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Amostras biológicas de medição usando a PRESSÃO

Uma entrevista com Dr. Frank Lafont, Institut Pasteur de Lille conduziu daqui até abril Cashin-Garbutt, miliampère (Cantab)

Por favor pode você dar uma breve introdução a sua pesquisa?

Meu grupo está interessado na interacção do micróbio patogénico do anfitrião e nós focalizamos principalmente em como as bactérias incorporam pilhas. Essencialmente, a ideia é que se você pode impedir as bactérias das pilhas entrando, a seguir você impedirá a doença.

Crédito: Kotin/Shutterstock.com

Como o AFM tem avançado ou tem ajudado directamente sua pesquisa?

Quando uma bactéria ligar a uma pilha, que seja a primeira etapa (a etapa da adesão), há muitas interacções mecânicas dentro daquela, que influenciam então como a pilha responderá à invasão pelo erro. Nós pensamos que esta é uma etapa crucial que organize o destino desta resposta e se um micróbio patogénico é bem sucedido em replicating dentro da pilha.

Previamente, o AFM foi usado principalmente por físicos mas agora, o AFM é usado cada vez mais por DM e por biólogos.

Muito importante, quando você é uma DM ou um biólogo e você executam, por exemplo, o PCR ou o qualquer outro tipo da experiência, você quer gerar os mesmos resultados que seu colega em um outro laboratório. Aquele não era o caso no campo do AFM.

Os povos estavam perfeitamente cientes de todas as advertências dos instrumentos e discutiriam todos os parâmetros que poderiam ser mudados e as maneiras diferentes de conduzi-las experiências e compreenderam-se perfeitamente.

Contudo, na medicina e na biologia, você precisa os valores que podem ser confiados e que podem tudo ser produzidos por qualquer um, em qualquer lugar no mundo, independentemente da máquina que é usada. Isso faltava e este procedimento é usado para calibrar realmente tudo de modo que os povos tenham o mais ou menos os mesmos valores após ter feito suas experiências, independentemente do sistema usado, o tipo do instrumento e quem quer que esteja usando o instrumento.

Isto é crucial, especialmente para DM, se querem dizer a alguém “que você está com o cancro porque você tem esta quantidade de valores do que quer que.” Esse valor deve ser muito bem definido, que é algo que faltava no campo.

Eu penso que é realmente uma etapa grande para a frente para que as DM e os biólogos usem o AFM, de que não era o caso antes, porque não era um instrumento da prioridade na caixa de ferramentas de uma DM ou de um biólogo.

Repetibilidade crescente para o Bio-AFM com a PRESSÃO de AZoNetwork em Vimeo.

Como o procedimento nanomechanical estandardizado do AFM (SNAP) elimina fontes de erro precedentes?

O procedimento INSTANTÂNEO é baseado na calibração do sistema, especialmente o modilhão, que é a parte crucial no instrumento do AFM. Isto é o lugar onde nosso interesse principal é − focalizado em ter um instrumento que perfeitamente calibrado nós podemos se usar para fazer experiências.

Isto foi verificado em geles amorfos e em pilhas vivas e nele era muito interessante tendo estes dois tipos das amostras de experimentar sobre e isto foi feito tais que tudo estêve preparado em um laboratório molhado e dispersado então através de todos os laboratórios em Europa.

Os povos faziam suas experiências nestes dois tipos das amostras, em seus próprios instrumentos, com seus próprios povos e na extremidade, nós estávamos encontrando mais ou menos os mesmos valores, que era boa.

Que é o impacto o mais grande que o AFM fez aos campos biológicos e do nanomedicine da pesquisa?

Eu penso aquele até agora, o impacto principal da pesquisa estive na pesquisa da oncologia. As células cancerosas são mais macias do que pilhas saudáveis, que é verdadeiro para o AFM e para outros povos das técnicas se estão usando.

Recentemente, uma revisão resumiu todos os resultados e independentemente da técnica usada, era um traço comum que as células cancerosas eram mais macias. Este é talvez o melhor ou exemplo o mais conhecido até agora.

Como a tecnologia de Bruker ajudou ou AFM avançado na pesquisa biológica?

Bruker era um dos primeiros fabricantes para fazer o AFM disponível ao biólogo. Inicialmente, não era uma máquina perfeita, mas muitas melhorias foram feitas e agora têm um sistema que possa ser usado por biólogos ou por DM igualmente.

