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Uso del sistema de la preparación de Cryo-SEM del Quorum en biología celular microbiana con cryotomography del electrón en el Laboratorio de Jensen

Tecnologías del Quorum, arranques de cinta del mercado y de la tecnología en la capa de la microscopia electrónica y productos criogénicos de la preparación, parte sobre cómo su sistema de la preparación de PP3010T CRYO-SEM se está utilizando en la preparación de células enteras hidratadas para ser reflejado usando cryotomography del electrón en el Laboratorio de Jensen situado en HHMI Caltech.

Imagen “de las células del pombe de Schizosaccharomyces de la levadura de la fisión” preparadas para TEM - por Vitrobot que congela en las matrices de Quantifoil y la transferencia del Quorum PP3010T para fresar de la BOLA de FEI Versa.

Alasdair McDowall es el Director del Centro del EM en el Laboratorio de Jensen en el Howard Hughes Medical Institute situado en Caltech. Dirigido por Profesor Grant Jensen, el Laboratorio utiliza el Electrón Cryotomography (ECT) para estudiar la configuración molecular de células y del VIH microbianos en su estado nativo. El enfoque está en los fundamentales de la biología celular microbiana tales como división celular, movimiento y secreción, así como la estructura del VIH en todos los escenarios de su ciclo vital.

El laboratorio abrió sus puertas en 2002 y continúa activar los límites de la proyección de imagen de alta resolución hoy. Sin Embargo, la investigación de células enteras hidratadas congeladas (los materiales sensibles del haz y del vacío) en el compartimiento del microscopio electrónico requiere nuevas soluciones. Los avances en las técnicas para la preparación de células por Cryo Enfocaron el Haz de Ión Que Fresaba para la caracterización estructural han proporcionado recientemente a un nuevo discernimiento de estas configuraciones celulares delicadas.

La Imagen “de las células del pombe de Schizosaccharomyces de la levadura de la fisión” se preparó para TEM - por Vitrobot que congelaba en las matrices de Quantifoil y la transferencia del Quorum PP3010T para fresar de la BOLA de FEI Versa.

Cryo Enfocó el Haz de Ión que fresaba (BOLA del cryo que friesa) es un método punta para enrarecer muestras biológicas vitrificadas que permite el acceso a las regiones intracelulares de especímenes gruesos (> 1 um) con facilidad sin precedente y la preservación estructural. Proporciona a la capacidad de moverse más allá de las pequeñas células bacterianas de la proyección de imagen solamente con cryotomography del electrón (ECT) y permitirá la exploración de células eucarióticas, de tejidos y de biofilms microbianos a la misma resolución molecular que el grupo ha logrado con las células bacterianas individuales para la última década.

Además, la capacidad de enrarecer las células bacterianas individuales antes de que la proyección de imagen, sin la perturbación de su estructura, proporcione a un contraste más alto y a la resolución cuando sea necesario, incluso dentro de las células bacterianas ya finas. Además, la adición de un cryo-escenario al molino existente de la BOLA en Caltech permitirá el revelado adicional de los métodos muy necesarios para correlacionar microscopia de fluorescencia y tomografía del electrón para el alcance e identificación de estructuras específicas profundamente dentro de las células, de las bacterias y de los tejidos eucarióticos.

Imagen “de las células del pombe de Schizosaccharomyces de la levadura de la fisión” preparadas para TEM - por Vitrobot que congela en las matrices de Quantifoil y la transferencia del Quorum PP3010T para fresar de la BOLA de FEI Versa.

El Dr. McDowall utiliza el sistema de la preparación de la muestra del cryo del Quorum PP3010T. Esto es un sistema altamente automatizado, fácil de usar, olumna-montado, enfriado por gas de la preparación de Cryo-SEM conveniente para la mayoría hace y modela de SEM, de FE-SEM y de FIB/SEM. El grupo de Jensen utiliza su sistema de la preparación con un microscopio electrónico de exploración de FEI Versa.

El Quorum PP3010T es ideal para nuestras transferencias vítreas de la célula cuando está dedicado a mantener el estado amorfo criogénico durante SEM y la preparación de espécimen de DualBeam. El PP3010T permite una operación más fácil y más práctica para los especímenes preservados cryo fresados para la tomografía del electrón. Su diseño ayuda a la investigación de células y de tejidos hidratados congelados proporcionando a un mecanismo para la transferencia hidratada de la muestra, a control criogénico del enfriamiento y de la temperatura dentro de SEM o al Pequeño Haz Doble durante el proceso fresado. En nuestra operación, el Quorum PP3010T fue agregado a un Microscopio Electrónico Existente de Exploración del Haz Doble de FEI Versa en una cortesía de la sala de mando del clima del grupo de Greer, Instituto de Tecnología de California.”

El Dr. McDowall

Para obtener los detalles completos de los sistemas de la preparación de Cryo-SEM y otros productos disponibles de Tecnologías del Quorum, visite por favor www.quorumtech.com.

Acuses De Recibo: Las Tecnologías del Quorum agradecen el siguiente por compartir su investigación: Profesores Grant Jensen y Julia Greer y DRS Matt Swuilius, Shrawan Mageswaran y Wei Zhao.