneos. Actualmente, não há nenhuma vacina aprovada e os pacientes são tratados somente para seus sintomas. Como o vírus do antraz e de varíola, o vírus de Ebola é classificado como um agente do bioterrorismo da categoria A pelos centros para o controlo e prevenção de enfermidades dos E.U. (CDC).

Até aqui, contudo, os pesquisadores tiveram somente uma compreensão limitada de como o vírus de Ebola ganha a entrada a uma pilha de anfitrião.

Usando uma linha celular humana incomum, os cientistas do Whitehead Institute e os colaboradores da Faculdade de Medicina de Harvard, a faculdade de Albert Einstein do instituto de investigação médica da medicina e do exército de E.U. de doenças infecciosas, identificaram a proteína da Niemann-Picareta C1 (NPC1) como crucial para que o vírus de Ebola incorpore pilhas e comece a replicating. A descoberta pode oferecer um novo e aproxima-se melhor para a revelação da terapêutica antivirosa, porque visaria uma estrutura na pilha de anfitrião um pouco do que um componente viral. Os resultados são relatados em linha na natureza esta semana.

“Agora, os povos fazem a terapêutica para neutralizar o micróbio patogénico próprio. Mas o problema é que os micróbios patogénicos podem rapidamente mudar e escapar a detecção e a eliminação pelo sistema imunitário,” diz o companheiro anterior Thijn Brummelkamp de Whitehead, agora um líder do grupo no instituto holandês do cancro (NKI). “Aqui nós obtemos uma boa ideia dos genes do anfitrião que são necessários para que o micróbio patogénico incorpore a pilha para a réplica. Talvez gerando a terapêutica contra aqueles factores do anfitrião, nós teríamos um alvo mais estável para drogas antivirosas.”

O método desenvolvido pelo laboratório de Brummelkamp para identificar factores do anfitrião confia no gene quebate para fora a função nas pilhas de anfitrião, um gene do gene na tempo-e documentando que pilhas sobrevivem a devido às mutações que têm recursos para a protecção da entrada viral.

Mas as pilhas humanas são diploid com duas cópias de cada cromossoma e de seus genes. Os pesquisadores podem confiantemente visar e bater para fora uma cópia de um gene, mas fazer assim para ambas as cópias é distante mais difícil e demorado. Se somente uma única cópia é silenciada, a outro continua a funcionar normalmente e mascara todo o efeito do KO.

Para evitar este obstáculo, janeiro Carette, um primeiro co-autor no papel da natureza e em um pesquisador pos-doctoral anterior no laboratório de Brummelkamp, empregou uma técnica que se tinha aplicado previamente para estudar a família cytolethal da toxina (CDT) da dilatação que é segregada pelas bactérias patogénicos múltiplas, incluindo o ducreyi de Escherichia Coli, de Shigella dysenteriae, e de Haemophilus. Cada espécie bacteriana desenvolveu suas próprias torções na estrutura de CDT, que pode ligar aos tecidos do alvo da bactéria da toxina.

Em seu trabalho de CDT publicado na biotecnologia da natureza, Carette junto com autores do co-chumbo do laboratório de Hidde Ploegh do membro de Whitehead, usou uma linha de pilhas haploid isoladas de um paciente crônico da leucemia (CML) mielóide. Porque estas pilhas, chamadas as pilhas KBM7, têm somente uma cópia de cada cromossoma exceto o cromossoma 8, os pesquisadores poderiam interromper a expressão de cada gene e tela para mutantes com as propriedades desejadas, neste caso sobrevivência de uma dose letal da toxina.

Após ter batido para fora genes individuais interrompendo a estrutura normal do gene, as pilhas resultantes do mutante KBM7 foram expor a vário CDTs. Nas pilhas que sobreviveram, Carette e os co-autores souberam que os genes que tinham sido interrompidos eram de algum modo crucial à intoxicação de CDT. Analisando os genomas da pilha da sobrevivência, Carette e os co-autores identificaram dez proteínas humanas que são usadas por CDTs durante a intoxicação, e aqueles factores do anfitrião parecem ser costurados à pilha visada de cada CDT.

“Eu encontrei surpreendente que há bastante alguma especificidade nas rotas da entrada para cada toxina,” digo Carette. “Se você toma CDTs que é muito similar entre si na estrutura, você poderia ainda ver diferenças significativas nos factores que do anfitrião exigem para fazer seu trabalho. Assim parece que cada micróbio patogénico evoluiu uma maneira específica e original de sua toxina que incorpora as pilhas.”

Para estudar o vírus de Ebola, os autores de Carette e de co-chumbo da Faculdade de Medicina de Harvard e da faculdade de Albert Einstein da medicina utilizaram um vírus de outra maneira inofensivo cloaked no revestimento da glicoproteína do vírus de Ebola. Usando este vírus e alterando as pilhas haploid um tanto, Carette e os co-autores podiam localizar os genes celulares que o vírus de Ebola confia sobre para incorporar a pilha.

Carette e os co-autores identificaram como necessário para a entrada do vírus de Ebola diversos genes envolvidos nos organelles que transportam e recicl proteínas. Um gene estêve em particular para fora, NPC1, que codifica para uma proteína de transporte do colesterol, e é necessário para que o vírus entre no citoplasma da pilha para a réplica. As mutações neste gene causam um formulário da doença da Niemann-Picareta, uma desordem neurológica finalmente fatal diagnosticada principalmente nas crianças.

Os colaboradores no instituto de investigação médica do exército de E.U. das doenças infecciosas (USAMRIID) testaram os efeitos do vírus de Ebola activo nos ratos que tiveram uma cópia do gene NPC1 batido para fora. Controle ratos, com as duas cópias de funcionamento do gene NPC1, sucumbidas rapidamente à infecção, quando os ratos do KO NPC1 foram protegidos pela maior parte do vírus.

“Isto é consideravelmente inesperado,” diz Carette, que é actualmente um professor adjunto activo na microbiologia & na imunologia na Faculdade de Medicina de Stanford. “Isto pôde implicar que as mutações genéticas no gene NPC1 nos seres humanos poderiam fazer alguns povos resistentes a este vírus muito mortal. E agora que nós sabemos que NPC1 é um factor do anfitrião do vírus de Ebola, fornece uma plataforma forte de que para começar desenvolver antivirais novos.”

Source:

Whitehead Institute