O ` Nanoswitches' podia ser chave mais rapidamente, uns testes mais sensíveis para a detecção de biomarkers

Costas Projetadas do ADN -- o nanoscale utiliza ferramentas “nanoswitches chamados” -- poderia ser a chave os mais rapidamente, testes mais fáceis, mais baratos e mais sensíveis que podem permitir a detecção da alta fidelidade de biomarkers que indicam a presença de doenças diferentes, de tensões virais e mesmo de variabilidades genéticas tão subtis quanto uma mutação do único-gene.

“Uma aplicação crítica na investigação básica e na prática clínica é a detecção de biomarkers em nossos corpos, que transportam a informação vital sobre nossa saúde actual,” diz Wesley Wong, PhD. “Contudo, os métodos actuais tendem a ser baratos e fáceis ou altamente sensíveis, mas geralmente não ambos.”

é por isso Wong e sua equipe adaptaram sua tecnologia do nanoswitch do ADN -- demonstrado previamente à descoberta da droga do auxílio e à medida de interacções bioquímicas -- em uma plataforma nova que chamam o ensaio nanoswitch-ligado da imunoabsorção (NLISA) para a detecção rápida, sensível e específica da proteína, que relataram a esta semana em um papel novo nas Continuações da Academia Nacional das Ciências.

“É “um melhor de ambos os mundos” aproxima-se,” diz Wong, autor superior no papel, que é um investigador principal no Programa do Hospital de Crianças de Boston na Medicina Celular e Molecular, um professor adjunto na Faculdade de Medicina de Harvard e um membro da faculdade do associado no Instituto de Wyss para a Engenharia Biològica Inspirada na Universidade de Harvard. “Esta tecnologia poderia traduzir nos testes do laboratório e do ponto--cuidado que são tão disponíveis e fáceis de usar quanto testes de gravidez familiares, mas é muito mais sensível e exacta.”

A plataforma de NLISA usa uma electroforese à tela sintetizada, únicas costas do gel do atendimento do processo de ADN “reagentes” essa mudança sua forma na presença de um biomarker específico. Começam como por muito tempo, costas lineares do ADN, mas são decorados com proteínas que ligam a um biomarker de harmonização da proteína do interesse. Expor Uma Vez a esse biomarker de harmonização, as proteínas ligam-lhe e fazem-nas com que a costa do ADN dobre-se em um laço.

Em combinação com a electroforese do gel, essa mudança da forma faz extremamente fácil detectar mesmo se o biomarker do interesse esta presente. Na electroforese do gel, um campo elétrico puxa moléculas através de um gel poroso. Os nanoswitches Lineares do ADN movem-se muito mais rapidamente através dos poros no gel, quando os laços provocados do nanoswitch moverem muito mais lento devido a sua forma mais clunkier.

“Posto Simplesmente, as distâncias que os nanoswitches viajam através do gel indicam se um biomarker esta presente ou não? ,” diz primeiro autor Clinton Hansen, PhD, um companheiro pos-doctoral no laboratório de Wong.

“Execute o gel”

Tome, por exemplo, o antígeno próstata-específico (PSA), que é um marcador do soro de sangue usado para testar homens para o cancro da próstata. Para demonstrar seu sistema de NLISA, Wong e sua equipe cravaram amostras do soro de sangue com níveis variados de PSA. Então, combinando os reagentes do nanoswitch para a PSA com as amostras do soro, executaram a electroforese do gel na mistura. A equipe podia detectar a presença de PSA com sensibilidade mais alta em menos volume do que com ensaios comparáveis.

Além, durante uma outra demonstração do prova--conceito, a equipe de Wong mostrou que sua plataforma de NLISA poderia distinguir entre tensões virais alto-similares da febre de Dengue em 45 minutos ou menos.

“Executando um gel, nós molestamos os nanoswitches com um campo elétrico para reduzir resultados de falso positivo usando um processo chamado “correcção cinética, “” Wong explicamos. “Embora proteínas similares -- como tensões virais relacionadas -- o poder inicialmente “tropeça” os nanoswitches em laços, estas ligações fim-mas-não-bastante-perfeitas pode quebrar-se, saindo atrás somente dos resultados positivos verdadeiros. Isto permite que nós distingam entre as tensões virais que podem mesmo ser diferentes apenas por uma única mutação genética.”

O sistema de NLISA tem o potencial transformar-se um padrão para a detecção da proteína, Wong sugere, e poderia mesmo ser tornado um dispositivo portátil, handheld para o uso clínico.

Source: http://www.childrenshospital.org/