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Les chercheurs développent la méthode neuve pour trier rapidement des virus VIH

Les chercheurs à l'EMBL, à l'ESPCI Paris, et à l'initiative vaccinique de SIDA d'International ont développé une technique neuve pour trier rapidement les virus VIH, qui pourraient mener à un développement plus rapide d'un vaccin pour le VIH, comme ils enregistrent dans la biologie de produit chimique de cellules.

La technique permettra à des scientifiques de recenser des caractéristiques spécifiques dans les protéines sur la surface du virus qui sont identifiées par le système immunitaire et d'obtenir une réaction assimilée à cela vue dans des Contrôleurs d'élite - les patients qui peuvent survivre sans traitement antiviral.

Environ 1% de patients avec le VIH - connu sous le nom de Contrôleurs d'élite - peuvent survivre sans traitement antiviral, parce que leurs systèmes immunitaires produisent certains genres d'anticorps de VIH-détail : protéines qui identifient des caractéristiques sur la surface du virus et grippent à elles, rendant le virus inactif. Le défi en développant un vaccin de VIH est de recenser des caractéristiques spécifiques dans les protéines sur la surface du virus qui sont identifiées par le système immunitaire et d'obtenir une réaction assimilée à cela vue dans des Contrôleurs d'élite.

Une technique très utilisée pour étudier des protéines sur les surfaces des cellules - qui est parfois également employée avec des virus - est trier fluorescence-activé de cellules (FACS). Vous prélevez un groupe des cellules et ajoutez les anticorps fluorescents qui grippent aux protéines extérieures que vous êtes intéressé dedans. Les cellules avec les protéines qui sont identifiées par les anticorps deviendront fluorescentes, alors que les cellules manquant de telles protéines pas. Vous pouvez alors mesurer la fluorescence de chaque cellule individuellement, envoyant les cellules fluorescentes dans un récipient pour davantage d'étude, et les cellules non fluorescentes dans des des autres. Ceci fonctionne bien pour étudier les cellules, aux lesquelles ayez les centaines de protéines extérieures pour que les anticorps grippent, produisant un signe intense de fluorescence. FACS peut également être employé pour trier de grands virus tels que le virus Ebola, mais pour étudier de plus petits virus avec moins protéines extérieures - comme le VIH - FACS n'est pas assez sensible. Maintenant les chercheurs à l'EMBL, à l'ESPCI Paris, et à l'initiative vaccinique de SIDA d'International ont développé une technique neuve pour trier rapidement les virus VIH, qui pourraient mener à un développement plus rapide d'un vaccin pour le VIH, comme ils enregistrent dans la biologie de produit chimique de cellules. L'étude Christoph Merten auteur explique.

Qu'avez-vous fait ?

Nous avons développé un système qui permet à nous d'analyser et au VIH de tri à un taux des centaines de virus par seconde, séparant les virus selon qu'ou pas leurs protéines extérieures ont des caractéristiques identifiées par des anticorps spécifiques. Au lieu d'employer les anticorps fluorescents qui gripperaient directement aux protéines virales - produisant seulement un faible signe - nous avons pris les anticorps normaux et non fluorescents et les avons fixés à une phosphatase alcaline appelée d'enzymes (AP). Nous alors avons joint les virus individuellement dans les gouttelettes du liquide, avec un produit chimique qui devient fluorescent une fois agi en circuit par AP. Les anticorps grippent aux protéines virales, et les enzymes jointes d'AP produisent beaucoup de molécules fluorescentes qui restent à l'intérieur de la gouttelette liquide, produisant un signe intense de fluorescence. Si les protéines du virus n'ont pas les bonnes caractéristiques, les anticorps avec des leurs enzymes d'AP ne gripperont pas et aucune fluorescence n'est produite. Nous pouvons pour cette raison étudier différents virus, les triant avec de grande précision selon qu'elles montrent les caractéristiques qui pourraient être exploitées en développant un vaccin contre le VIH.

Notres est un système microfluidic - en d'autres termes, il emploie la technologie conçue pour manipuler des quantités de liquide extrêmement petites. Le système entier est contenu sur une « frite » microfluidic - un dispositif de taille d'une Palm se composant des réseaux microscopiques des glissières pour que le liquide traverse. Ces glissières sont juste quelques centièmex d'un mm à travers, et chaque gouttelette dans nos expériences est environ 30 milliardièmes d'un millilitre. Les frites de Microfluidic offrent des avantages particuliers en fonctionnant avec des agents pathogènes aiment le VIH, puisqu'elles sont complet scellées et pour cette raison très sûr pour employer. Les systèmes particuliers de FACS peuvent produire les gouttelettes aéroportées, tellement des mesures plus rigoureuses d'endiguement sont exigées en fonctionnant avec les bactéries et les virus nuisibles.

Pourquoi importe-t-il ?

Notre méthode rend lui possibles d'analyser et des virus VIH de tri dans les quantités et aux vitesses qui n'ont pas été possibles avant. Ceci nous permet de vérifier rapidement des millions de variantes virales, qui devraient de manière significative accélérer le procédé de la mise au point de vaccin.

Dans nos expériences, chaque gouttelette a contenu un virus et des anticorps, mais il devrait également être possible d'ajouter une cellule à la gouttelette et d'étudier si les anticorps peuvent arrêter le virus de présenter la cellule. Ce n'est pas possible avec FACS, ainsi il ouvrent beaucoup de possibilités pour la future recherche.

Source : https://news.embl.de/science/1705-sorting-out-hiv/