Os pesquisadores de CNIO aperfeiçoam o sistema novo capaz de gerar o modelo celular do sarcoma de Ewing

Uma equipe do Centro de Investigação do Cancro Nacional Espanhol (CNIO) aperfeiçoou um sistema capaz de gerar um modelo celular do sarcoma de Ewing. A técnica, com base em CRISPR e descrito nas páginas de Relatórios da Célula Estaminal, torna o possível gerar modelos celulares para analisar os mecanismos que são a base da origem e da progressão desta e de outras doenças, assim como a busca para tratamentos novos.

CRISPR, a técnica de edição genomic famosa, serve não somente para curar doenças, para recreá-las igualmente em modelos celulares para estudar os eventos moleculars que os causam. Estes modelos são cruciais estudar caminhos diagnósticos e terapêuticos novos. No papel publicado nos Relatórios da Célula Estaminal do jornal, os autores apresentam uma revelação tecnologico significativa capaz de recrear o sarcoma de Ewing em células estaminais humanas adultas e embrionárias.

“A ideia é ter um sistema que nos permita de gerar um modelo que seja tão exacto como possível ao que está acontecendo em um tumor,” disse Sandra Rodríguez Perales, da Citogenética Molecular e a Unidade da Engenharia e o líder Genomic do projecto de investigação.

Desta maneira, com um modelo que reproduza as origens da doença, será possível analisar os mecanismos subjacentes e a base molecular de cada patologia. No caso do sarcoma de Ewing, o disparador da doença é uma translocação entre os cromossomas 11 e 22, que cause a fusão de dois genes, tendo por resultado um oncogene novo.

Os autores tinham usado já CRISPR para induzir esta alteração e para gerar um modelo desta doença, mas tinham encontrado um de baixo nível da eficácia e de outras dificuldades metodológicas em aplicar a técnica às células estaminais humanas. “Quando nós estávamos trabalhando com linha celular, tudo foi lisamente, mas quando nós a aplicamos às células estaminais, nós viemos através de muitos problemas,” explicamos Raúl Torres Ruiz, co-autor do papel.

Para melhorar os resultados e refinar a técnica, compararam três estratégias para gerar esta translocação na maioria de maneira eficaz CRISPR de utilização possível. Após diversas experiências, notaram aquele combinando o uso de um complexo do ribonucleoprotein sgRNA-Cas9 gerado no laboratório (no lugar de uma expressão do plasmídeo) e de um ADN “grampo” - uma seqüência curto que conecte as extremidades de dois cromossomas que quebra o sistema de CRISPR e facilita conseqüentemente a translocação? a taxa de êxito aumentada até por um múltiplo de sete. Isto sugere, de acordo com os autores, que nós estejamos enfrentados com “uma ferramenta contínua para induzir translocações visadas”.

Todas As melhorias executadas durante o estudo permitiram os autores de gerar este modelo nas células estaminais pluripotent induzidas (iPSC), que têm o potencial enorme de um ponto de vista científico, desde que constituem um modelo celular ideal para o estudo da revelação de várias patologias, entre elas as fases iniciais de processos oncogenic. Todo O isto permitirá o estudo da base mecanicista das patologias tais como o sarcoma de Ewing.

Além, não pode somente ser útil para este sarcoma, é igualmente “uma aproximação válida para outras patologias,” disse Rodríguez Perales. “Esta estratégia - os autores concluem facilitarão a criação de modelos do cancro das células estaminais humanas e do genoma exacto que editam para procurarar por drogas novas ou por terapias celulares, assim acelerando o avanço do laboratório à clínica.”

Source: http://www.cnio.es/ing/publicaciones/a-protein-a-molecular-staple-and-crispr-to-generate-an-ewing-sarcoma-model