Candidatos novos de investigação da terapia do cancro com imagem lactente da vivo-pilha

insights from industryProfessor Lawrence KwongAssistant Professor, Department of
Translational Molecular Pathology, University
of Texas MD Anderson Cancer Center

Uma entrevista com prof. Lawrence Kwong, conduzido por James Ives, MPsych

Dê por favor uma vista geral de sua pesquisa no cancro e nos mecanismos que você e sua equipa de investigação estão olhando para visar com os candidatos novos da terapia.

Há dois elementos principais a que nós trabalhamos sobre no laboratório com respeito para drogar estudos. Um está identificando combinações novas de drogas, e está trabalhando em porque uma combinação de drogas deve trabalhar melhor do que cada apenas.

No passado, nós fizemos este para identificar a combinação MEK + CDK4/6 para a melanoma, nós estamos esperando usar o mesmo tipo de princípio para mover-se na fase do cholangiocarcinoma, cholangiocarcinoma somos um cancro colagogo que fosse razoavelmente raro no oeste mas é extremamente mortal.

Em termos do survivability, é quase certo acima lá com cancro do pâncreas, assim que nós temos uma extrema necessidade de terapias novas. Nós estamos testando agora, por exemplo, diversas combinações diferentes, que incluem drogas proprietárias DM aqui evoluída Anderson, assim que nós estamos realmente interessados no ataque dos ângulos diferentes múltiplos e nas maneiras que são novas.

Como seus estudos da resistência de droga na ajuda humana das amostras informam introspecções mecanicistas de como a resistência de droga ocorre?

Nós olhamos as amostras humanas da melanoma que tiveram a resistência de droga à combinação que eu mencionei previamente, inibidores MEK + CDK4/6, e nós identificamos uma mutação em um paciente. Era uma mutação razoavelmente comum no cancro geralmente mas, no contexto da melanoma, não foi realmente bons alvos a jusante estudados não tinha sido identificado.

O gene próprio, a proteína própria, é targetable, mas há algumas edições com mover essa classe da droga na clínica. Nossa ideia era mover mais distante a jusante, nós conduzimos alguns ensaios imparciais da disposição da proteína e identificamos um alvo da droga que fosse raro para a mutação que conduz a resistência, e nós modelamos este nas linha celular.

Para isto, nós usamos o sistema de análise da Vivo-Pilha do IncuCyte® da ciência biológica de Essen. Uma vez que nós identificamos a droga da contador-resistência, nós combinamo-la com a combinação de MEK+CDK que, se nós não tivemos o IncuCyte, tomaria nos muito a uns muitos tempos fazer cada única combinação que nós quisemos fazer: nós sobre-tínhamos expressado a mutação da resistência, mas igualmente o tipo selvagem versão do gene e o controle GFP, assim que nós tivemos um número de combinações diferentes nas linha celular múltiplas que nós quisemos testar.

O IncuCyte permitido não somente nos para fazer isso, mas nós igualmente usou-o ao apoptosis e à proliferação da imagem, que nos deram alguns componentes mecanicistas também.

Como a dose de um tratamento afecta a resistência das células cancerosas a esse tratamento? Que pesquisa você conduziu na resistência da dose de candidatos da droga em amostras humanas?

Aquela é uma grande pergunta, neste estudo que nós conduzimos uma curva da dose de 8 pontos para tudo, em cada combinação e nas únicas drogas. A produção era realmente um benefício enorme. Com a dose essa nós usamos-nos, essencialmente, vimos a resistência em toda a linha. Não importa como alto nós fomos com a dose da droga, nós ainda vimos a resistência.

Tão pelo menos in vitro nós sentimos que nós necessários algo realmente por mais forte que a terceira droga a entrar, e nós sintamos como a droga e o alvo da droga que nós escolhemos é muito bom.

A droga particular que nós escolhemos é um do primeiro e somente as drogas que saíram para este alvo, nós está esperando drogas da segunda geração para sair, mas nós estamos consideravelmente felizes com como trabalha. Assim, nós não tivemos que ir muito altamente com a dose da droga superar a resistência a algum grau.

Que pesquisa é você e seu grupo que conduzem para investigar biomarkers do cancro e os tratamentos novos que visam estes genes?

Nós estamos indo fazer coisas diferentes de um par no espaço da melanoma como uma continuação a este papel. O que nós estamos planeando fazer devemos atravessar os ficheiros das amostras, conhecendo as amostras que nós temos em DM Anderson que são muitas centenas, e para fazer a análise do ADN para nos ver como frequentemente nós vemos a mutação encontraram e uma vez nós vemo-las, nós podemos procurar este marcador a jusante que igualmente serve como o alvo da resistência de droga.

Para a pesquisa do cholangiocarcinoma nós estamos fazendo, como eu mencionei que é um cancro razoavelmente raro, mas nós encontramos que nós tivemos 90 amostras cirúrgicas em DM Anderson a trabalhar com e gerar um microarray do tecido e, esperançosamente, fazemos alguma análise do biomarker lá. Nós somos interessados igualmente em desenvolver as combinações novas da droga que incluem algumas das drogas proprietárias que nós temos aqui.

