A câmera neo do sCMOS de Andor é sócio perfeito para a microscopia correlativa

CD44 é reconhecido como um receptor importante envolvido na adesão de leucócito de circulação ao endothelium, um processo da superfície da pilha que seja crítico para seu tráfico no vasculature. Agora, um grupo japonês de pesquisadores que usam uma câmera neo ultra-sensível do sCMOS de Andor em sua instalação correlativa da microscopia demonstrou que as projecções dos microvilli em torno da superfície da pilha negociam esta adesão.

Embora a imagem lactente da fluorescência seja uma aproximação poderosa a estudar a distribuição celular dos receptors da membrana, é limitada em sua capacidade para indicar muito bem a informação estrutural. Conseqüentemente, a equipe traçou a distribuição de CD44 na superfície da pilha do linfócito no líquido pela imune-fluorescência correlativa óptica e pela microscopia do immuno-elétron usando uma fluorescência combinada e um microscópio de elétron atmosférico da exploração. Uma vez que a rotulagem de superfície da pilha CD44 foi confirmada com as imagens do detector neo do sCMOS, SEM atmosférico revelou os microvilli na superfície da pilha com a localização da etiqueta nos microvilli.

“A rotulagem dupla foi empregada usando um anti-CD44 anticorpo monoclonal e um anticorpo secundário conjugado com Fluor 488 e 1,4 nanômetro de Alexa positivamente - partículas cobradas de Nanogold,” diz Toshiyuki Murai, autor principal do papel. “Nós igualmente demonstramos que o tratamento das pilhas com cytochalasin D conduziu à perda das projecções dos microvilli e da anulação simultânea da adesão de CD44-mediated a sua ligante hyaluronan. Estes resultados sugerem a importância funcional dos microvilli na adesão do rolamento de CD44-mediated sob o fluxo de tesoura.”

A luz e a imagem lactente correlativas de SEM foram realizadas cultivando os linfócitos do rato em um prato de petri a que um indicador do nitreto de silicone de 100 nanômetro era fixo. Este indicador é transparente ao feixe de elétron, que está projectado abaixo do prato por SEM invertido, quando o microscópio de fluorescência ereto excitar a amostra de cima através da lente objetiva.

“SEM atmosférico ou ambiental permite cientistas de vida de examinar espécimes biológicos no detalhe excelente, para além dos limites de difracção ópticos associados com a microscopia óptica,” diz Orla Hanrahan, especialista do produto em Andor. “Pode-se usar-se para observar que as pilhas mamíferas, as bactérias, e os cristais da proteína, por exemplo, e seu impacto em estudos correlativos da microscopia da estrutura e da função celulares não podem ser subestimados. Para estes estudos, o sCMOS neo dos 5,5 megapixel de Andor é o sócio perfeito, ultra-sensível, de alta resolução para a imagem lactente da fluorescência.”

A câmera neo do sCMOS dos 5,5 megapixel de Andor é uma plataforma de refrigeração de -40°C vácuo original para conduzir o mais baixo ruído escuro possível. 5,5 neo têm a definição de baixo nível de ruído e excelente com um sensor de 5,5 megapixel com os 6,5 pixéis do µm e um diâmetro de 22 milímetros. O ideal para a microscopia da pilha, a astronomia, a patologia digital, e a selecção satisfeita alta, 5,5 neo entrega o modo de explosão dos 30 fps ímpares sustentados ou dos até 100 fps a uma sua memória interna de 4 GB. O rolamento e a flexibilidade global do obturador mais adicionais aumentarem a flexibilidade da aplicação, obturador global em particular que oferece meios de um ideal sincronizam a simplesmente e eficientemente o neo com o outro dispositivos “móveis” tais como fases ou fontes claras do interruptor e eliminação da possibilidade de distorção espacial quando objetos moventes rápidos da imagem lactente.

Source:

Andor

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