Métodos da síntese do ADN: uma entrevista com Clemens Richert

IMAGEM do ARTIGO de Clemens Richert

Como a síntese do ADN previamente foi realizada no laboratório?

A síntese automatizada do ADN estêve ao redor por quase três décadas. A diferença chave entre a metodologia estabelecida para fazer os oligodeoxynucleotides (estiramentos curtos do ADN único-encalhado) e o nosso método é a costa do molde.

Durante a síntese convencional do ADN, a seqüência é determinada pelo fluxo das soluções das garrafas que contêm os quatro blocos de apartamentos diferentes (A, C, G, ou T), controlado por um computador. Em nosso caso, a síntese é dirigida por uma costa do molde e é inteiramente (bio) produto químico.

Assim, nosso método é mais perto de que natureza faz quando o ADN replicated antes da divisão de pilha. Nós usamos um grupo mais reactivo nos blocos de apartamentos (um amino grupo), e nós mantemos este grupo em um estado unreactive durante a incorporação na costa crescente, usando-se o que os químicos sintéticos chamam “um grupo de protecção” para impedir a polimerização unspecific. Assim, a selecção da base correcta em cada etapa pode ser governada pelo emparelhamento baixo do Watson-Crick.

Como cruciais eram as enzimas a esta técnica?

De forma alguma. Nosso método é enzima-livre. Este é o que o faz que excita.

Você controlou produzir uma técnica de copi sem enzimas?

Sim, nós acreditamos assim. Eu devo mencionar, embora, que nós estamos lendo actualmente para fora estiramentos razoavelmente curtos da seqüência do molde, e a taxa de erro é um pouco significativa.

Esta técnica nova pode sintetizar o ADN no sentido preferido por natureza (3' sentido) e no sentido oposto (5' sentido). Que são os benefícios deste?

Neste momento, nós consideramos esta investigação básica do trabalho. Assim, é interessante ver que a síntese molde-dirigida de uma costa da filha não está limitada ao crescimento no 3' a 5' sentido. Se a natureza era executar a réplica em ambos os sentidos, não haveria nenhuma necessidade para fragmentos de Okazaki. Nós supor que a natureza não escolheu esta opção melhorar processos da réplica do controle.

Que são as limitações actuais a este método?

O que nós estamos produzindo é tècnica não ADN, mas um analog próximo do ADN com o um átomo de oxigênio que está sendo substituído por uma parte do NH. As duas estruturas são isoelectrónicas (o mesmo número de elétrons) e aproximadamente isosteric (stuctures tridimensionais similares no duplex), mas não são idênticas.

Isto pode ter benefícios, mas é igualmente uma limitação. Nós estamos trabalhando nas versões que usam blocos de apartamentos unmodified do RNA para superar esta limitação. Também, como mencionado mais cedo, nós somos limitados actualmente aos estiramentos curtos (uma volta helicoidal, 10 nucleotides), na maior parte devido a nossa técnica analítica (espectrometria em massa).

Como você pensa métodos da síntese do ADN se tornará no futuro?

Há uma raça para os métodos que produzem umas costas mais longas em uma única corrida em um sintetizador do ADN, de modo que menos reacções da ligadura sejam necessários aos genomas do synthetic do conjunto. Nós não somos parte dessa raça. Nosso trabalho centra-se sobre a demonstração da capacidade intrínseca de ácidos nucleicos ao replicate.

Você tem algum plano para uma pesquisa mais adicional nesta área?

Oh, sim. A “cimeira seguinte” que nós estamos esperando escalar é demonstrar diversos círculos do copi sem enzimas. Nós estamos igualmente muito interessados em que seqüências sobrevivem a diversos círculos da réplica.

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

http://chip.chemie.uni-stuttgart.de/

Sobre Clemens Richert

clip_image002

Ph.D. em Humano-Biologia, 1993, L.M.U. Munich, Ph.D. em Química, 1994, ETH Zurique

Actualmente cadeira da química biológica na universidade de Estugarda

Presidente da sociedade alemão da química do ácido nucleico (DNG, vêem: http://dnarna.de).

April Cashin-Garbutt

Written by

April Cashin-Garbutt

April graduated with a first-class honours degree in Natural Sciences from Pembroke College, University of Cambridge. During her time as Editor-in-Chief, News-Medical (2012-2017), she kickstarted the content production process and helped to grow the website readership to over 60 million visitors per year. Through interviewing global thought leaders in medicine and life sciences, including Nobel laureates, April developed a passion for neuroscience and now works at the Sainsbury Wellcome Centre for Neural Circuits and Behaviour, located within UCL.

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Cashin-Garbutt, April. (2018, August 23). Métodos da síntese do ADN: uma entrevista com Clemens Richert. News-Medical. Retrieved on April 02, 2020 from https://www.news-medical.net/news/20120907/DNA-synthesis-methods-an-interview-with-Clemens-Richert.aspx.

  • MLA

    Cashin-Garbutt, April. "Métodos da síntese do ADN: uma entrevista com Clemens Richert". News-Medical. 02 April 2020. <https://www.news-medical.net/news/20120907/DNA-synthesis-methods-an-interview-with-Clemens-Richert.aspx>.

  • Chicago

    Cashin-Garbutt, April. "Métodos da síntese do ADN: uma entrevista com Clemens Richert". News-Medical. https://www.news-medical.net/news/20120907/DNA-synthesis-methods-an-interview-with-Clemens-Richert.aspx. (accessed April 02, 2020).

  • Harvard

    Cashin-Garbutt, April. 2018. Métodos da síntese do ADN: uma entrevista com Clemens Richert. News-Medical, viewed 02 April 2020, https://www.news-medical.net/news/20120907/DNA-synthesis-methods-an-interview-with-Clemens-Richert.aspx.