Uso del sistema del preparato di Cryo-SEM di Quorum in biologia cellulare microbica con il cryotomography dell'elettrone al Laboratorio di Jensen

Tecnologie di Quorum, guide di tecnologia e del mercato nel rivestimento di microscopia elettronica e prodotti criogenici del preparato, rapporto su come il loro sistema del preparato di PP3010T CRYO-SEM sta utilizzando nel preparato di intere celle idratate per essere imaged facendo uso del cryotomography dell'elettrone nel Laboratorio di Jensen situato a HHMI Caltech.

Immagine “delle celle del pombe di Schizosaccaromicete del lievito di fissione„ per TEM - da Vitrobot che si congela sulle griglie di Quantifoil e sul trasferimento di Quorum PP3010T per FEI Versa MENTA la fresatura.

Alasdair McDowall è il Direttore del Centro di EM nel Laboratorio di Jensen al Howard Hughes Medical Institute situato a Caltech. Intestato dal Professor Grant Jensen, il Laboratorio usa l'Elettrone Cryotomography (ECT) per studiare l'architettura molecolare delle celle e del HIV microbici nel loro stato indigeno. Il fuoco è sui fondamenti di biologia cellulare microbica quali divisione cellulare, movimento e la secrezione come pure la struttura del HIV in tutte le fasi del suo ciclo di vita.

Il laboratorio ha aperto le sue porte nel 2002 e continua a spingere oggi i limiti della rappresentazione di alta risoluzione. Tuttavia, l'indagine sulle intere celle idratate congelate (materiali sensibili di vuoto e del raggio) nella camera del microscopio elettronico richiede le nuove soluzioni. Gli avanzamenti nelle tecniche per il preparato delle celle da Cryo Hanno Messo A Fuoco la Fresatura del Raggio Ionico per la caratterizzazione strutturale recentemente hanno fornito una nuova comprensione di queste architetture cellulari delicate.

Immagine “delle celle del pombe di Schizosaccaromicete del lievito di fissione„ per TEM - da Vitrobot che si congela sulle griglie di Quantifoil e sul trasferimento di Quorum PP3010T per FEI Versa MENTA la fresatura.

Cryo Ha Messo A Fuoco la fresatura del Raggio Ionico (cryo MENTE la fresatura) è un metodo di avanguardia per l'assottigliamento dei campioni biologici vetrificati che permette l'accesso alle regioni intracellulari di esemplari spessi (> 1 um) con facilità senza precedenti e conservazione strutturale. Fornisce la capacità di muoversi oltre le piccole celle batteriche della rappresentazione soltanto con il cryotomography dell'elettrone (ECT) e permetterà la prospezione delle celle eucariotiche, dei tessuti e dei biofilms microbici alla stessa risoluzione molecolare che il gruppo ha raggiunto con le diverse celle batteriche per la decade passata.

Inoltre, la capacità di assottigliare le diverse celle batteriche prima che la rappresentazione, senza perturbare la loro struttura, fornisca il più alto contrasto e la risoluzione se necessario, anche all'interno delle celle batteriche già sottili. Ancora, l'aggiunta di una cryo-fase all'esistenza MENTE il mulino a Caltech terrà conto ulteriore elaborazione dei metodi tanto necessari per la correlazione della microscopia di fluorescenza e tomografia dell'elettrone per l'ottimizzazione e l'identificazione delle strutture specifiche in profondità all'interno delle celle, dei batteri e dei tessuti eucariotici.

Immagine “delle celle del pombe di Schizosaccaromicete del lievito di fissione„ per TEM - da Vitrobot che si congela sulle griglie di Quantifoil e sul trasferimento di Quorum PP3010T per FEI Versa MENTA la fresatura.

Il Dott. McDowall usa il sistema del preparato del campione di cryo di Quorum PP3010T. Ciò è un sistema altamente automatizzato, di facile impiego, colonna-montato, raffreddato a gas del preparato di Cryo-SEM adatto alla maggior parte fa e modella di SEM, di FE-SEM e di FIB/SEM. Il gruppo di Jensen usa il loro sistema della preparazione con un microscopio elettronico a scansione di FEI Versa.

Il Quorum PP3010T è ideale per i nostri trasferimenti vitrosi delle cellule una volta dedicato a mantenere lo stato amorfo criogenico durante SEM e la preparazione di campioni di DualBeam. Il PP3010T permette l'operazione più facile e più pratica per gli esemplari conservati cryo di macinazione per tomografia dell'elettrone. La Sua progettazione assiste l'indagine sulle celle e sui tessuti idratati congelati dalla fornitura dadel meccanismo per il trasferimento idratato del campione, dal raffreddamento e dal controllo della temperatura criogenico all'interno di SEM o dal Piccolo Raggio Doppio durante il trattamento di fresatura. Nella nostra operazione, il Quorum PP3010T si è aggiunto ad un Microscopio Elettronico A Scansione Attuale del Raggio Doppio di FEI Versa in una cortesia della sala di controllo di clima del gruppo di Greer, Istituto di Tecnologia della California.„

Dott. McDowall

Per ottenere i dettagli completi dei sistemi del preparato di Cryo-SEM ed altri prodotti disponibili dalle Tecnologie di Quorum, visualizzi prego www.quorumtech.com.

Ringraziamenti: Le Tecnologie di Quorum ringrazia quanto segue per la divisione della loro ricerca: I Professor Grant Jensen & Julia Greer e DRS Matt Swuilius, Shrawan Mageswaran & Wei Zhao.