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Sistema do AF2000 FFF de Postnova usado para destravar o mistério de doenças neurodegenerative

A analítica de Postnova relata que o departamento da biologia molecular & da biotecnologia na universidade de Sheffield (Reino Unido) está usando seu sistema do fraccionamento de fluxo de campo AF2000 para investigar o mecanismo da formação do amyloid, um processo dedobramento da proteína implicado para ser a causa de Alzheimer e de outras doenças neurodegenerative.

Compreender as causas de doenças neurodegenerative é um desafio enorme. As manifestações de EBS (conhecida geralmente como a doença das vacas loucas) e da elevação de Alzheimer como uma causa de morte principal significaram que está aumentando a pressão encontrar uma cura. Estas duas doenças são caracterizadas pela acumulação de material fibroso chamada “amyloid” no cérebro. O Amyloid foi mostrado para consistir nas proteínas naturais montadas nas fibrilas, organizadas com cuidado rosca-como moléculas. Mesmo se este material proteína-baseado é a causa directa para a deterioração do tecido de cérebro nos pacientes que sofrem destas doenças é uma matéria de alguma controvérsia. Contudo, é claro a tudo que estas fibras proteinaceous estão associadas pròxima com a patologia: as mutações nos genes que codificam para estas proteínas causam o início adiantado da doença e da morte prematura. Uma outra causa para a esperança é que este teste padrão dos eventos pode ser comum a quase todas as doenças neurodegenerative, incluindo Parkinson e Huntington, e um grande número outras doenças que incluem determinados formulários do cancro, do diabetes e do curso.

O Dr. Rosie Staniforth, cabeça do grupo de investigação na universidade de Sheffield comentou:

É emocionante pensar que isso compreender o mecanismo da formação do amyloid pode ser uma etapa para uma cura universal desde que, até agora, terapias estêve visada somente em aliviar sintomas mas não pode impedir ou parar o início destas doenças devastadores.

A fim definir os eventos moleculars responsáveis para as reacções do conjunto da beta proteína do amyloid, os pesquisadores precisam de medir directamente toda a espécie envolvida ou de pressup-la de um grupo de dados mais limitado. Um dos problemas chaves com análises actuais é que quando os dados experimentais sugerirem que as grandes populações de espécies intermediárias formem cedo na reacção do conjunto da proteína do amyloid, e que estas espécies podem ser responsáveis para sua neurotoxicidade, os modelos teóricos são incapazes de incorporar explicitamente estes porque muito poucos métodos para determinar estes durante a reacção do conjunto existem. O problema de caracterizar esta reacção é in vivo muito desafiante.

O fraccionamento de fluxo de campo (FFF) fornece um método analisando a distribuição da espécie na solução e tem vantagens enormes sobre SEC-MALS como um método para o fraccionamento e a caracterização da espécie complexa. Isto é porque agregando a espécie adira geralmente à fase contínua de colunas de cromatografia: benèfica em FFF, a ausência de uma fase contínua significa que este problema está removido pela maior parte. Também, a escala da espécie que pode ser analisada em uma única corrida por FFF é enorme, dos peptides pequenos a nossos mícrons maiores dos agregados em tamanho. Este é exactamente o que nós precisamos de determinar a espécie que nós podemos ver pela microscopia de elétron.

O Dr. Staniforth adicionou:

Postnova era-nos uma surpresa real! Nós obtivemos o dinheiro do Conselho de Pesquisa da biotecnologia BRITÂNICA e das ciências biológicas (BBSRC) para comprar este equipamento e soubemo-lo que o desafio real estava indo trabalhar com o amyloid beta, notório como “o peptide do inferno”. Nós ajustamos a barra alta desafiando fornecedores diferentes produzir dados para nós dentro de alguns dias. Postnova veio acima dos trunfos porque sua máquina de AF2000 FFF é verdadeiramente de fácil utilização. Deu-nos a confiança que nós não enfrentávamos um longo período da optimização do método para obter a onde nós necessários. Nós gostamos particularmente da opção da frita-entrada e do divisor que permitiu nós que minimizem a concentração do peptide no sistema, algo do córrego que conduz à agregação artefactual e às conclusões incorrectas. Postnova produziu alguns dados preliminares muito emocionantes que nós podemos agora reproduzir.

Apesar somente de ter tido seu sistema AF2000 para uma matéria das semanas, a universidade de
Sheffield já tem produzido grandes dados nos beta protofibrils do amyloid que combinam a informação que tiveram da microscopia de elétron mas revela agora sua contribuição para a amostra quantitativa. Os pesquisadores de Sheffield podem agora responder à pergunta a respeito de como significativo a espécie que observa pela microscopia de elétron é ao processo de conjunto da proteína e do que porcentagem da amostra inteira está neste formulário oligomeric.

O Postnova AF2000 é uma plataforma de capacidade elevada do fraccionamento do Campo-Fluxo (FFF) do fluxo para a separação de proteínas, de macromoléculas e de nanoparticles. Modular no projecto, o AF2000 incorpora a experiência, a experiência e os avanços tecnológicos combinados décadas da analítica de Postnova das quase duas da liderança em FFF. Incorporando uma escala dos módulos de FFF em um único sistema integrado para fornecer a separação universal, o AF2000 oferece mais flexibilidade, melhor desempenho e resultados mais robustos do que todo o sistema antes.

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