Os pesquisadores que desenvolvem a saliva rápida testam para detectar o vírus de Zika

Os pesquisadores no University College de New York da odontologia (odontologia de NYU), em colaboração com Rheonix, Inc. (Ithaca, NY), estão desenvolvendo um teste novo para o vírus de Zika que usa a saliva para identificar marcadores diagnósticos do vírus em uma fracção da época de testes comerciais actuais.

O teste, que foi adaptado de um modelo existente tornou-se por NYU e por Rheonix para o teste rápido do VIH, é descrito em duas publicações novas que publicam-se em PLOS UM e no jornal de experiências Visualized (JoVE).

Como Zika é testado

As manifestações de doenças infecciosas estão ocorrendo com agradecimentos crescentes da freqüência aos factores tais como a concentração da população e a viagem aérea global. Uma manifestação 2015 de vírus de Zika em Brasil espalhou a outros países em central e Ámérica do Sul, as Caraíbas, e os Estados Unidos do sul, conduzindo a Organização Mundial de Saúde para declarar Zika e sua relação aos defeitos congénitos uma emergência da saúde pública.

“O vírus que recente de Zika a manifestação confirma que nós precisamos uma fiscalização eficaz e um programa diagnóstico de reduzir o impacto das doenças infecciosas emergentes futuras,” disse Maite Sabalza, PhD, um associado pos-doctoral no departamento da ciência básica e da biologia Craniofacial na odontologia de NYU e autor principal dos estudos em PLOS UM e em JoVE.

Identificar os micróbios patogénicos é cedo crítica para combater a propagação de doenças infecciosas. Testar envolve frequentemente duas etapas separadas: um para detectar os ácidos nucleicos de um micróbio patogénico (RNA ou ADN) e outro para testar para anticorpos, as proteínas que o corpo produz em resposta aos micróbios patogénicos.

As amostras de sangue são as mais usadas frequentemente testar para o vírus de Zika e são processadas tipicamente usando uma técnica diagnóstica comum chamada a reacção em cadeia da polimerase do tempo real (RT-PCR). Mas o sangue não pode ser o melhor líquido: Quando o vírus desaparecer no sangue um a semana ou os dois depois que uma pessoa está contaminada, pode persistir mais por muito tempo na saliva, no sémen, e na urina. Além, os anticorpos podem permanecer por meses ou anos naqueles líquidos corporais, que é porque é essencial para o diagnóstico detectar igualmente anticorpos após a infecção.

Suportado financiando dos institutos de saúde nacionais, os pesquisadores da odontologia de NYU estão desenvolvendo um teste rápido de Zika que combine ensaios do ácido nucleico e do anticorpo usando a saliva, dado que o vírus de Zika e os anticorpos persistem na saliva. Um teste da saliva é igualmente não invasor, eficaz na redução de custos, e mais fácil recolher do que o sangue ou a urina.

Resultados mais rápidos

O teste novo igualmente tem o potencial produzir numa questão de minutos resultados em vez das horas ou dos dias. Os testes actuais de RT-PCR tomam ao redor três horas e os testes específicos do anticorpo podem tomar diversas semanas. Os pesquisadores de NYU estão usando um método diferente chamado a amplificação isothermal, que pode detectar os ácidos nucleicos de uns vírus em apenas 20 minutos, e o anticorpo testa que pode tomar menos do que uma hora usando antígenos Zika-específicos.

“Mais logo você pode identificar um micróbio patogénico, mais logo as etapas podem ser tomadas para tratar e isolar povos. Durante uma epidemia, você poderia testar povos antes que obtenham em um plano. O futuro de atravessar a segurança no aeroporto não pode descolar suas sapatas, mas pelo contrário cuspindo em uma câmara de ar,” disse o estudo autor Daniel Malamud, PhD, professor da ciência básica na odontologia de NYU.

Do VIH a Zika

A equipa de investigação está construindo em seu trabalho colaborador mais adiantado com o Rheonix que desenvolve um teste rápido da saliva para o VIH que pode detectar ambo o RNA viral e os anticorpos.

“Quando nós desenvolvemos o teste do VIH, nós soubemos que nós poderíamos usar o mesmo modelo para toda a doença infecciosa. Tudo que nós precisamos de saber é a seqüência do ácido nucleico e um antígeno para identificar anticorpos específicos,” Malamud disse.

Em PLOS UM, os pesquisadores descrevem como alteraram este modelo para usar os marcadores que detectam seqüências do ácido nucleico de Zika em vez daquelas para o VIH. Usaram então um dispositivo isothermal portátil da amplificação - que poderia ser usado para o teste do ponto--cuidado - para identificar o RNA de Zika.

Após ter mostrado que o teste poderia confirmar a presença do vírus que usa-se refinou o RNA de Zika e Zika-contaminou a saliva, eles adaptou o teste ao cartucho e à estação de trabalho de Rheonix CARD®, permitindo os de calcular a carga viral em amostras da saliva. Conhecer a quantidade de presente do vírus é útil para compreender a severidade da doença e respostas imunes, particularmente entre mulheres gravidas e feto.

Os pesquisadores igualmente identificaram os antígenos Zika-específicos - que podem ser usados para detectar os anticorpos específicos de Zika necessários para testar - usando um microarray que high-density do peptide descrevem em JoVE. Porque Zika pode facilmente ser confundido com outros vírus tais como a dengue e o Chikungunya, identificando antígenos Zika-específicos pavimenta a maneira para um teste diagnóstico mais preciso.

Com a evidência que mostra que o ácido nucleico e o trabalho de testes do anticorpo, os pesquisadores podem os combinar no cartucho de Rheonix CARD® para processar automaticamente e simultaneamente ambos os ensaios diagnósticos. Os pesquisadores em NYU e em todo o mundo estão continuando a validar seus resultados em umas experiências mais adicionais usando a saliva Zika-contaminada.

“No trabalho para o objetivo rapidamente de fazer diagnósticos eficazes disponíveis, nós desenvolvemos um protocolo genérico que não pudesse somente ser usado para testar para o vírus de Zika mas podemos ser adaptados para emergir seguinte ou doença infecciosa reemirjindo,” disse Sabalza. Estude autor Richard Montagna, PhD, FACB, o vice-presidente superior de Rheonix para casos científicos & clínicos, adicionado, “além do que poder reagir muito rapidamente à doença infecciosa recentemente emergente ou reemirjindo alguns, nossa plataforma de teste inteiramente automatizada não exige virtualmente nenhum esforço a trabalhar e é poço - serido para o uso dos indivíduos com treinamento mínimo.”

Source: https://www.nyu.edu/about/news-publications/news/2018/february/nyu-researchers-adapt-hiv-test-in-developing-rapid-diagnostic-te.html