全体像を見ること、生きていセルのリアルタイムの分析

insights from industryKimberly WicklundDirector of Product ManagementEssen Bioscience

ジェームス Ives 著行なわれる Kimberley Wicklund とのインタビュー、 MPsych

セルおよびセル相互作用は非常に複雑、極めてダイナミックです。 これらの複雑なシステムを分析した場合研究者に直面する挑戦の概要を与えて下さい。

主挑戦の最初文衝突: 原動力。 あらゆるセルは原料 (細胞外のシグナル) で取り、何かを作り出すためにそれを処理するミニチュア工場です (生物的応答)。 しかし定常で動作し、同じを一日一日と見るために容易に微調整することができる工場とは違ってセルはダイナミックです。

応答を調査すればのにセルを使用すれば応答がいつ起こるかどのように確認しますか。 それがによって抜けていれば何か。 するときセルがしているそれは主挑戦であり、ことを知っていて。 もう一つの挑戦は生理学的な検索能力です。 セルラインか一次電池文化を見れば一貫した環境でそれらを保つために、大きい苦痛は取られます。

しかし一方ではそれらは分析的な器械で突かれ、突かれる幸せなホームを出入りして取られます。 これらの変更はどのように環境の細胞健康および機能に影響を与えますか。 私達がより複雑かより敏感なモデルの方に進歩するので、一貫した環境条件を維持することはセルを稼働した保つ、しかしまた元の生物系への維持の検索能力および実験の再現性を保障するためだけに重要です。

生理学的な検索能力の維持の別の挑戦は興味の生物的変更を検出するのに私達が試薬を使用すると起こります。 ほとんどの試薬は私達が調査しているまさに生物学を混乱させます。 試薬が生体細胞かとのそれらを使用する前にセル健康および形態にどのように影響を与えるか考慮することは重要です。

IncuCyte は HT-1080 NucLight 緑および A549 NucLight の赤いセルの混合された安定した人口の HD 段階の contrat/蛍光性の画像 (10x) を混ぜました。

最近まで細胞生物学の分析的な方法で金本位として何が使用されましたか。

細胞生物学のために、分析的な方法が顕微鏡のような器械をめっきしますキーは含むか、 cytometers 流れるか、または興味の生物学の検出を援助するのに比色か蛍光試薬と共に使用される読取装置を。

蛍光蛋白質の開発は、当然、セルずっと分析を行うための主進歩です。 これらの蛋白質は正常なセル動作に重要な中断なしに本質的に表現され、偽りなく生きていセルイメージ投射を可能にすることができます。

Incucyte S3 および機能の概要を与えて下さい。

セルは® 標準ティッシュ文化定温器の中で妨げられていなく残るが、 IncuCyte S3 は自動的に捕獲がおよび週生体細胞の画像を休みなく、何日も、分析したり、または月唯一のリアルタイムの生きていセルイメージ投射および解析システムです。

IncuCyte にセルが免疫細胞またはニューロンのような非付着性か敏感なセルタイプのために重大である実験全体静止しているとどまるようにする一義的で、コンパクトな移動式光学デザインがあります。 私達のアプローチはアプリケーション集中し、セルは健康集中します。

最近更新済ユーザー・インターフェースによって、 IncuCyte は生きていセルイメージ投射および分析のための 「エレベーターのない建物および使用」の状態を達成しています。 プラスはスケールで、 IncuCyte これを達成します。 新しいユーザーは 96 を行なうことができ、 - 384-well はほんの数分の内に実験し、次に映画をそしてちょうど少数のクリックとの出版物そして提示準備ができている図示の測定基準作成し。

私はまだ IncuCyte および私達の Woundmaker を使用して 96-well スクラッチ傷の試金をする方法を私が学んだエッセンで私の最初日を覚えています。  それはシードする実地時間の 30 分以上取らなかったし 96 のスクラッチを作成し、 IncuCyte に microplate を置き、そして得、自動的に分析するためにソフトウェアをセットアップしました。

グラフは偽りなくリアルタイムの分析すぐに構築し始めました。 私達が終わったときに、私は 「ことそれがか。か。か」。であることを言いました。 それはそれ、非常に簡単、アクセス可能、非常に非常に強力でした。

個々のユーザーのための生産性の改善に加えて、 IncuCyte S3 は全体の調査チームに権限を与えます。 複数のユーザは IncuCyte の複数のアプリケ−ションを並行して実行できま使われる時間を減らし使用できるために器械を待っています。 さらに、データは無制限、自由なネットワークライセンスによってあらゆるユーザーにとって遠隔にアクセス可能です。

