Los investigadores que desarrollan la saliva rápida prueban para descubrir el virus de Zika

Los investigadores en la Universidad de Nueva York de la odontología (odontología de NYU), en colaboración con Rheonix, Inc. (Ithaca, NY), están desarrollando una prueba nueva para el virus de Zika que utiliza la saliva para determinar los marcadores diagnósticos del virus en una parte de la hora de pruebas comerciales actuales.

La prueba, que fue adaptada de un modelo existente se convirtió por NYU y Rheonix para la prueba rápida del VIH, se describe en dos nuevas publicaciones que aparecían en PLOS UNO y el gorrón de los experimentos Visualized (JoVE).

Cómo se prueba Zika

Los brotes de enfermedades infecciosas están ocurriendo con gracias cada vez mayor de la frecuencia a los factores tales como concentración de la población y transporte aéreo global. Un brote 2015 de virus de Zika en el Brasil se extendió a otros países en central y Suramérica, el Caribe, y los Estados Unidos meridionales, llevando la Organización Mundial de la Salud a declarar Zika y su eslabón a los defectos de nacimiento una emergencia de la salud pública.

“El virus reciente de Zika que el brote confirma que necesitamos una vigilancia efectiva y un programa diagnóstico reducir el impacto de las enfermedades infecciosas emergentes futuras,” dijo a Maite Sabalza, doctorado, socio postdoctoral en el departamento de la ciencia básica y de la biología craneofacial en la odontología de NYU y el autor importante de los estudios en PLOS UNO y JoVE.

Determinar patógeno es temprano crítico para combate la extensión de enfermedades infecciosas. La prueba implica a menudo dos pasos separados: uno para descubrir los ácidos nucléicos un patógeno (ARN o DNA) y otro para probar para los anticuerpos, las proteínas que la carrocería produce en respuesta a patógeno.

Las muestras de sangre son las más de uso frecuente probar para el virus de Zika y se tramitan típicamente usando una técnica diagnóstica común llamada la reacción en cadena en tiempo real de polimerasa (RT-PCR). Pero la sangre puede no ser el mejor líquido: Mientras que el virus desaparece en la sangre a la semana o dos después de que infecten a una persona, puede persistir más de largo en saliva, semen, y orina. Además, los anticuerpos pueden permanecer por meses o años en esos líquidos corporales, que es porqué es esencial que la diagnosis también descubra los anticuerpos después de la infección.

Retrocedido financiando de los institutos de la salud nacionales, los investigadores de la odontología de NYU están desarrollando una prueba rápida de Zika que combine análisis del ácido nucléico y del anticuerpo usando la saliva, dado que el virus de Zika y los anticuerpos persisten en saliva. Una prueba de la saliva es también no invasor, de poco costo, y más fácil de cerco que sangre o la orina.

Resultados más rápidos

La nueva prueba también tiene el potencial de producir resultados en cuestión de minutos en vez de horas o de días. Las pruebas actuales de RT-PCR tardan alrededor tres horas y las pruebas específicas del anticuerpo pueden tardar varias semanas. Los investigadores de NYU están utilizando un método diferente llamado la amplificación isotérmica, que puede descubrir los ácidos nucléicos de los virus en tan poco tiempo como 20 minutos, y el anticuerpo prueba que puede tomar menos que una hora usando los antígenos Zika-específicos.

“Cuanto más pronto usted puede determinar un patógeno, más pronto las medidas se pueden tomar para tratar y para aislar a gente. Durante una epidemia, usted podría probar a gente antes de que ella consiga en un avión. El futuro de pasar con seguridad en el aeropuerto no puede sacar sus zapatas, sino que por el contrario punta en un tubo,” dijo el estudio autor Daniel Malamud, doctorado, profesor de la ciencia básica en la odontología de NYU.

Del VIH a Zika

El equipo de investigación está empleando su trabajo colaborativo anterior con Rheonix que desarrolla una prueba rápida de la saliva para el VIH que puede descubrir ambo el ARN y los anticuerpos virales.

“Cuando desarrollamos la prueba del VIH, sabíamos que podríamos utilizar el mismo modelo para cualquier enfermedad infecciosa. Toda lo que necesitamos saber es la serie del ácido nucléico y un antígeno para determinar los anticuerpos específicos,” Malamud dijo.

En PLOS UNO, los investigadores describen cómo alteraron este modelo para utilizar los marcadores que descubren series del ácido nucléico de Zika en vez de ésas para el VIH. Entonces utilizaron un dispositivo isotérmico portátil de la amplificación - que se podría utilizar para la prueba del punto-de-cuidado - para determinar el ARN de Zika.

Después de mostrar que la prueba podría confirmar la presencia del virus usando el ARN purificado de Zika y la saliva Zika-infectada, adaptaron la prueba al cartucho y al puesto de trabajo de Rheonix CARD®, permitiéndoles estimar la carga viral en muestras de la saliva. Conocer la cantidad de presente del virus es útil para entender severidad de la enfermedad e inmunorespuestas, determinado entre mujeres embarazadas y fetos.

Los investigadores también determinaron los antígenos Zika-específicos - que se pueden utilizar para descubrir los anticuerpos específicos de Zika necesarios para probar - usando un microarray de alta densidad del péptido que describen en JoVE. Porque Zika se puede confundir fácilmente con otros virus tales como dengue y Chikungunya, determinando los antígenos Zika-específicos pavimenta la manera para una prueba diagnóstica más exacta.

Con las pruebas mostrando que el ácido nucléico y el trabajo de pruebas del anticuerpo, los investigadores pueden combinarlos en el cartucho de Rheonix CARD® para tramitar ambos análisis diagnósticos automáticamente y simultáneamente. Los investigadores en NYU y en todo el mundo están continuando validar sus conclusión en otros experimentos usando la saliva Zika-infectada.

“En el trabajo hacia la meta rápidamente de hacer diagnósticos efectivos disponibles, hemos desarrollado un protocolo genérico que se puede no sólo utilizar para probar para el virus de Zika pero podemos ser adaptados para emerger siguiente o enfermedad infecciosa que reaparece,” dijo a Sabalza. Estudie autor a Richard Montagna, doctorado, FACB, el vicepresidente de Rheonix para los asuntos científicos y clínicos, adicional, “además de poder reaccionar muy rápidamente a la enfermedad infecciosa nuevamente emergente o que reaparece ningunos, nuestra plataforma de prueba completo automatizada no requiere virtualmente ningún esfuerzo con manos y está bien adaptada para uso de individuos con el entrenamiento mínimo.”

Fuente: https://www.nyu.edu/about/news-publications/news/2018/february/nyu-researchers-adapt-hiv-test-in-developing-rapid-diagnostic-te.html