Aviso: Esta página é uma tradução automática da página original em inglês. Por favor note uma vez que as traduções são geradas por máquinas, não tradução tudo será perfeita. Este site e suas páginas da Web destinam-se a ler em inglês. Qualquer tradução deste site e suas páginas da Web pode ser imprecisas e imprecisos no todo ou em parte. Esta tradução é fornecida como uma conveniência.

Os cientistas desenvolvem nanomotors ultra-som-propelidos para a entrega activa do complexo de Cas9-sgRNA

Na investigação do cancro, o complexo de “Cas-9-sgRNA” é uma ferramenta de edição genomic eficaz, mas sua entrega através da membrana de pilha ao genoma do alvo (tumor) não foi resolvida ainda satisfatoriamente. Os cientistas americanos e dinamarqueses têm desenvolvido agora um nanomotor activo para o transporte, a entrega, e a liberação eficientes deste sistema scissoring do gene. Como detalhado em seu papel no jornal Angewandte Chemie, seu nanovehicle é propelido para seu alvo pelo ultra-som.

© Wiley-VCH

A engenharia Genomic como uma aproximação terapêutica do cancro prometedor experimentou um impulso tremendo desde a descoberta do sistema de defesa imune bacteriano adaptável “CRISPR” e seu potencial como um gene que edita a ferramenta sobre uma década há. Os sistemas projetados de CRISPR para o gene que edita agora contêm dois componentes principais, um único RNA do guia ou sgRNA e a nuclease Cas-9. Quando o sgRNA guiar a nuclease à seqüência especificada do gene, a nuclease Cas-9 executa sua edição com a eficiência cirúrgica. Contudo, a entrega da grande maquinaria ao genoma do alvo é ainda problemática. Os autores do Angewandte Chemie estudam, Liangfang Zhang e Joseph Wang da Universidade da California San Diego, e seus colegas propor agora nanowires ultra-som-propelidos do ouro como um veículo do transporte activo/liberação para o complexo de Cas9-sgRNA sobre a membrana.

Os nanowires do ouro podem cruzar uma membrana passiva, mas os agradecimentos a sua forma wirelike da haste ou a assimétrica, movimento activo podem ser provocados pelo ultra-som. “A forma assimétrica do motor do nanowire do ouro, dada pelo processo da fabricação, é essencial para a propulsão acústica,” os autores observados. Montaram o veículo anexando o complexo de Cas-9 protein/RNA ao nanowire do ouro através das pontes do sulfureto. Estes enlaces reduceable têm a vantagem que dentro da pilha do tumor, as ligações se quebrariam pela glutatione, um composto de diminuição natural enriquecido em pilhas do tumor. O Cas9-sgRNA seria liberado e enviado ao núcleo para fazer seu trabalho de edição, para, o exemplo, o KO de um gene.

Como um sistema de teste, os cientistas monitoraram a supressão da fluorescência emissora pela proteína verde da fluorescência que expressa pilhas da melanoma B16F10. O ultra-som era aplicado por cinco minutos, que aceleraram o nanomotor que leva o complexo de Cas9-sgRNA através da membrana, acelerando a mesmo dentro da pilha, como os autores notaram. Além disso, observaram seu complexo de Cas9-sgRNA eficazmente suprimir a fluorescência com somente concentrações minúsculas do complexo necessário.

Assim, o uso eficaz de um nanomotor acústico como um transportador activo e a carga útil pequena necessário para o KO eficiente do gene são resultados intrigantes do estudo. A simplicidade do sistema, que usa somente poucos e prontamente - componentes disponíveis, é uma outra realização notável.