I ricercatori che sviluppano la saliva rapida provano per individuare il virus di Zika

I ricercatori all'istituto universitario di New York University dell'odontoiatria (odontoiatria di NYU), in collaborazione con Rheonix, Inc. (Ithaca, NY), stanno sviluppando una prova novella per il virus di Zika che usa la saliva per identificare gli indicatori diagnostici del virus in una frazione del periodo delle prove commerciali correnti.

La prova, che si è adattata da un modello attuale si è sviluppata da NYU e da Rheonix per la prova rapida del HIV, è descritta in due nuove pubblicazioni che sono publicate in PLOS UNO e nel giornale degli esperimenti Visualized (JoVE).

Come Zika è provato

Gli scoppi di malattie infettive stanno presentando con grazie crescenti di frequenza ai fattori quali concentrazione della popolazione ed il viaggio æreo globale. Uno scoppio 2015 di virus di Zika nel Brasile si è sparso ad altri paesi Centro e Sudamerica, i Caraibi e negli Stati Uniti del sud, piombo l'organizzazione mondiale della sanità dichiarare Zika ed il suo collegamento ai difetti di nascita un'emergenza di salute pubblica.

“Il virus che recente di Zika lo scoppio conferma che abbiamo bisogno di efficaci sorveglianza e programma di diagnostica di diminuire l'impatto delle malattie infettive emergenti di futuro,„ ha detto Maite Sabalza, PhD, un socio postdottorale al dipartimento di scienza di base e di biologia Craniofacial all'odontoiatria di NYU e l'autore principale degli studi in PLOS UNO e in JoVE.

L'identificazione degli agenti patogeni presto è critica per il combattimento della diffusione delle malattie infettive. Le prove comprendono spesso due punti separati: uno per individuare gli acidi nucleici di un agente patogeno (RNA o DNA) ed un altro per provare ad anticorpi, le proteine che l'organismo produce in risposta agli agenti patogeni.

I campioni di sangue sono più usati spesso provare a virus di Zika e tipicamente sono elaborati facendo uso di una tecnica diagnostica comune chiamata reazione a catena in tempo reale della polimerasi (RT-PCR). Ma il sangue non può essere il migliore liquido: Mentre il virus scompare nel sangue un la settimana o due dopo che una persona è infettata, può persistere più lungamente in saliva, seme ed urina. Inoltre, gli anticorpi possono rimanere per i mesi o gli anni in quei liquidi corporei, che è perché è essenziale affinchè la diagnosi anche individui gli anticorpi dopo l'infezione.

Di appoggio costituendo un fondo per dagli istituti della sanità nazionali, i ricercatori dell'odontoiatria di NYU stanno sviluppando una prova rapida di Zika che combina sia le analisi dell'anticorpo che dell'acido nucleico facendo uso della saliva, dato che il virus di Zika e gli anticorpi persistono in saliva. Una prova della saliva è egualmente non invadente, redditizia e più facile da raccogliersi che il sangue o l'urina.

Risultati più veloci

La nuova prova egualmente ha il potenziale di fornire in pochi minuti i risultati invece delle ore o dei giorni. Le prove correnti di RT-PCR richiedono intorno tre ore e le prove specifiche dell'anticorpo possono richiedere parecchie settimane. I ricercatori di NYU stanno usando un metodo differente chiamato amplificazione isotermica, che può individuare gli acidi nucleici dei virus solo in 20 minuti e l'anticorpo prova che può catturare di meno che un'ora facendo uso degli antigeni Zika-specifici.

“Più presto potete identificare un agente patogeno, più presto le misure possono essere catturate per curare ed isolare la gente. Durante l'epidemia, potreste esaminare la gente prima che salissero un aereo. Il futuro di passare con l'obbligazione all'aeroporto non può decollare le vostre scarpe, ma invece sputando in un tubo,„ ha detto lo studio l'autore Daniel Malamud, il PhD, professore di scienza di base all'odontoiatria di NYU.

Dal HIV a Zika

Il gruppo di ricerca sta costruendo sul suo lavoro di collaborazione più in anticipo con Rheonix che sviluppa una prova rapida della saliva per il HIV che può individuare entrambe il RNA e gli anticorpi virali.

“Quando abbiamo sviluppato il test HIV, abbiamo saputo che potremmo usare lo stesso modello per tutta la malattia infettiva. Tutta che dobbiamo sapere è la sequenza dell'acido nucleico e un antigene per identificare gli anticorpi specifici,„ Malamud ha detto.

In PLOS UNO, i ricercatori descrivono come hanno alterato questo modello per usare gli indicatori che individuano le sequenze dell'acido nucleico di Zika invece di quelle per il HIV. Poi hanno utilizzato un'unità isotermica portatile di amplificazione - che potrebbe essere utilizzata per la prova di punto-de-cura - per identificare il RNA di Zika.

Dopo avere indicato che la prova potrebbe confermare la presenza del virus facendo uso sia del RNA depurativo di Zika che della saliva Zika-infettata, hanno adattato la prova alla cartuccia ed alla stazione di lavoro di Rheonix CARD®, permettendo loro di stimare il caricamento virale nei campioni della saliva. Conoscere la quantità di presente del virus è utile per la comprensione la severità di malattia e delle risposte immunitarie, specialmente fra le donne incinte ed i feti.

I ricercatori egualmente hanno identificato gli antigeni Zika-specifici - che possono essere usati per individuare gli anticorpi specifici di Zika stati necessari per provare - facendo uso di un microarray che ad alta densità del peptide descrivono in JoVE. Poiché Zika può essere confuso facilmente con altri virus quali febbre rompiossa e Chikungunya, identificanti gli antigeni Zika-specifici apre la strada per la prova diagnostica più precisa.

Con prova che indica che sia l'acido nucleico che il lavoro sperimentale dell'anticorpo, i ricercatori possono combinarli nella cartuccia di Rheonix CARD® per elaborare automaticamente e simultaneamente entrambe le analisi diagnostiche. I ricercatori a NYU ed intorno al mondo stanno continuando a convalidare i loro risultati in ulteriori esperimenti facendo uso della saliva Zika-infettata.

“Nel lavoro verso lo scopo rapidamente di mettere a disposizione gli efficaci sistemi diagnostici, abbiamo sviluppato un protocollo generico che può non solo essere usato per provare a virus di Zika ma possiamo adattarci per l'emergenza seguente o malattia infettiva di riapparizione,„ ha detto Sabalza. Studi l'autore Richard Montagna, il PhD, FACB, il vicepresidente senior di Rheonix per gli affari scientifici & clinici, aggiunto, “oltre a potere reagire molto rapidamente a tutta la malattia infettiva recentemente emergente o di riapparizione, la nostra piattaforma difficile completamente automatizzata non richiede virtualmente sforzi pratici ed è ben adattata ad uso delle persone con addestramento minimo.„

Sorgente: https://www.nyu.edu/about/news-publications/news/2018/february/nyu-researchers-adapt-hiv-test-in-developing-rapid-diagnostic-te.html