El sistema del CG-MALS de la tecnología de Wyatt habilita la caracterización de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína

Wyatt Technology Corporation, el líder mundial en la instrumentación para la caracterización macromolecular y del nanoparticle absoluta, está satisfecho destacar un nuevo estudio que describa el uso de la dispersión luminosa del multi-ángulo del composición-gradiente (CG-MALS) para la caracterización de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína.

El estudio, dado derecho el ` los discernimientos mecánicos en la máquina de reciclaje del complejo de la TRAMPA', fue publicado en la aplicación del 5 de febrero de 2015 la naturaleza. Los autores demuestran las ventajas de CG-MALS para determinar la estequiometría del complejo formado sobre la hetero-asociación entre el αSNAP (proteína soluble de la agregación del NSF) y la TRAMPA (receptores sensibles solubles de la proteína de la agregación del factor de N-ethylmaleimide) usando sistema biomolecular de la acción recíproca® del calipso de la tecnología de Wyatt.

La fusión de la membrana es esencial para muchos procesos fisiológicos en células eucarióticas incluyendo el tráfico de la proteína y de la membrana, la secreción de la hormona y la neurotransmisión. Las proteínas evolutivas de la TRAMPA tienen un papel dominante en estos procesos mientras que forman un complejo que impulse la fusión de la membrana en eucariotas. El NSF de la ATpasa (factor sensible de N-ethylmaleimide), así como broches de presión, desmonta el complejo de la TRAMPA en sus componentes de proteína, teniendo en cuenta cartuchos subsiguientes de la fusión. Debido a los límites de resolución inferior de técnicas usadas para los estudios estructurales en el supercomplex de NSF/SNAP/SNARE (20S), poco se sabe sobre la configuración molecular detallada del supercomplex.

CG-MALS cuantifica acciones recíprocas biomoleculares midiendo la masa molar peso-media de la solución de la proteína (Mw) sobre una serie de concentraciones y de composiciones. El análisis establece la afinidad obligatoria y la estequiometría molecular de las acciones recíprocas de una proteína-proteína de la gran variedad, incluyendo uno mismo y la hetero-asociación. Los escaparates as mano del estudio el uso de CG-MALS de ayudar a resolver preguntas críticas, tales como cómo el BROCHE DE PRESIÓN de la proteína del adaptador reconoce y obra recíprocamente con los complejos de la TRAMPA, así como el mecanismo para el desmontaje.

Los experimentos de CG-MALS se realizan con un sistema de gradiente de composición del calipso II, programado para preparar y para entregar automáticamente diversas mezclas de la proteína y del almacenador intermedio a un detector® de la dispersión® luminosa del multi-ángulo del AMANECER HELEOS II y a un detector en línea de la concentración de UV/Vis. Los datos se detectan y se analizan en el software único del CALIPSO para determinar los constantes de la disociación del esquema y del equilibrio de la asociación. Cuantificando cualquier autoasociación y fijando la hetero-acción recíproca entre el αSNAP y cada complejo de la TRAMPA, era posible confirmar las estructuras cryo-EM que ofrecieron un modelo de funcionamiento del desmontaje NSF-mediado del complejo de la TRAMPA.

El Dr. Daniel Some, director de marketing y científico principal en la tecnología de Wyatt explica:

La caracterización absoluta de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína tales como el sistema de SNAP-SNARE demostrado en este estudio puede probar desafiar. Las técnicas tradicionales no ofrecen el nivel de detalle requerido en la afinidad y la estequiometría molecular absoluta de estos complejos, así que significa que las preguntas científicas críticas siguen siendo por contestar. El calipso II habilita la cuantificación rápida y la caracterización profundizada de las acciones recíprocas biomoleculares, escritura de la etiqueta-libre e inmovilización-libre, complementando otras técnicas biomoleculares de la acción recíproca. Nos encantan que este estudio se ha publicado en naturaleza para continuar aumentar la percatación de las capacidades versátiles de CG-MALS para la investigación de las ciencias de la vida y el revelado biotherapeutic.

En un revelado relacionado, Wyatt publicó recientemente un estudio realizado en el instituto de investigación de Scripps, detallando cómo CG-MALS opera con la cromatografía de la talla-exclusión acoplada a MALS (SEC-MALS) para caracterizar completo la acción recíproca de una glicoproteína viral (vGP) con un anticuerpo (Ab). En la nota de uso de “anticuerpo comprensión y acciones recíprocas virales de la glicoproteína usando CG-MALS,” SEC-MALS estableció el estado y el grado diméricos de glycosylation del vGP, mientras que CG-MALS cuantificó la autoasociación del vGP junto con la estequiometría y la afinidad obligatoria del vGP - acción recíproca del Ab. Esta combinación potente de las técnicas de la dispersión luminosa permitió descifrar la acción recíproca vGP-Ab con mayor detalle que era sabido previamente. Este estudio rindió la información valiosa con respecto al epitopo potencial para el anticuerpo, que es esencial para formular tratamientos de post-exposición o diseñar los antígenos para la producción vaccínea.

Este estudio está disponible para transferir directamente en www.wyatt.com/AppNotes/CG-MALS.

Source:

Wyatt Technology

Citations

Please use one of the following formats to cite this article in your essay, paper or report:

  • APA

    Wyatt Technology. (2019, June 20). El sistema del CG-MALS de la tecnología de Wyatt habilita la caracterización de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína. News-Medical. Retrieved on December 12, 2019 from https://www.news-medical.net/news/20150326/Wyatt-Technologye28099s-CG-MALS-system-enables-characterization-of-complex-protein-protein-interactions.aspx.

  • MLA

    Wyatt Technology. "El sistema del CG-MALS de la tecnología de Wyatt habilita la caracterización de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína". News-Medical. 12 December 2019. <https://www.news-medical.net/news/20150326/Wyatt-Technologye28099s-CG-MALS-system-enables-characterization-of-complex-protein-protein-interactions.aspx>.

  • Chicago

    Wyatt Technology. "El sistema del CG-MALS de la tecnología de Wyatt habilita la caracterización de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína". News-Medical. https://www.news-medical.net/news/20150326/Wyatt-Technologye28099s-CG-MALS-system-enables-characterization-of-complex-protein-protein-interactions.aspx. (accessed December 12, 2019).

  • Harvard

    Wyatt Technology. 2019. El sistema del CG-MALS de la tecnología de Wyatt habilita la caracterización de las acciones recíprocas complejas de la proteína-proteína. News-Medical, viewed 12 December 2019, https://www.news-medical.net/news/20150326/Wyatt-Technologye28099s-CG-MALS-system-enables-characterization-of-complex-protein-protein-interactions.aspx.