La cámara nea del sCMOS de Andor es socio perfecto para la microscopia correlativa

CD44 se reconoce como receptor importante implicado en la adherencia de leucocitos de circulación al endotelio, un proceso de la superficie de la célula que sea crítico para su tráfico en la vasculatura. Ahora, un grupo japonés de investigadores que usaban una cámara nea ultrasensible del sCMOS de Andor en su montaje correlativo de la microscopia ha demostrado que las proyecciones de las microvellosidades alrededor de la superficie de la célula median esta adherencia.

Aunque la proyección de imagen de la fluorescencia sea una aproximación potente a estudiar la distribución celular de los receptores de la membrana, se limita en su capacidad de visualizar muy bien la información estructural. Por lo tanto, las personas correlacionaron la distribución de CD44 en la superficie de la célula del linfocito en líquido por la inmune-fluorescencia correlativa óptica y la microscopia del inmuno-electrón usando una fluorescencia combinada y un microscopio electrónico atmosférico de exploración. Una vez que la etiqueta superficial de la célula CD44 fue confirmada con las imágenes del detector neo del sCMOS, SEM atmosférico reveló las microvellosidades en la superficie de la célula con la localización de la escritura de la etiqueta en las microvellosidades.

La “etiqueta doble fue empleada usando un anticuerpo monoclonal anti-CD44 y un anticuerpo secundario conjugados con el fluor 488 y 1,4 nanómetro de Alexa positivo - las partículas cargadas de Nanogold,” dice Toshiyuki Murai, autor importante del papel. “También demostramos que el tratamiento de células con la citocalasina D dio lugar a la baja de las proyecciones de las microvellosidades y de la anualación simultánea de la adherencia de CD44-mediated a su ligand hyaluronan. Estos resultados sugieren la importancia funcional de microvellosidades en la adherencia del balanceo de CD44-mediated bajo flujo de resistencia.”

La luz y la proyección de imagen correlativas de SEM fueron logradas cultivando los linfocitos del ratón en una placa de Petri a la cual una ventana del nitruro de silicio de 100 nanómetro era fija. Esta ventana es transparente al haz electrónico, que es proyectado debajo del plato por SEM invertido, mientras que el microscopio de fluorescencia recto excita la muestra desde arriba a través de la lente de objetivo.

“SEM atmosférico o ambiental permite a científicos de vida examinar especímenes biológicos en detalle exquisito, mucho más alla de los límites de difracción ópticos asociados a microscopia óptica,” dice a Orla Hanrahan, especialista del producto en Andor. “Puede ser utilizado para observar que las células mamíferas, las bacterias, y los cristales de la proteína, por ejemplo, y su impacto en estudios correlativos de la microscopia de la estructura y de la función celulares no pueden ser subestimados. Para estos estudios, el sCMOS neo del megapíxel 5,5 de Andor es el socio perfecto, ultrasensible, de alta resolución para la proyección de imagen de la fluorescencia.”

La cámara nea del sCMOS del megapíxel 5,5 de Andor es una plataforma enfriada vacío único de -40°C para impulsar el ruido oscuro posible más inferior. 5,5 neos tiene resolución de poco ruido y excelente con un sensor del megapíxel 5,5 con 6,5 pixeles del µm y un diámetro de 22 milímetros. El ideal para la microscopia de la célula, la astronomía, la patología digital, y la alta investigación contenta, 5,5 neos entrega manera de explosión de los 30 fps incomparables continuos o de hasta 100 fps a su memoria interna de 4 GB. El balanceo y la adaptabilidad global del obturador más futuros aumenta la adaptabilidad del uso, obturador global particularmente que ofrece medios de un ideal sincronizan a simple y eficientemente el neo con otro los dispositivos de “mudanza” tales como escenarios o fuentes livianas de la transferencia y eliminación de la posibilidad de la distorsión espacial cuando los objetos rápidos de la proyección de imagen.

Source:

Andor

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