De notre banc au vôtre : Conseil d'anticorps de Proteintech

insights from industryDr. Karolina SzczesnaProduct Manager and Technical SupportProteintech
Une entrevue avec M. Karolina Szczesna de Proteintech chez SfN 2018, discutant les signes indicateurs d'un bon anticorps et comment Proteintech fonctionnent pour améliorer des résultats expérimentaux pour des scientifiques.

Pouvez-vous veuillez se présenter et le rôle que vous jouez chez Proteintech ?

Je suis un scientifique et un chef de produit techniques chez Proteintech. Mon rôle concerne aider nos propriétaires optimisent leurs résultats de la recherche et abordent toutes les préoccupations au travers du support technique en partageant nos bouts expérimentaux et en employant des scientifiques par l'intermédiaire de notre glissière de blog. J'écris également des articles sur des techniques prochaines et des applications nouvelles de nos produits.

molekuul_bemolekuul_be | Shutterstock

Je fais fonctionner également les masterclasses techniques pour de jeunes scientifiques, avec des webinars de formation. Nos prochains masterclass est le 29 janvier 2019, à l'université de Newcastle, où nous enseignerons des stagiaires à maîtriser éponger et immunofluorescence occidentales, y compris des bouts sur la façon dont optimiser vos protocoles et surmonter des obstacles expérimentaux courants.

Que prépare un anticorps bon ou mauvais ? Comment un scientifique peut-il dire si un vendeur est digne de confiance ou pas ?

En produisant d'un anticorps, vous pouvez immuniser avec une protéine entière ou un petit éclat de peptide synthétique que vous êtes intéressé à trouver. Chez Proteintech, nous adoptons une approche entière de protéine aux anticorps que nous offrons pendant que ceci fournit plusieurs indemnités pour le chercheur.

Quatre-vingt-quinze pour cent d'anticorps de Proteintech sont augmentés contre les protéines entières, laissant le système immunitaire choisir les meilleurs épitopes pour produire des anticorps. Cette approche fournit l'anticorps supérieur grippant à la protéine cible indigène aux épitopes multiples comparés aux immunogènes de peptide, et deuxièmement, la spécificité et la sensibilité de l'analyse sont améliorées.

L'avantage final est que l'anticorps peut être employé dans plus d'applications. Par exemple, beaucoup d'analyses peuvent être employées pour étudier un antigène unique, mais chaque analyse peut exiger un anticorps légèrement différent selon l'épitope.

Quelques régions de la protéine peuvent être meilleures pour une application que des des autres, ainsi la disponibilité des anticorps entiers de puissances de protéine qui peuvent fonctionner pour des applications multiples. C'est pour se produire avec une approche entière de protéine comparée à un éclat unique. Puisque le système immunitaire peut produire des anticorps contre n'importe quelle région de la protéine entière, il y a également une possibilité élevée de réactivité en travers de la substance due à la conservation.

Pour récapituler, les trois principaux avantages des anticorps d'entier-protéine sont :

  • des possibilités d'application plus larges,
  • une sensibilité et une affinité obligatoires plus élevées,
  • reconnaissance supérieure des protéines indigènes et intactes.

Un autre signe de fiabilité est si la compagnie vendant l'anticorps est un constructeur et un allumeur, ou juste un allumeur (revendeur). C'est important parce que si vous avez une édition ou une question au sujet d'un anticorps, vous doit pouvoir obtenir des caractéristiques BRUTES de validation. Si cette caractéristique n'a pas été rassemblée intérieurement, cela prendra plus longtemps pour que la compagnie l'assemble, qui peut potentiellement retarder vos expériences.

Proteintech - un constructeur direct (crédit : Proteintech)

Chez Proteintech, toutes nos caractéristiques sont librement accessibles en ligne et nos anticorps ont été cités dans les centaines de publications. Quand une application obscure est questionnée, nous pouvons fournir les caractéristiques de validation pour supporter ou réfuter l'expérience et pour faire ainsi dans un délai de 24 heures.