新しい IncuCyte S3 によって、研究者は新しい実験を案出前に考えました可能できます。 彼らに今新しい洞察力だけ提供する、またスループットおよび合理化されたユーザーの経験へのアクセスがありますリアルタイムの生きていセル分析。

` のリアルタイムの」生きていセルイメージ投射および分析の重要性の概要を与えて下さいか。 なぜ実験作業の流れの一部としてセルを破壊するプロシージャを使用してよりもむしろ生きていセルサンプルを保つことはとても重要ですか。

単一のスナップショットよりもむしろ、連続的な分析は重大な応答か相互作用がによって決して抜けていないことを保障します。 なお、運動の、画像ベースの測定は実行中の生物学的過程に慣習的なエンドポイントの試金と達成することができないもっと生理学的に関連したデータおよびより深く、より有意義な洞察力をおよび細胞機能を提供します。

エンドポイントの試金の時間依存の応答の理解に得るためには、それはまとめるように何が起こったかの多重試金のセットアップおよびデータの連結が映像を要求します。 それは時間のかかり、高く、試金を行なったら更にサンプルを分析する機能がありません。

なお、技術が画像ベースでなければ、視覚で傾向を認可するか、または飛び地を査定できません。 非混乱の試薬を使用してリアルタイムイメージ投射そして分析を使うと画像および映画を使うと認可され、リアルタイムの意志決定を可能にすることができる集中依存したかセル特定の応答を明らかにするために、それぞれ井戸または容器は一定時間にわたり分析することができます。

セルが実験プロセスの間に破壊されないあり、流れ cytometry のような他の技術を使用して更に特徴付けることができますことまた利点が。

のはじめにおよびすっかりセル実験の密度そして形態をシードすることを評価できるように洞察力は別として連続的な生きていセルイメージ投射を使用して得、分析、またすぐに飛び地を査定できます。 生きていセル分析の実行の品質管理の面は見落すことができません。

Incucyte S3 を使用するときどんなアプリケーションが調査することができますか。 限定または制限がありますか。

IncuCyte S3 は文化容器およびアプリケーションの広い範囲と互換性があります。 IncuCyte S3 システムは表現型細胞に基づく試金の広い範囲とリアルタイムのセルモニタリングにおよび監視、試金のセル健康および実行可能性、移行および侵入、使用することができます。

IncuCyte はセル分析に人口ベースのアプローチを取ります。 生きていセルアプローチを用いる細胞レベル下の構造細部の調査に興味があれば、私達は最初にセルを特徴付け、人口レベルで変数を調査するのに IncuCyte を使用することを推薦し次に共焦点の顕微鏡検査のような高リゾリューションの技術と追います。

IncuCyte に 1,000 の同業者審査された記事上のの急速に成長のコレクションがあり、 IncuCyte を使用して新規アプリケーションは絶えず出版されています。

なぜ中イメージ投射装置を定温器内のセルに、残せます重要ですか。 この方法へどんな利点がありますか。

1 日、年前に、私達の創設者の 1 は実験室のまわりで歩いて、科学者を定温器に前後に歩き、セルを取り、そして器械に点検されるために持って来ることを観察していました。

彼 「考えますそれのようなセルを頼みましたか。 それは定温器の中にか」。坐っている間セルを見ることができればよりよくないです それは 「デザインの IncuCyte の物語そして」考える完全な例の始めです - 自然環境のユーザーを観察し、革新との問題を解決して下さい。

ティッシュ文化定温器は適切な混合物、温度および湿気でガスの大きいボリュームを保つ非常に信頼され、精密な装置です。 それはセルを稼働した保つように設計しました。

定温器の中の IncuCyte を置くことによって、私達はその信頼された環境にてこ入れします。 当然、組み込みの環境制御または追加項目のアクセサリを備えている、ガスの混合物の大幅により小さいボリュームの精密な規則は扱いにくく、困難である場合もあります器械があります。

画像処理および分析ソフトウェア作業ヘルプはどのように実験分析を自動化しますか。 どんなアプリケーションこの自動解析のソフトウェアのためですか。

さまざまな画像処理および分析ソフトウェアのプラットホームを学んでいたりおよび科学者を導いている私は私のキャリアの相当な部分を使用法に使いました。 多くのソフトウェアプラットホームは 「道具箱」のアプローチを取ります。

