Le néo- appareil-photo de sCMOS d'Andor est associé parfait pour la microscopie corrélative

CD44 est identifié comme récepteur important de surface de cellules impliqué dans l'adhérence des leucocytes de diffusion à l'endothélium, un procédé qui est critique pour leur trafic du réseau vasculaire. Maintenant, un groupe japonais de chercheurs employant un néo- appareil-photo ultra-sensible de sCMOS d'Andor dans leur installation corrélative de microscopie a expliqué que les projections de microvilli autour de la surface de cellules négocient cette adhérence.

Bien que la représentation de fluorescence soit une approche puissante d'étudier la prolifération cellulaire des récepteurs de membrane, elle est limitée dans sa capacité de manifester l'information structurelle fine. Par conséquent, l'équipe a tracé la distribution de CD44 sur la surface de cellules de lymphocyte dans le liquide par l'immunisé-fluorescence corrélative optique et la microscopie d'immuno-électron utilisant une fluorescence combinée et un microscope électronique atmosphérique de lecture. Une fois que le marquage extérieur des cellules CD44 était confirmé avec les images du néo- détecteur de sCMOS, le SEM atmosphérique a indiqué les microvilli sur la surface de cellules avec la localisation de la marque sur les microvilli.

Le « double marquage a été utilisé utilisant un anticorps monoclonal anti-CD44 et un anticorps secondaire conjugués avec le fluor 488 et 1,4 nanomètre d'Alexa franchement - les particules chargées de Nanogold, » dit Toshiyuki Murai, auteur important du papier. « Nous avons également expliqué que la demande de règlement des cellules avec la cytochalasine D a eu comme conséquence la perte des projections de microvilli et de l'annulation simultanée de l'adhérence de CD44-mediated à son ligand hyaluronan. Ces résultats proposent la pertinence fonctionnelle des microvilli dans l'adhérence de roulis de CD44-mediated sous le flux de cisaillement. »

La lumière corrélative et la représentation de SEM ont été accomplies en cultivant les lymphocytes de souris dans une boîte de Pétri à laquelle un hublot de nitrure de silicium de 100 nanomètre était fixe. Cet hublot est transparent au faisceau d'électrons, qui est projeté de sous l'assiette par le SEM inversé, alors que le microscope de fluorescence vertical excite l'échantillon provenant de ci-dessus par la lentille objective.

« le SEM atmosphérique ou environnemental permet à des scientifiques de durée d'examiner les spécimens biologiques dans le petit groupe exquis, bien au-delà des limites de diffraction optiques liées à la microscopie optique, » dit Orla Hanrahan, spécialiste en produit chez Andor. « Il peut employer pour observer que des cellules mammifères, les bactéries, et les cristaux de protéine, par exemple, et son choc dans des études corrélatives de microscopie de structure cellulaire et de fonctionnement ne peuvent pas être sous-estimés. Pour ces études, le néo- sCMOS du megapixel 5,5 d'Andor est l'associé parfait, ultra-sensible, à haute résolution pour la représentation de fluorescence. »

Le néo- appareil-photo de sCMOS du megapixel 5,5 d'Andor est seul une plate-forme refroidie de -40°C par aspirateur pour piloter le bruit foncé le plus inférieur possible. Néo- 5,5 a la définition à faible bruit et excellente avec un détecteur du megapixel 5,5 avec 6,5 pixels de µm et un diamètre de 22 millimètres. L'idéal pour la microscopie de cellules, l'astronomie, la pathologie digitale, et l'examen critique satisfait élevé, néo- 5,5 fournit le mode rafale de 30 fps inégalés supportés ou de jusqu'à 100 fps à sa mémoire interne de la GB 4. Le roulis et la souplesse globale de volet autres améliore la souplesse d'application, volet global en particulier offrant des moyens d'un idéal synchronisent à simplement et efficacement le néo- avec autre les dispositifs « en mouvement » tels que des étapes ou des sources légères de commutation et éliminer la possibilité de déformation spatiale quand les objectifs rapides de représentation.

Source:

Andor

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