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Le système Alt-r CRISPR-Cas9 novateur d'IDT améliore le pouvoir de retouche de génome, réduit la toxicité de cellules

Les technologies intégrées d'ADN (IDT), introduit une approche neuve à CRISPR-son système Alt-R™ CRISPR-Cas9 novateur, basé sur le système naturel d'ARN des pyogènes CRISPR de S.

Le système Alt-R™ CRISPR-Cas9 améliore grand grâce de pouvoir de retouche de génome aux crRNAs recherche-optimisés (ARN de CRISPR) et aux tracrRNAs (crRNA de transport-commande). Avec le pouvoir et la sécurité améliorés, le système épargne le temps en fournissant les réactifs faciles et prêts à employer d'ARN qui réduisent également la toxicité de cellules en évitant l'activation des réactions immunitaires innées cellulaires.

Le système CRISPR/Cas9 est devenu un principal outil pour modifier des génomes des organismes d'Escherichia coli aux êtres humains. L'unique-guide chimérique RNAs (sgRNAs, composés de fusion entre les crRNAs et les tracrRNAs) sont couramment copiés dans des vecteurs de plasmide, et alors employés pour exprimer le déclencheur d'ARN en cellules.

Cependant, l'utilisation des vecteurs de plasmide de piloter la retouche de génome manque de l'efficacité et est soupçonnée d'entraîner des effets significatifs de hors circuit-objectif, alors que les sgRNAs obtenus par la transcription in vitro peuvent être activation traversante chère et cytotoxique du système immunitaire inné dans beaucoup de types de cellules mammifères. La fabrication des sgRNAs de haute qualité par synthèse chimique est également due difficile et coûteux à leur longueur.

Traitant les problèmes du système basé sur sgRNA, IDT a effectué la recherche considérable sur optimiser le système bactérien indigène des pyogènes de S., qui emploie un crRNA en deux parties : composé de tracrRNA pour diriger le clivage Cas9.

Les chercheurs d'IDT ont trouvé qui était non seulement lui possible de diminuer le crRNA et des tracrRNAs à 36 et 67 nucléotides respectivement, mais qui faire a ainsi augmenté le pouvoir de sur-objectif de la réaction avec d'autres approches.

Le rapetissement des ces RNAs permet à IDT de fabriquer les composantes en tant qu'oligonucléotides de haute qualité et synthétiques d'ARN qui obtiennent moins d'activation de toxicité et de réaction immunitaire innée en cellules. Les chercheurs peuvent également tirer bénéfice d'un sûr, rapidement et protocole facile sans la préparation de particule virale, transcription in vitro, ou opérations de purification.

M. Mark Behlke, CHF d'IDT a commenté :

Nous sommes très enthousiastes au sujet de notre gamme de produits Alt-r CRISPR-Cas9 neuve. Pour nous il était logique de reconsidérer le système naturel, car la nature est généralement très bonne pour concevoir les solutions-parfois hautement efficaces qu'un nudge habile dans le bon sens est tout qui est nécessaire.

Notre recherche dans cet endroit a trouvé ce rapetissement les crRNAs et les résultats naturels de tracrRNAs dans un inattendu, pourtant significatif, amélioration sur des méthodes actuelles de CRISPR. Non seulement éditant le rendement est amélioré, mais le RNAs synthétique plus court plus facilement sont effectués utilisant de haute qualité, méthodes de fabrication de haut-débit.

Ce système en deux parties d'ARN est également particulièrement utile pour des manipulations très propres en cellules, car il ne part pas d'une empreinte de pas qui pourrait entraîner les modifications non désirées au génome, comme des expressions ADN-dirigées que les systèmes peuvent. Nous pensons cette promesse grande d'expositions de système non seulement pour rendre CRISPR beaucoup plus accessible et efficace dans la recherche mais également dans des demandes thérapeutiques exact de cette raison.

Les chercheurs peuvent découvrir plus au sujet du système neuf novateur dans un « rendement intitulé webinar d'augmentation de la retouche de génome avec le système Alt-R™ CRISPR-Cas9 : modèle et utilisation » mercredi 4 novembre 2015. M. Garrett Rettig, un scientifique de recherches en génétique moléculaire à IDT qui a abouti des efforts de recherche dans des méthodes de retouche de génome de CRISPR présentera le webinar à 9h du matin et à l'heure d'hiver centrale de 13h.

L'exposé suit en circuit « des outils neufs récents d'ARN pour la retouche optimisée du génome CRISPR/Cas-9 » webinar, qui a présenté des détails de la recherche qui a développé le système Alt-r CRISPR-Cas9. La caractéristique webinar neuve de volonté un regard détaillé aux parties du système, expliquent comment concevoir et des crRNAs de la commande Alt-r CRISPR, et fournissent un guide par étages du procédé expérimental.

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