Van Onze Bank aan van u: De Raad van het antilichaam van Proteintech

insights from industryDr. Karolina SzczesnaProduct Manager and Technical SupportProteintech
Een gesprek met Dr. Karolina Szczesna van Proteintech in SfN 2018, die de veelbetekenende tekens van een goed antilichaam bespreekt en hoe Proteintech werkt om experimentele resultaten voor wetenschappers te verbeteren.

Gelieve te kunnen u en de introduceren rol u in Proteintech uitvoert?

Ik ben een technische wetenschapper en een productmanager in Proteintech. Mijn rol impliceert het helpen van onze klanten hun onderzoekresultaten optimaliseren en om het even welke zorgen richten door technische steun door onze experimentele uiteinden te delen en wetenschappers via ons blogkanaal in dienst te nemen. Ik schrijf ook artikelen op aanstaande technieken en nieuwe toepassingen van onze producten.

molekuul_bemolekuul_be | Shutterstock

Ik stel ook technische masterclasses voor jonge wetenschappers, samen met opleiding in werking webinars. Onze volgende masterclass is op 29 Januari, 2019, bij de Universiteit van Newcastle, waar wij studenten zullen onderwijzen om het westelijke bevlekken en immunofluorescentie, met inbegrip van uiteinden op te beheersen hoe te om uw protocollen te optimaliseren en gemeenschappelijke experimentele hindernissen te overwinnen.

Wat maakt een antilichaam goed of slecht? Hoe kan een wetenschapper als een verkoper vertellen of niet betrouwbaar is?

Wanneer het produceren van een antilichaam, kunt u of met een gehele proteïne of een klein synthetisch peptide fragment immuniseren dat u in het ontdekken geinteresseerd bent. In Proteintech, kiezen wij een gehele eiwitbenadering van de antilichamen die wij aangezien dit verscheidene voordelen voor de onderzoeker oplevert hebben aangeboden.

Vijfennegentig percent van antilichamen Proteintech wordt opgeheven tegen gehele proteïnen, latend het immuunsysteem beste epitopes kiezen voor het produceren van antilichamen. Deze benadering verstrekt superieur antilichaam dat aan de inheemse doelproteïne bij veelvoudige epitopes bindt in vergelijking met peptide immunogens, en ten tweede, zijn de specificiteit en de gevoeligheid van de analyse beter.

Het definitieve voordeel is dat het antilichaam in meer toepassingen kan worden gebruikt. Bijvoorbeeld, kunnen vele analyses worden gebruikt om één enkel antigeen te bestuderen, maar elke analyse kan een lichtjes verschillend antilichaam afhankelijk van epitope vereisen.

Sommige gebieden van de proteïne kunnen beter voor één toepassing zijn dan een andere, zo de beschikbaarheid van de gehele eiwitopbrengstenantilichamen die voor veelvoudige toepassingen kunnen werken. Dit zal eerder met een gehele eiwitbenadering voorkomen in vergelijking met één enkel fragment. Aangezien het immuunsysteem antilichamen tegen om het even welk gebied van de gehele proteïne kan produceren, is er ook een hoge kans van reactiviteit over species toe te schrijven aan behoud.

Om samen te vatten, zijn de drie belangrijke voordelen van geheel-eiwitantilichamen:

  • bredere toepasselijkheid,
  • hogere bindende gevoeligheid en affiniteit,
  • superieure erkenning van inheemse, intacte proteïnen.

Een ander teken van betrouwbaarheid is of het bedrijf dat het antilichaam verkoopt een fabrikant en een verdeler, of enkel een verdeler (re-seller) is. Dit is belangrijk omdat als u een kwestie of een vraag over een antilichaam hebt, u RUWE bevestigingsgegevens moet kunnen verkrijgen. Als dat gegeven niet binnenshuis is verzameld, zal het langer voor het bedrijf duren om het bij elkaar te brengen, die uw experimenten kan potentieel vertragen.

Proteintech - een directe fabrikant (Krediet: Proteintech)

In Proteintech, zijn elk van onze gegevens vrij beschikbare online en onze antilichamen zijn aangehaald in honderden publicaties. Wanneer een duistere toepassing wordt gevraagd, kunnen wij de bevestigingsgegevens verstrekken om het experiment te steunen of te weerleggen en doen dit binnen 24 uren.

