I ricercatori riferiscono come le proteine di Zika dirottano le cellule ospiti

La maggior parte della gente infettata con Zika non mostra mai i sintomi. Ma il virus a volte causa l'inabilità severa -- da microcefalia in bambini alla debolezza o dalla paralisi parziale in adulti -- e non c'è il trattamento. In uno studio recente nel Proteomics molecolare & cellulare del giornale, i ricercatori riferiscono uno studio completo di come il virus interagisce con le cellule ospiti. Uno dei loro risultati offre la comprensione in come Zika sfugge alla segnalazione immune e prolifera dentro l'organismo.

Come la maggior parte dei virus, Zika compire molto con soltanto alcuni strumenti. Ha appena un gene di codifica della proteina, che produce un singolo polipeptide che è fenduto in 10 più piccole proteine -- un numero sminuito dai 20.000 geni stimati di proteina-codifica in una cellula umana. Tuttavia, Zika può assumere la direzione della cellula umana notevolmente più complessa, repurposing in una fabbrica del virus. Brian Raught, un ricercatore all'università di Toronto, ha detto che ha trovato che affascinare di trattamento.

“Con appena queste 10 proteine, questo virus pazzo trasforma le vostre celle nelle zombie che fanno la sua offerta,„ ha detto Raught. “Sempre ho trovato quello mindblowing.„

I ricercatori nel laboratorio di Raught, piombo dal collega postdottorale Etienne Coyaud, hanno voluto scoprire come la manciata di proteine di Zika poteva dirottare la cellula ospite. Hanno saputo che l'abilità deve dipendere dalle interazioni fisiche fra le proteine virali e le proteine indigene alla cella--ma quale?

A causa della prova aumentante che collega le infezioni di Zika in donne incinte alla microcefalia nei loro bambini, Raught ha detto, “la abbiamo pensata meglio per affidare il lavoro reale del virus agli esperti.„ Invece di usando il materiale contagioso, il gruppo ha fatto 10 sforzi delle cellule umane -- ciascuno che esprime una delle 10 proteine di Zika. Aggiungendo un piccolo tag “di epitopo„ ad ogni proteina virale (chiamata un tag “del flag„), potevano recuperare le proteine virali facendo uso di un anticorpo che lega a questo tag. Le proteine ospite che attaccato strettamente ad ogni proteina virale è venuto avanti per il giro; i ricercatori hanno usato una tecnica chiamata spettrometria di massa per identificare quelle proteine umane.

Ma c'era uno svantaggio con questo approccio. Che cosa se le proteine dalla cellula umana stessero interagendo con le proteine di Zika, ma stessero separando da loro prima dell'estrazione? Per identificare le proteine a cui sia vicino, ma non inseparabilmente intrecciato con, ogni proteina virale, il gruppo ha usato un contrassegno di prossimità chiamato seconda tecnica. In pratica, hanno attrezzato ogni proteina virale con un enzima che avrebbe fissato il tag appiccicoso della biotina su qualche cosa che venisse abbastanza vicino.

Il contrassegno di prossimità è particolarmente utile per la rilevazione delle interazioni con le proteine incassate in membrane cellulari; quelle molecole sono notoriamente difficili da isolare. “Questo è un bene realmente grande di un approccio dicontrassegno confrontato agli approcci tradizionali,„ ha detto Coyaud. Poiché Zika, come molti virus, registra la cella ad una in una busta diretta a membrana e riorganizza molti agli degli organelli diretti a membrana del suo ospite nel corso dell'infezione, le sue interazioni con le proteine della membrana potrebbero essere chiave a capire il ciclo di vita virale.

Quando i ricercatori hanno combinato i risultati dei due approcci, potrebbero radunare una maschera dettagliata di cui Raught chiama “la vicinanza„ all'interno della cella in cui ogni proteina di Zika prende la residenza.

Per esempio, i ricercatori hanno trovato quella proteina di uno Zika, chiamata NS2A, interagito con molti vicini umani in un organello ospite chiamato il peroxisome. Peroxisomes è compreso nella segnalazione immune innata, un tipo di allarme d'avvistamento che va via quando i virus sono presenti. Le proteine da febbre rompiossa e dai virus del Nilo occidentali, che sono nella stessa famiglia di Zika, sono state indicate per associarsi con i peroxisomes e per interrompere la segnalazione antivirale.

Facendo uso di microscopia di fluorescenza, ha detto Raught, “potremmo vedere che questa una proteina (NS2A) ha localizzato soltanto ai peroxisomes.„ Poiché NS2A probabilmente è compreso nella replica del genoma e della costruzione del virus del suo shell della proteina, la sua preferenza per il peroxisome piombo il gruppo studiare se il peroxisome potrebbe partecipare alla replica. Il gruppo ha reclutato alcuni virologi con accesso ad una funzione di biocontainment, che potrebbe provare se il virus contagioso di Zika può proliferare in celle senza peroxisomes. Risulta, in quelle celle, il virus prolifera più lentamente.

“Realmente sembra essere un collegamento importante fra avere un peroxisome e potendo fare efficientemente il virus di Zika,„ ha detto Raught. “Non sappiamo esattamente perché quello è.„ Ma i dati di interazione della proteina del host-virus hanno mostrato loro dove guardare.

Il laboratorio del Raught di gruppo di dati si è raccolto è pieno di tali bugne. Leggermente più della metà delle proteine umane i ricercatori trovati interagire con le proteine virali sono conosciuti per partecipare ad altre infezioni virali, mentre il resto ancora non era stato descritto. Secondo Raught, “una migliore comprensione di questi trattamenti permetterà che noi identifichiamo le vulnerabilità specifiche nel ciclo di vita del virus, in cui le droghe antivirali possono essere mirate a.„

Sorgente: http://www.asbmb.org/