従来のイメージ投射システムによって画像処理フィルターの眩ますアレイによって興味の私の機能を送り出す方法を、私は最初にサンプルからの撮像装置からの画像におよび正しい人工物および光発電機能、そして正しい人工物自体目盛りを付けるためにステップを踏まなければなりませんでしたりそして把握し最終的に、いろいろ測定基準によって分析するために働きます….単一の画像。

このプロシージャを繰り返すためには、私は原稿を構築しますまたはうまく行けばバッチプロセスメニューがあります。 それは扱いにくいです、なんと言っても、私は絶えずどんなステップを私が踏んだ、そしてどこに私の画像があるか丁度覚えることを試みて。

IncuCyte は複数の利点があります。 最初に、器械に人工物を自動的に訂正する口径測定プロセスがあります。 2 番目に、ソフトウェアインターフェイスはあなたが手もとタスクのために必要とするツールだけ示します。

リアルタイムの生きていセル分析のより深い洞察力を得て下さい。 (a) 自動的に画像を、 (b) 容器のすべての位置の画像をすぐに見る使用 IncuCyte® VesselView 一定時間にわたり得ればすぐに実験結果を、と査定することは (d) が提示準備ができた timelapse グラフをすぐに生成するマスク、および (e) 眺めによって興味 (c) の画像で自動的に識別します興味の領域をすべての 96 EC50 か IC50 応答値を計算するために - または IncuCyte® PlateGraph およびエクスポートデータの 384-well 運動傾向急上昇します。

核蛋白質の赤い塊を数えている細胞増殖の試金をすれば、私達はカウントの赤の塊にツールを示します。 分析が neurite の結果の分析のようにより複雑、なら、私達はツールがそれをまたする与えます。 3 番目に、分析は全体の実験、すべての時間ポイントおよびすべての井戸に自動的に適用されます。

ユーザーは代表的な実験を使用してプロセス定義をセットアップ 1 回でき次にボタンのクリックの週後のその週を、毎月毎月適用します。 持続させて下さい、しかし最も確かに特に、画像すべておよび分析は捜せるデータベースで端正に一緒に保存されます。

調査の間にセル形態およびセル動きの観察によって何が得ることができますか。

セル形態および動きの変更を観察して免疫反応および腫瘍の転移を含む多くの正常なおよび病理学プロセスに洞察力を提供して下さい。 運動学上そして生理学的に関連した条件でこれらの変更を調査する機能は薬剤の処置およびそれに続く細胞応答の効果の理解に適切で、正確にこれらの変更がいつ発生するか正確に示すことを許可します。

セル形態および動きの視覚査定は、量的なデータしか確認しませんが、追加表現型情報をセル特定および時間依存の生物活動の側面図を描くために最終的に可能にします。

未来は何を IncuCyte S3 の技術のために保持しますか。 それ以上のヘルプの研究者はどのようにこの実験を将来行ないますか。

私達に前方のあるエキサイティングな開発があります。 私がたくさんの細部を与えることができない間、私達は実行中にニューロンのような回転楕円体そしてまた iPSC 得られたセルのようなより複雑なモデルを、査定しています。 私達は機能に生理学的な検索能力およびより深い洞察力の方に常に押しています。 Facebook および Linkedin の私達に私達の作業と最新保つために続くことを確かめて下さい!

読取装置はどこでより多くの情報を見つけることができますか。

www.incucyte.com で私達のウェブサイトを訪問して下さい。

Kimberley Wicklund について

キンバリー Wicklund は 2015 年にエッセンを結合する前に研究の顕微鏡検査のハードウェアおよびソフトウェアを使用するディケイドを使いました。 彼女はアプリケーション科学者およびテクニカルサポートマネージャとして製品管理で上陸する前に生命科学の器械使用の彼女のキャリアを始めました。

彼女は市場にいくつかのイメージ投射システム、装置およびソフトウェアプラットホームを進水させ、ベンダーの能力として多くの顕微鏡検査のコースで木の穴、冷たいばね港および台紙の無人島の生物的実験室で役立ちました。

彼女はカリフォルニアバークレーの大学で化学工学の彼女の PhD を得、低酸素の条件の乳癌のセル新陳代謝を調査しました、従って彼女は長く生理学的に関連した環境の重要性を認めてしまいました。 今では彼女はエッセンの生物科学に製品管理、アナーバー、ミシガン州の Sartorius の会社および生命のディレクターです。