Wij zijn trots om realistisch gegeven te tonen dat niet „perfect“ om is schoongemaakt te kijken maar u een idee gegeven van hoe de westelijke vlek, bijvoorbeeld, telkens weer eruit zal zien. Ik denk die een bijzonder goed teken van betrouwbaarheid ben.

Waarom is de reproduceerbaarheid belangrijk en hoe verzekert Proteintech dit voor elk van hun antilichamen?

Elke wetenschapper wil de zelfde resultaten elke keer worden wanneer het werken met het zelfde antilichaam. Zoals ik vermeldde, zijn wij de enige fabrikant, zodat kunnen wij onmiddellijke steun voor wetenschappers verlenen die het oplossen van problemen hun methodes zijn.

Een ander teken van kwaliteit is de gebruikte reinigingsmethode. Wij gebruiken affiniteitchromatografie, die van de bindende sterkte van een proteïne voor zijn ligand gebruik maakt. Een andere populaire methode is eiwitreiniging A/G, die de recombinante fusie eiwitA/G van E. coli gebruikt. De eiwit reiniging A/G zal al IgGs in het serum, niet alleen de gewenste antilichamen opbrengen. De chromatografie van de affiniteit selecteert voor enkel degenen met de hoogste affiniteit naar het doel.

Wij bevestigen ook onze antilichamen door knockout en neerhalen (KO/KD) studies. Proteintech was het eerste bedrijf om siRNA de experimenten van de neerhalenbevestiging, de goudstandaard uit te voeren voor het testen van antilichamenspecificiteit. Het bevestigingsproces impliceert het gebruiken van klein mengend RNA om genuitdrukking in een antilichamenproduct neer te halen - beoordeling van of het signaal met de uitdrukking van het doelgen zakt.

Dit is kritiek voor het verzekeren van verenigbare en betrouwbare resultaten en is veel superieur aan bevestiging die positieve slechts controles gebruikt. In 2016 werden wij toegekend de prijs CiteAb voor het „opwindendste initiatief van de antilichamenbevestiging“.

Het volgende jaar, Proteintech was het bedrijf met de grootste percentageverhoging van citaten die op gegevens worden gebaseerd die tussen Januari 2017 en December 2017 worden verzameld („hoogst aanbevolen antilichaam supplier in de toekenning van CiteAb 2018“).

Wij vergelijken ook elk van onze antilichamen partij-aan-partij, die ons helpt om veranderingen in prestaties tussen partijen te ontdekken. Als een nieuwe partij er niet in slaagt te presteren of evenals of beter dan vorige, is het unsellable, en wij beginnen met productie op een andere partij.

Is het mogelijk gebruik het zelfde antilichaam voor veelvoudige toepassingen? Hoe is het werken Proteintech om dit te verbeteren?

Als wetenschappers, zouden wij houden van één antilichaam voor alle toepassingen te hebben, maar jammer genoeg, is dit een uitdaging. Eenvoudig gezet, is de biochemie van elke analyse duidelijk verschillend. Bijvoorbeeld, in Westerns, wordt de proteïne gedenatureerd, maar in immunohistochemistry (IHC), is de proteïne in inheemse vorm in zijn cellulaire context.

Nochtans, één ding proberen wij te doen aangezien een bedrijf antilichaam-specifieke protocollen moet verstrekken, die een wetenschapper op onze website kan gemakkelijk vinden. Dit zou een lichtjes langere incubatietijd, een stap van de antigeenherwinning (in het geval van IHC of ALS), of een verschillende blokkerende stap, enz. kunnen betekenen.

U kocht onlangs Humanzyme, een bedrijf dat recombinante menselijke proteïnen produceert. Waarom vond u dit een noodzakelijke stap voor Proteintech was en welke voordelen recombinante proteïnen verstrekken?

meer dan 15 jaar, hebben wij geprobeerd om de beste antilichamen door zich de tendens te creëren te hardnekkig verzetten tegen van het gebruiken van peptides en in plaats daarvan het gebruiken van geheel-eiwitimmunogens. Humanzyme heeft de beste proteïnen door zich van bacteriën en hamsters te onthouden en menselijke cellen (HEK293) te gebruiken om menselijke proteïnen te maken met inheemse glycosylation, multimerization, en verwerking gemaakt. U kon zeggen dat wij samen als een antilichaam en een proteïne gaan!

Voor menselijk toepassingen en onderzoek, is een menselijk systeem van de celuitdrukking ideaal. Ik vind dit het fascineren: De producten van Humanzyme kunnen aan studie inheemse post-vertalende wijziging en proteïne worden gebruikt die in regeneratieve geneeskunde vouwen.

