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Los investigadores desarrollan el nuevo método para rápidamente clasificación virus del VIH

Los investigadores en EMBL, ESPCI París, y la iniciativa vaccínea del SIDA internacional han desarrollado una nueva técnica para rápidamente clasificación los virus del VIH, que podrían llevar a un revelado más rápido de una vacuna para el VIH, como denuncian en biología de la substancia química de la célula.

La técnica permitirá a científicos determinar características específicas en las proteínas en la superficie del virus que son reconocidas por el sistema inmune y sacar una reacción similar a ésa considerada en los controladores aéreos de la élite - los pacientes que pueden sobrevivir sin el tratamiento antivirus.

Los alrededor 1% de pacientes con el VIH - conocido como controladores aéreos de la élite - pueden sobrevivir sin el tratamiento antivirus, porque sus sistemas inmunes producen ciertas clases de anticuerpos VIH-específicos: proteínas que reconocen características en la superficie del virus y atan a ellas, haciendo el virus inactivo. El reto en desarrollar una vacuna del VIH es determinar características específicas en las proteínas en la superficie del virus que son reconocidas por el sistema inmune y sacar una reacción similar a ésa considerada en controladores aéreos de la élite.

Una técnica ampliamente utilizada para estudiar las proteínas en las superficies de las células - que a veces también se utiliza con los virus - es clasificación fluorescencia-activada de la célula (FACS). Usted recoge una muestra de células y agrega los anticuerpos fluorescentes que atan a las proteínas superficiales que usted está interesado hacia adentro. Las células con las proteínas que son reconocidas por los anticuerpos llegarán a ser fluorescentes, mientras que las células que faltan tales proteínas no. Usted puede entonces medir la fluorescencia de cada célula individualmente, enviando las células fluorescentes en un contenedor para el estudio adicional, y las células no fluorescentes en otro. Esto trabaja bien para estudiar las células, a las cuales tenga centenares de proteínas superficiales para que los anticuerpos aten, produciendo una señal fuerte de la fluorescencia. FACS se puede también utilizar para clasificación virus grandes tales como el virus de Ebola, pero para estudiar virus más pequeños con menos proteínas superficiales - como el VIH - FACS no es bastante sensible. Ahora los investigadores en EMBL, ESPCI París, y la iniciativa vaccínea del SIDA internacional han desarrollado una nueva técnica para rápidamente clasificación los virus del VIH, que podrían llevar a un revelado más rápido de una vacuna para el VIH, como denuncian en biología de la substancia química de la célula. El estudio Cristóbal Merten autor explica.

¿Qué usted hizo?

Desarrollamos un sistema que permite nos analizar y al VIH de la clase hasta una tasa de centenares de virus por segundo, separando los virus según si o no sus proteínas superficiales tienen características reconocidas por los anticuerpos específicos. En vez de usar los anticuerpos fluorescentes que atarían directamente a las proteínas virales - produciendo solamente una señal débil - tomamos los anticuerpos ordinarios, no fluorescentes y los sujetamos a una enzima llamada fosfatasa alcalina (AP). Entonces incluimos los virus individualmente en gotitas del líquido, junto con una substancia química que llega a ser fluorescente cuando es actuada conectado por el AP. Los anticuerpos atan a las proteínas virales, y las enzimas sujetadas del AP producen muchas moléculas fluorescentes que permanezcan dentro de la gotita líquida, creando una señal fuerte de la fluorescencia. Si las proteínas del virus no tienen las características correctas, los anticuerpos con sus enzimas del AP no atarán y no se produce ninguna fluorescencia. Podemos por lo tanto estudiar los virus individuales, clasificación los con alta exactitud según si muestran las características que podrían ser explotadas en desarrollar una vacuna contra el VIH.

Los nuestros son un sistema microfluidic - es decir utiliza la tecnología diseñada para manipular cantidades extremadamente pequeñas de líquido. El sistema entero se contiene en una “viruta microfluidic” - un dispositivo palma-clasificado que consiste en redes microscópicas de los canales para que el líquido atraviese. Estos canales son apenas algunos centésimo de un milímetro a través, y cada gotita en nuestros experimentos es alrededor 30 billionths de un mililitro. Las virutas de Microfluidic ofrecen ventajas determinadas al trabajar con los patógeno tienen gusto del VIH, puesto que se tapan totalmente y por lo tanto muy seguro utilizar. Los sistemas típicos de FACS pueden producir gotitas llevadas por aire, tanto dimensiones más rigurosas de la contención se requieren al trabajar con las bacterias y los virus dañinos.

¿Por qué importa?

Nuestro método permite analizar y virus del VIH de la clase en cantidades y a las velocidades que no han sido posibles antes. Esto nos permite probar rápidamente millones de variantes virales, que deben acelerar importante el proceso del revelado vaccíneo.

En nuestros experimentos, cada gotita contuvo un virus y los anticuerpos, pero debe también ser posible agregar una célula a la gotita y estudiar si los anticuerpos pueden parar el virus de incorporar la célula. Eso no es posible con FACS, así que abre muchas posibilidades de la investigación futura.

Fuente: https://news.embl.de/science/1705-sorting-out-hiv/