O teste sobre papel novo pode diagnosticar a infecção de Zika dentro de 20 minutos

Os pesquisadores do MIT desenvolveram um teste sobre papel que pudesse diagnosticar a infecção de Zika dentro de 20 minutos. Ao contrário dos testes existentes, o diagnóstico novo cruz-não reage com o vírus de dengue, um familiar próximo do vírus de Zika que pode produzir falsos positivos em muitos testes de Zika.

Este teste poderia oferecer um diagnóstico fácil de usar, barato, e portátil nos países onde Zika e a dengue são predominantes e o teste da bandeira de ouro que o RNA viral das medidas na circulação sanguínea não está disponível.

“É importante ter um único teste que possa se diferenciar entre os quatro serotypes da dengue e Zika, porque co-circulam. São espalhados pelo mesmo mosquito,” diz Kimberly Hamad-Schifferli, um professor adjunto da engenharia na universidade de Massachusetts em Boston, um cientista de visita no departamento do MIT da engenharia mecânica, e em um autor co-superior do papel.

Os pesquisadores trabalharam com cientistas em todo o mundo para testar o dispositivo novo em amostras pacientes e confirmaram que pode exactamente distinguir o vírus de Zika dos vírus relacionados.

O Lee Gehrke, Hermann L.F. von Helmholtz professor no instituto do MIT para a engenharia médica e a ciência (IMES), é igualmente um autor superior do estudo, que aparece na introdução Sept. do 27 da medicina Translational da ciência. Os primeiros autores do papel são cientista Irene Bosch da pesquisa de IMES e departamento do postdoc Helena de Puig da engenharia mecânica.

Não mais falsos positivos

Um dos desafios os mais grandes em diagnosticar Zika é que muitos dos testes estão baseados nos anticorpos que interagem com uma proteína viral chamada NS1, que é encontrado na circulação sanguínea de pacientes contaminados. Infelizmente, muitos outros vírus da mesma família, conhecida como flaviviruses, têm versões similares de NS1 e podem produzir um falso positivo. Flaviviruses inclui o vírus de Nilo ocidental e o vírus que causa a febre amarela, assim como o vírus de dengue.

Em um esforço para criar um diagnóstico mais preciso, a equipe do MIT exps para encontrar os anticorpos que interagiriam exclusivamente com a proteína NS1 produzida pelo vírus de Zika, assim como os anticorpos específicos a NS1 de cada um das quatro tensões diferentes do vírus de dengue.

Para conseguir este, os pesquisadores expor ratos aos vírus de Zika e de dengue e seleccionaram então os anticorpos resultantes, em pares, contra cada versão dos flavivirus da proteína NS1. Isto permitiu que identificassem pares de anticorpos que reagem somente com a uma versão de NS1 e não a alguma da outro.

“Nós soubemos pela análise da informática que se nós olhamos bastante, e nós amolamos para fora o repertório das pilhas de B destes animais, nós encontraríamos eventualmente aqueles anticorpos,” Bosch dizemos. “Nós podíamos amolar para fora muito poucos anticorpos dentro do repertório que lhe daria a unicidade na detecção.”

Os pesquisadores usaram estes pares para criar cinco testes separados, um para cada vírus. Revestiram tiras do papel com o um anticorpo de cada par, quando o segundo anticorpo foi anexado aos nanoparticles do ouro. Após ter adicionado a amostra de sangue do paciente a uma solução destes nanoparticles, a tira de papel é mergulhada na solução. Se a proteína do alvo NS1 esta presente, anexa aos anticorpos na tira de papel assim como os anticorpos do nanoparticle-limite, e a um ponto colorido aparecem na tira dentro de 20 minutos.

Esta aproximação exige cinco tiras de teste pela amostra testar para cada vírus, mas os pesquisadores estão trabalhando agora em uma versão que teste para todos os cinco com uma tira.

A maioria de países onde Zika e a dengue são predominantes não permitem que as amostras pacientes sejam enviados fora do país, assim que os pesquisadores viajaram a diversos países, incluindo México, Colômbia, Índia, e Brasil, para testar seus dispositivos com amostras pacientes.

Encontraram que seus resultados eram comparáveis àqueles obtidos pelos testes da reacção em cadeia (PCR) da polimerase, que detectam o RNA viral na circulação sanguínea. Os testes do PCR não são amplamente utilizados nas áreas onde o vírus de Zika é encontrado porque exigem os pessoais e o equipamento de laboratório treinados que não estão disponíveis em toda parte.

Vírus emergentes

A dengue contamina centenas de milhões de povos anualmente, na maior parte em regiões tropicais. Não é geralmente fatal, mas nas áreas onde há mais de um serotype que circula, é mais provável produzir uma doença severa, potencial risco de vida. Um diagnóstico que pudesse distinguir entre todos os quatro serotypes da febre de dengue poderia dar a doutores uma maneira de descobrir cedo em quando um serotype novo incorporou sua região.

“Quando nós viajamos aos lugares onde estes vírus são problemas, os povos lá dizem unânime que precisam mais fiscalização. Precisam de conhecer que vírus estão circulando em seus ambientes,” Gehrke dizem.

Os pesquisadores acreditam que sua aproximação deve igualmente os permitir de desenvolver rapidamente testes de diagnóstico para outros vírus relacionados que puderam emergir no futuro.

“Já selecionando este grupo de anticorpos que nós temos contra todos estes antígenos nós temos-nos, como o Nilo ocidental, já sabemos bom reagem. De modo que seja a informação que nós poderíamos se usar no futuro para desenvolver os testes adicionais que podem ser usados para detectar outros vírus emergentes,” Gehrke diz.

Estão trabalhando agora em um diagnóstico para o vírus emergente de Powassan, que é levado pelo mesmo tiquetaque que espalha a doença de Lyme. Powassan, encontrado principalmente nos Estados Unidos do nordeste e na região dos grandes lagos, causa um formulário severo da encefalite.