De recombinante proteïnen verstrekken vele voordelen over proteïnen die uit andere organismen worden afgeleid. Het eerste belangrijkste voordeel is kracht; de recombinante cellen produceren proteïnen met een hogere kracht dan E. coli-afgeleide proteïnen, bijvoorbeeld.

Bovendien zijn de recombinante menselijke proteïnen glycosylated door eiwitchaperonnen, die in eukaryotic cellen slechts beschikbaar zijn. Het insect en de Chinese cellen van de hamster (CHO)eierstok kunnen niet dit doen, en het resultaat is een product dat minder vertegenwoordiger van de inheemse proteïne is en niet met vele analyses werkt.

Vergelijking van geproduceerde proteïnen gebruikend verschillende uitdrukkingssystemen. De gekleurde cirkels duiden niveau van gelijkenis aan menselijke proteïnen aan. (Krediet: Proteintech)

Van wat houdt de toekomstige blik voor Proteintech?

Voor de volgende jaren, zullen wij ons bij het uitbreiden van onze recombinante menselijke eiwitproducten terwijl ook het onderzoeken van nieuwe toepassingen voor onze huidige producten concentreren.

Wij lanceerden onlangs een productlijn opgeroepen CoraLite, die een reeks fluorescent-kleurstof vervoegde antilichamen is die in cytometry immunofluorescentie en stroom kunnen worden gebruikt. CoraLite staat wetenschappers toe om mooi te produceren ALS beelden van directe etikettering.

Fluorescent-kleurstof van Coralite vervoegde antilichamen Proteintech (Krediet: Proteintech)

Onze hoop moet voor Humanzyme zeer snel groeien, vooral wanneer de producten voor gebruik in de laboratoria van de Good manufacturing practice (GMP) worden goedgekeurd, die gebeurend volgend jaar zouden moeten zijn. Dit zal de deur die voor Proteintech openen voor begin met farmaceutischere en biomedische bedrijven werken. Globaal, kijkt de toekomst rooskleurig!

Waar kunnen de lezers meer informatie vinden?

Voor meer informatie, te bezoeken gelieve de website Proteintech.

Ongeveer Karolina Szczesna

Dr. Karolina Szczesna is een ervaren product en projectleider met meer dan 7 jaar' ervarings in het coördineren van veelvoudige internationale projecten, met inbegrip van projectplannen en leiding, testende nieuwe onderzoeksmethodes, de lancering van nieuwe producten, en het ontwikkelen van verband tussen onderzoekers en commerciële partners.

Haar wetenschappelijke nadruk is meestal verwant met het Centrale zenuwstelsel en de Oncologische Modellen van de Ziekte (b.v., de cellen van de kankerstam, kankerepigenetics, en studies met betrekking tot zeldzame neurodevelopmentziekten). Worden de wetenschappelijke verwezenlijkingen van Karolina weerspiegeld in meer dan 10 Publicaties PubMed.

In Proteintech is zij een meertalige Manager van het Product en Specialist van de Technische Steun, die verantwoordelijk voor de coördinatie van internationale samenwerking en markt wereldwijd het brandmerken, met inbegrip van het spreken over wetenschapsnieuwigheid en technologie bij hoogste Europese universiteiten een zijn.

Ongeveer Proteintech

Proteintech is een antilichaam en een menselijke eiwitfabrikant die rechtstreeks aan wetenschappers verkopen en slechts zijn eigen producten verkopen om het hoogste niveau van te handhaven kwaliteitsbeheersing, die tot superieure reproduceerbaarheid en partijconsistentie leiden. Met meer dan 2/3 van het menselijke voltooide genoom, hebben wij een catalogus van meer dan 12.000 antilichamen tegenover 12.000 doelstellingen die een breed spectrum van onderzoekgebieden behandelen.

Wij zijn aangehaald in tientallen duizenden publicaties en verstrekt binnenshuis bevestiging van onze antilichamen in WB, IHC, ALS, FC, IP, en SPAANDER, naast het uitvoeren van siRNA neerhalenbevestiging van onze antilichamen. Bovendien, verstrekken wij menselijke cel-uitgedrukte proteïnen die authentieke glycosylation en het vouwen hebben, opbrengend hogere activiteit en stabiliteit over proteïnen van andere gastheren.