A primeira máquina foi projectada tais que estêve colocada em um microscópio invertido e para DM e biólogos, especialmente biólogos de pilha, é vital ver pilhas, e para aquele, você precisa um microscópio.

Que é a importância das reuniões, como a conferência do AFM Biomed, a você e à comunidade de pesquisa do AFM?

É realmente importante recolher os povos que executam experiências diferentes e usam sistemas e instrumentos diferentes. Este é igualmente realmente o ponto em que os povos decidiriam, por exemplo, se ir para uma concessão particular da UE ou usar o tipo da metodologia de que nós estávamos discutindo antes, o procedimento INSTANTÂNEO. Isto foi feito realmente a agradecimentos possíveis a este tipo da conferência do AFM Biomed.

Que sentido você vê, ou gostaria de ver, AFM que vai nos próximos cinco anos? Que você vê como a coisa grande seguinte para o AFM?

Eu recordo que eu dei uma conferência talvez quatro ou cinco anos há e mim estêve pedido o que o futuro do AFM seria - eu penso que minha resposta é naquele tempo ainda válida hoje.

Havia dois trajectos principais. Primeiro era AFM de alta velocidade. Para mim, isso é útil para o que eu chamo “máquina em trabalhos,” que significa a vista de um complexo molecular e a observação da cinética daquela complexa. Pode estar no apoio do bilayer em pilhas, mas é reduzido realmente aos estes tipo de sistemas pequenos, devido às limitações do AFM de alta velocidade, campo pequeno e assim por diante.

O segundo trajecto era a microscopia correlativa, que combina um AFM com um outro instrumento. Poderia ser um microscópio de fluorescência e para que este tenha a mesma definição, precisaria de ser um sistema super da definição. Todas estas tecnologias foram reconhecidas pelo prémio nobel, mas poderia igualmente ser a imagem lactente de Raman, a microscopia de elétron ou a toda a outra técnica de imagem lactente que não puderem somente ser combinadas com um AFM, mas combinaria tais que há uma correlação especial. A mesma definição pode ser conseguida agora com microscopia de fluorescência, que alcançou a definição do nanômetro.

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

Sobre o Dr. Frank Lafont

Frank Lafont teve a formação à gestão médica, científica e e graduado da Paris VI Pierre & da universidade de Marie Curie e da escola de negócios de ESCP-Europa. Em relação às ciências da vida, fez seu mestre da biologia prático no laboratório do fotorreceptor J Glowinski (neurofarmacologia) no Collège de France (Paris, França), e sua tese da ciência da vida no École Normale Supérieure (Paris, França) no fotorreceptor um laboratório do ` de Prochiantz (neurobiologia desenvolvente). Fez seu treinamento cargo-doc em EMBL (Heidelberg, Alemanha) fotorreceptor grupo de K em Simons' (biologia celular).

Então, transportou-se a Genebra (Suíça) como o conferente júnior no centro médico da universidade em Laboratório do fotorreceptor FG camionete der Goot (microbiologia) antes do colaborador científico tornando-se em EPFL (Lausana, Suíça) no grupo do ` de S Catsicas (cérebro e instituto da mente). Quando em EPFL, desenvolveu sua experiência na microscopia atômica da força no departamento complexo da física de Mater (grupo do ` s de G. Dietler).

Desde setembro de 2005, é líder do grupo na microbiologia celular do Pasteur Institute de Lille (e física do grupo da infecção, www.cmpi.cnrs.fr) e desde 2010 é o director científico do centro Lille de BioImaging (bicel.org). Em 2014, foi nomeado oficial científico (Chargé de missão) para a microbiologia e doenças infecciosas no gabinete executivo do instituto nacional da ciência biológica - CNRS.

Frank Lafont está coordenando um número de programas científicos financiados pela agência nacional francesa que inclui dentro do investimento para o programa futuro e envolvidos em diversos programas da UE. É o vice-presidente do clube francês para autophagy, do secretário da sociedade francesa para a biologia celular e do membro da placa científica da sociedade francesa para a biofísica. É membro do ASCB, Biophys. Soc. e o ASM. É conferente e/ou responsável de ensinar unidades em doenças infecciosas na faculdade da medicina, e em mestres da biologia e da física na faculdade da ciência do Lille Univ.

Seu interesse principal da pesquisa é revelar como as propriedades biofísicas da membrana podem regular as respostas autophagy da sinalização da pilha induzidas em cima da interacção do anfitrião-micróbio patogénico. Tem 68 artigos em jornais par-revistos em PubMed e mais esse 4700 citações.

Citations

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