Como a imagem lactente da vivo-pilha informa sua pesquisa? Como você usa o sistema de IncuCyte?

Eu penso a coisa que nós a maioria como aproximadamente o sistema temos que fazer com a maneira que eu aproximo a ciência no laboratório, que é esse tipo de I'm de um perfeccionista e I igualmente supor em segundo meus próprios resultados todo o tempo.

Eu penso sempre sobre se este ou aquele poderiam ter ido mal, se é possível que nós tivemos o chapeamento desigual das pilhas, se é possível nós tivemos a contaminação do poço e de outras variáveis da confusão do potencial.

Este o tipo das coisas é muito difícil de controlar para com, por exemplo, um ensaio da violeta de cristal ou um ensaio do glo do titer da pilha, mas o IncuCyte removeram aqueles medos que nós temos sobre estes problemas geralmente.

Nós podemos ir de novo nos dados e para ver se havia um chapeamento desigual, se havia alguma aglutinação estranha das pilhas em uma bem, e em caso afirmativo, nós podemos olhar o que acontece se nós removemos aquele bom.

Então nós podemos decidir se nós precisamos de repetir bem, ou uma linha celular. Nós podemos ver se havia a contaminação, de que não pode tão facilmente ser escolhido acima se você teve que atravessar cada único bem sob um microscópio você mesmo. Ter a confiança nos resultados é aspecto enorme dele.

Que métodos você se estava usando previamente para terminar sua pesquisa? Que vantagens há a usar a imagem lactente da vivo-pilha com o sistema de IncuCyte?

Primeiramente nós estávamos trabalhando com análise do valor-limite. Nós tomaríamos as pilhas após quatro dias e nós mancharí-os-amos com o glo do titer da violeta de cristal ou da pilha, usando um leitor da placa, que fosse muito padrão.

Aqueles todos têm seus próprios problemas originais, especialmente de que que você não pode fazer análises múltiplas como a análise do apoptosis ao mesmo tempo, que você pode com IncuCyte.

Há igualmente então a necessidade de executar um controle. A maneira que nós nos usamos para controlar para carregar é chapear uma placa replicate e adicionar a violeta de cristal àquela após 24 horas com a esperança que é uma avaliação áspera de como bom você chapeou seus poços reais.

Agora você não tem que fazer aquele, nós podemos saltar nas imagens quatro horas depois que chapeando para ver como consistente nós éramos, e se estava, nós apenas repetirí-o-amos.

Uma outra vantagem que nós não podíamos conseguir com nossos métodos precedentes é a capacidade para investigar mudanças na morfologia da pilha, especialmente quando se trata das drogas, que podem facilmente fazer com que as pilhas aumentem em tamanho, a três, quatro vezes, que nós podemos ver agora ver bastante claramente.

Que você quereria ver incorporado no sistema de IncuCyte no futuro para o ajudar a promover sua pesquisa?

Nós fomos interessados naquele tempo no sistema® da migração e da invasão da pilha da ferida do risco de IncuCyte para ensaios da invasão, porque as câmaras tradicionais de Boyden têm algumas desvantagens incluir dificuldades em dosar a pesquisa daquela também.

Infelizmente, nós não tivemos os fundos, mas é algo que, se nós podíamos obter no futuro os fundos, eu amaria ter.

Que são os alvos futuros para sua pesquisa?

Nós estamos muito interessados na metástase, em vários cancros diferentes. Nós igualmente trabalhamos no cancro do cólon, a um grau inferior, onde nós temos alguns candidatos para motoristas da invasão e da metástase; nós estaríamos muito interessados em testar estes no sistema de IncuCyte.

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

Sobre o prof. Lawrence Kwong

  • primeiro modelo visado do rato 2007 do cancro do cólon (PNAS)
  • identificação 2012 da combinação MEK+CDK4/6 para a melanoma dos NRAS (MED Nat), conduzindo ao ensaio clínico
  • identificação 2015 de testes padrões da proteína da resistência do inibidor de BRAF nas amostras humanas (JCI)
  • exome 2017 inteiro que arranja em seqüência a análise da resistência dos modelos da melanoma do rato e do inibidor de BRAF (relatórios da pilha)
  • organizador 2017 do grupo da análise do cholangiocarcinoma de TCGA (relatórios da pilha)
  • 2017 autores co-correspondentes, modelo metastático do rato do cancro do cólon (genes & revelador)

Citations

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    Essen BioScience, Inc. A Sartorius Company. (2018, August 23). Candidatos novos de investigação da terapia do cancro com imagem lactente da vivo-pilha. News-Medical. Retrieved on February 19, 2020 from https://www.news-medical.net/news/20171016/Investigating-new-cancer-therapy-candidates-with-live-cell-imaging.aspx.

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