Linkam stationne en service dans l'installation de Wolfson Bioimaging à l'université de Bristol en tant qu'élément de la recherche triante endocytic de M. Paul Verkade

Les leaders de marché dans la microscopie à température contrôlée, instruments scientifiques de Linkam rendent compte de l'utilisation de leurs étapes à température contrôlée appliquées à CLEM et à microscopie à fluorescence à l'aide dans trier endocytic dans l'école des biochimies à l'université de Bristol.

Le CMS196 de Linkam en service dans le laboratoire de Verkade à l'université de Bristol : La première image montre un usager chargeant l'étape tandis que celle sur le bas montre l'étape sur un photomicroscope vertical de Leica.

M. Paul Verkade est un lecteur dans la représentation de cellules dans l'école des biochimies à l'université de Bristol où il dirige également l'élément de microscopie électronique de l'installation de Wolfson Bioimaging. Son orientation actuelle de recherches est de développer des techniques et des outils pour l'usage de la microscopie électronique légère corrélative (CLEM) étudiant trier endocytic. M. Verkade est actuel présidence de la partie de microscopie électronique de la société royale de microscopie et présidence du groupe de microscopie de Cryo, filiale à la société royale de microscopie. Il a également dispensé et enseigné sur plusieurs cours et ateliers sur des sujets tels que la congélation à haute pression, la microscopie électronique légère corrélative (CLEM), et la fin de support immuno, y compris des cours pratiques d'EMBO sur CLEM.

Regardant sa recherche plus en détail, M. Verkade discute son travail. « La recherche dans mon groupe se concentre sur des procédés intracellulaires de ségrégation, particulièrement dans le système endocytic (par exemple ségrégation de réutiliser la cargaison à partir de dégradant). Afin d'étudier ces procédés, nous employons beaucoup de photomicroscopie sous tension pour suivre ces événements dynamiques. Cependant la définition du photomicroscope est si basse pour concevoir certains aspects (par exemple en réutilisant des tubules de membrane soyez environ 50 nanomètre de diamètre). Ainsi nous voulons capter les étapes spécifiques de la représentation sous tension et analyser ceux plus en détail dans le microscope électronique dans de soi-disant expériences légères corrélatives de microscopie électronique. Il y a plusieurs voies d'effectuer ces expériences et nous employons des étapes de Linkam dans deux de ces flux de travail. »

« Afin de préserver l'ultrastructure en son état indigène, nous devons geler nos échantillons très rapidement (par exemple, la fixation chimique détruit les tubules de membrane). Nous pouvons alors vérifier la condition et la fluorescence sur ces échantillons gelés utilisant le Linkam CMS196 - étape corrélative de microscopie (image d'échantillon montrée ci-dessous). Si l'échantillon est EN BON ÉTAT, nous pouvons alors davantage le traiter, employant le cryo TEM ou plus souvent exécuter encastrer de remplacement et de résine de gel. Il serait intéressant à la mention que Linkam est très coopératif en effectuant des adaptations spéciales, dans notre cas modifiant le range-cassettes de réseau pour faciliter des échantillons plus épais que nous avons acquis utilisant la congélation à haute pression, plutôt que les réseaux normaux de fin de support. »

« La deuxième étape de Linkam que nous employons est une étape de refroidissement. Celui-ci est employé pour notre microscope de « photo-conversion », où en illuminant notre échantillon fluorescent très fortement nous produisons les radicaux de l'oxygène qui peuvent être transformés en précipité dense d'électron. Cependant en brillant tellement léger sur notre échantillon nous le chauffons aussi bien. Sans refroidissement efficace de l'échantillon utilisant l'étape à refroidissement par eau de Linkam, nous brûlerions notre échantillon et il littéralement fondrait/éclate. De nouveau, c'est un outil indispensable dans notre flux de travail de CLEM. »

Pour apprendre plus au sujet de Linkam et leur approche au développement des techniques neuves basées sur des étapes de la température pour relever des défis d'applications multiples, visitez s'il vous plaît www.linkam.co.uk.

Références :

  • Olmos, Y.L. Hodgson, J. Mantell, P. Verkade, et J.G. Carlton (2015). ESCRT-III règle la réforme nucléaire d'enveloppe. Nature, 522 : 236-239
  • Méthodes en biologie cellulaire, volume 124 : La lumière et microscopie électronique corrélatives II. partagé avec Thomas Müller-Reichert.
  • Méthodes en biologie cellulaire, volume 111 : La lumière et microscopie électronique corrélatives. Partagé avec Thomas Müller-Reichert.

Citations

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    Linkam Scientific Instruments. (2019, June 18). Linkam stationne en service dans l'installation de Wolfson Bioimaging à l'université de Bristol en tant qu'élément de la recherche triante endocytic de M. Paul Verkade. News-Medical. Retrieved on March 31, 2020 from https://www.news-medical.net/news/20151104/Linkam-stages-in-use-in-the-Wolfson-Bioimaging-Facility-at-the-University-of-Bristol-as-part-of-the-endocytic-sorting-research-of-Dr-Paul-Verkade.aspx.

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