Lo studio usa analisi di xCELLigence di scienze biologiche di ACEA' per riflettere la rottura dei biofilms di s.aureus

Impiegando la tecnologia® di xCELLigence dalle scienze biologiche di ACEA, un gruppo degli scienziati spagnoli ha sviluppato un'analisi in tempo reale per la schermatura dei trattamenti del anti-biofilm e la misura della loro efficacia

I Biofilms sono comunità superficie-fissate delle celle batteriche o fungose che sono avviluppate in un'estesa matrice extracellulare che le rende più resistenti sia agli antibiotici che al sistema immunitario. Con i biofilms stimati per essere responsabile di >60% delle infezioni microbiche e 80% delle infezioni croniche in esseri umani, trovando i modi interrompere ha stabilito i biofilms è di importanza critica. Negli ultimi anni ci sono stati un interesse crescente nello sfruttamento dei batteriofagi, o le proteine litiche che codificano, per trattare i biofilms.

Citando che le tecniche corrente usate per identificare le attività del anti-biofilm in proteine dei fagi-derivate hanno “le imperfezioni importanti„ di essere analisi laboriose di punto finale che soffrono dalla riproducibilità difficile, nell'emissione recente delle frontiere in microbiologia un gruppo degli scienziati piombo dal rapporto di Diana Gutierrez uno studio del proof of concept facendo uso di uno strumento di analisi in tempo reale delle cellule di xCELLigence per riflettere la rottura dei biofilms clinicamente importanti di staphylococcus aureus.  All'interno delle lastre grosse di microtitolo brevettate di xCELLigence che contengono i biosensori dell'oro, i biofilms di s.aureus Sono stati stabiliti e poi sono stati esposti alle proteine batteriofago-derivate differenti che catalizzano la degradazione dei polimeri extracellulari del biofilm chiave peptidoglycan o del exopolysaccharide.  Gli autori hanno dimostrato che la degradazione di questi polimeri e la dissipazione concomitante del biofilm, cause una diminuzione nel segnale del biosensore di xCELLigence che è sia del tempo che dipendente dalla dose.  D'importanza, questi dati in tempo reale di rottura del biofilm hanno correlato bene con i dati dalle analisi tradizionali di punto finale quale la tecnica della coloritura a forte intensità di mano d'opera della viola di cristallo.

Poiché ciascuna di una lastra grossa di microtitolo di xCELLigence può acquistare bene migliaia di punti di informazioni, ogni pozzo della persona rende un corso completo di tempo per il deposito o la dissipazione del biofilm, notevolmente diminuente il numero dei pozzi/lastre grosse state necessarie e del carico di lavoro totale. A causa di questo, gli autori potevano schermare facilmente gli sforzi multipli di s.aureus E quattro enzimi litici differenti sopra un intervallo delle concentrazioni. Le curve di reazione al dosaggio generate tramite questo approccio hanno permesso di calcolare esattamente i parametri chiave quale il MBEC50 (il biofilm minimo che sradica concentrazione che elimina 50% del biofilm) per ogni trattamento. Nello sforzo in corso per sviluppare la migliore terapeutica del biofilm, Gutierrez ed i colleghi hanno suggerito che gli effetti sinergici di combinazione degli enzimi dei fagi con differenti specificità del substrato dovrebbero essere un'area chiave del fuoco. A tal fine, hanno concluso che il carico di lavoro diminuito, il risparmio di temi migliore e il più alta riproducibilità dell'analisi di xCELLigence permetteranno “rapidamente di valutare e confrontare dai parametri standardizzati l'attività di disgregazione delle proteine dei fagi del anti-biofilm.„

Sorgente: https://www.aceabio.com/characterizing-bacteriophage-derived-enzymes-degrade-staphylococcus-biofilms/