La macchina fotografica neo dello sCMOS di Andor è partner perfetto per microscopia correlativa

CD44 è riconosciuto come ricevitore importante in questione nell'aderenza dei leucociti di circolazione ad endotelio, un trattamento della superficie delle cellule che è critico per il loro traffico nel sistema vascolare. Ora, un gruppo giapponese di ricercatori che utilizzano una macchina fotografica neo ultrasensibile dello sCMOS di Andor nella loro impostazione correlativa di microscopia ha dimostrato che le proiezioni dei microvilli intorno alla superficie delle cellule mediano questa aderenza.

Sebbene la rappresentazione della fluorescenza sia un approccio potente a studiare la distribuzione cellulare dei ricevitori della membrana, è limitata nella sua capacità di video benissimo le informazioni strutturali. Di conseguenza, il gruppo ha mappato la distribuzione di CD44 alla superficie delle cellule del linfocita in liquido dalla immune-fluorescenza correlativa ottica e dalla microscopia dell'immuno-elettrone facendo uso di una fluorescenza combinata e di un microscopio elettronico a scansione atmosferico. Una volta che il contrassegno di superficie delle cellule CD44 fosse confermato con le immagini dal rivelatore neo dello sCMOS, SEM atmosferico ha rivelato i microvilli sulla superficie delle cellule con la localizzazione del contrassegno sui microvilli.

“Il contrassegno doppio è stato impiegato facendo uso di un anticorpo monoclonale anti-CD44 e di un anticorpo secondario coniugati positivamente con i Fluor 488 e 1,4 nanometro di Alexa - particelle fatte pagare di Nanogold,„ dice Toshiyuki Murai, autore principale del documento. “Egualmente abbiamo dimostrato che il trattamento delle celle con citocalasina D ha provocato la perdita delle proiezioni dei microvilli e dell'annullamento simultaneo di aderenza di CD44-mediated al suo legante hyaluronan. Questi risultati indicano la pertinenza funzionale dei microvilli nell'aderenza di laminazione di CD44-mediated nell'ambito di flusso di tosatura.„

L'indicatore luminoso e la rappresentazione correlativi di SEM sono stati compiuti coltivando i linfociti del mouse in una capsula di Petri a cui una finestra del nitruro di silicio di 100 nanometro era fissa. Questa finestra è trasparente al fascio di elettroni, che è aggettato sotto dal piatto da SEM invertito, mentre il microscopio di fluorescenza dritto eccita il campione da sopra tramite l'obiettivo.

“SEM atmosferico o ambientale permette agli scienziati di vita di esaminare gli esemplari biologici in dettaglio squisito, molto al di là dei limiti di diffrazione ottici connessi con microscopia ottica,„ dice Orla Hanrahan, specialista del prodotto a Andor. “Può essere usato per osservare che le cellule di mammiferi, i batteri ed i cristalli della proteina, per esempio ed il suo impatto negli studi correlativi di microscopia sulla struttura e sulla funzione cellulari non possono essere sottovalutati. Per questi studi, uno sCMOS neo dei 5,5 megapixel di Andor è il partner perfetto, ultrasensibile, ad alta definizione per la rappresentazione della fluorescenza.„

La macchina fotografica neo dello sCMOS dei 5,5 megapixel di Andor è una piattaforma raffreddata vuoto unico di -40°C per determinare il disturbo scuro possibile più basso. 5,5 neo hanno risoluzione a basso rumore ed eccellente con un sensore di 5,5 megapixel con 6,5 pixel del µm e un diametro da 22 millimetri. L'ideale per microscopia delle cellule, astronomia, patologia digitale ed alta selezione contenta, 5,5 neo consegna il trasferimento in burst fps 100 di fino a o continui dei 30 fps ineguagliati alla sua memoria interna di 4 GB. La laminazione e la flessibilità globale dell'otturatore ulteriori migliora la flessibilità dell'applicazione, otturatore globale in particolare che offre i mezzi di un ideale a semplicemente ed efficientemente sincronizzano il neo con altro unità “muoventesi„ come le fasi o le sorgenti leggere di commutazione ed eliminazione della possibilità di deformazione spaziale quando oggetti rapidi della rappresentazione.

Source:

Andor

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