Les chercheurs de CNIO optimisent le système neuf capable de produire du modèle cellulaire du sarcome d'Ewing

Une équipe du Centre de Cancérologie National Espagnol (CNIO) a optimisé un système capable de produire d'un modèle cellulaire de sarcome d'Ewing. La technique, basée sur CRISPR et décrite dans les pages des États de Cellule Souche, rend lui possible de produire des modèles cellulaires pour analyser les mécanismes étant à la base de l'origine et de l'étape progressive de ceci et d'autres maladies, ainsi que la recherche des demandes de règlement neuves.

CRISPR, la technique génomique célèbre de retouche, sert non seulement à guérir les maladies, pour les recréer également dans les modèles cellulaires pour étudier les événements moléculaires qui les provoquent. Ces modèles sont essentiels d'étudier des voies diagnostiques et thérapeutiques neuves. Dans le document publié dans les États de Cellule Souche de tourillon, les auteurs présentent un développement technologique significatif capable de recréer le sarcome d'Ewing en cellules souche humaines adultes et embryonnaires.

« L'idée est d'avoir un système qui nous permet de produire d'un modèle qui est aussi précis que possible à ce qui se produit dans une tumeur, » a dit Sandra Rodríguez Perales, de la Cytogénétique Moléculaire et l'Ensemble Génomique de Bureau D'études et l'amorce du projet de recherche.

De cette façon, avec un modèle qui reproduit les origines de la maladie, il sera possible d'analyser les mécanismes fondamentaux et la base moléculaire de chaque pathologie. Dans le cas du sarcome d'Ewing, le déclencheur de la maladie est une translocation entre les chromosomes 11 et 22, qui provoque la fusion de deux gènes, ayant pour résultat un oncogene neuf.

Les auteurs avaient déjà l'habitude CRISPR pour induire ce changement et pour produire d'un modèle de cette maladie, mais ils avaient rencontré un inférieur de l'efficacité et d'autres difficultés méthodologiques en s'appliquant la technique aux cellules souche humaines. « Quand nous travaillions avec des lignées cellulaires, tout est allé régulièrement, mais quand nous nous sommes appliqués l'aux cellules souche, nous avons trouvé beaucoup de problèmes, » explique Raúl Torres Ruiz, co-auteur du papier.

Pour améliorer les résultats et polir la technique, ils trois stratégies comparées pour produire de cette translocation de la plupart de moyen efficace possible utilisant CRISPR. Après plusieurs expériences, elles ont noté cela en combinant l'utilisation d'un composé de la ribonucléoprotéine sgRNA-Cas9 produit dans le laboratoire (au lieu d'une expression de plasmide) et d'un ADN « agrafe » - une courte séquence qui connecte les extrémités de deux chromosomes qui brise le système de CRISPR et facilite pour cette raison la translocation ? le taux de succès accru par jusqu'à un multiple de sept. Ceci suggère, selon les auteurs, que nous soyons confrontés « à un outil solide pour induire des translocations visées ».

Toutes Les améliorations mises en application pendant l'étude ont permis aux auteurs de produire de ce modèle en cellules souche pluripotent induites (iPSC), qui ont l'énorme potentiel d'un point de vue scientifique, puisqu'elles constituent un modèle cellulaire idéal pour l'étude du développement des pathologies variées, parmi elles les stades initiaux des procédés oncogènes. Tout ceci permettra l'étude de la base mécaniste des pathologies telles que le sarcome d'Ewing.

De plus, il peut non seulement être utile pour ce sarcome, c'est également « une approximation admissible pour d'autres pathologies, » a dit Rodríguez Perales. « Cette stratégie - les auteurs concluent faciliteront la création des modèles de cancer des cellules souche humaines et de la retouche précise de génome pour rechercher les médicaments neufs ou des traitements cellulaires, de ce fait accélérant l'avance du laboratoire à la clinique. »

Source : http://www.cnio.es/ing/publicaciones/a-protein-a-molecular-staple-and-crispr-to-generate-an-ewing-sarcoma-model