Nous sommes fiers de montrer la caractéristique réaliste qui « n'a pas été nettoyée » pour sembler parfaite mais te donnerons une idée d'à quoi la tache occidentale, par exemple, ressemblera à maintes reprises. Je pense qui est un signe particulièrement bon de fidélité.

Pourquoi la reproductibilité est-elle importante et comment Proteintech assurent-ils ceci pour chacun de leurs anticorps ?

Chaque scientifique veut obtenir les mêmes résultats chaque fois en fonctionnant avec du même anticorps. Comme j'ai mentionné, nous sommes le seul constructeur, ainsi nous pouvons fournir le support instantané pour les scientifiques qui déboguent leurs méthodes.

Un autre signe de qualité est la méthode de purification employée. Nous employons la chromatographie d'affinité, qui se sert de la force obligatoire d'une protéine pour son ligand. Une autre méthode populaire est une purification de la protéine A/G, qui emploie la protéine recombinée A/G de fusion d'Escherichia coli. La purification de la protéine A/G fournira tous les IgG dans le sérum, pas simplement les anticorps désirés. La chromatographie d'affinité sélecte pour juste celle avec l'affinité la plus élevée vers l'objectif.

Nous validons également nos anticorps par le coup de grâce et la précipitation (KO/KD) étudie. Proteintech était la première société pour mettre en application les expériences de validation de précipitation de siRNA, l'étalon-or pour la spécificité de contrôle d'anticorps. Le processus de validation concerne employer le petit ARN de intervention pour démanteler l'expression du gène dans un produit d'anticorps - évaluant si le signe s'abaisse avec l'expression du gène cible.

C'est critique pour assurer des résultats cohérents et fiables et est supérieur lointain à la validation utilisant des contrôles positifs seulement. En 2016 nous avons été attribués le prix de CiteAb pour « la plupart d'initiative passionnante de validation d'anticorps ».

L'année suivante, Proteintech était la compagnie avec la plus grande augmentation de pourcentage des citations basées sur des caractéristiques recueillies entre janvier 2017 et décembre 2017 (« supplier fortement recommandé d'anticorps dans CiteAb 2018 récompenses ").

Nous comparons également tout notre sort-à-sort d'anticorps, qui nous aide à trouver des changements de rendement entre les lots. Si un sort neuf n'exécute pas ainsi qu'ou n'améliore pas que le précédent, il est unsellable, et nous commençons la production sur un autre sort.

Est-il possible d'employer le même anticorps pour des applications multiples ? Comment le fonctionnement de Proteintech vont-ils pour améliorer ceci ?

Comme scientifiques, nous aimerions avoir un anticorps pour toutes les applications, mais malheureusement, c'est un défi. Tout simplement, la biochimie de chaque analyse est nettement différente. Par exemple, dans Westerns, la protéine est dénaturée, mais dans l'immunohistochimie (IHC), la protéine est en forme indigène dans son contexte cellulaire.

Cependant, une chose que nous essayons de faire car une compagnie doit fournir des protocoles spécifiques d'anticorps, qu'un scientifique peut trouver facilement sur notre site Web. Ceci pourrait signifier un temps légèrement plus long d'incubation, une opération de recherche d'antigène (dans le cas de l'IHC ou SI), ou une opération, etc. de blocage différents.

Vous avez récent acheté Humanzyme, une compagnie qui produit les protéines humaines recombinées. Pourquoi avez-vous ressenti ceci étiez-vous une opération nécessaire pour Proteintech et quels avantages les protéines recombinées fournissent-elles ?

Pendant plus de 15 années, nous avions essayé de produire les meilleurs anticorps en concassant la tendance d'employer des peptides et au lieu utilisant des immunogènes d'entier-protéine. Humanzyme avait effectué les meilleures protéines en renonçant à des bactéries et à des hamsters et en employant les cellules humaines (HEK293) pour effectuer les protéines humaines avec la glycosylation, le multimerization, et le traitement indigènes. Vous pourriez dire que nous allons ensemble comme un anticorps et une protéine !

Pour des applications et la recherche humaines, un système d'expression de cellule humaine est idéal. Je trouve cette fascination : Des produits de Humanzyme peuvent être employés pour étudier la modification et le repliement des protéines goujon-de translation indigènes en médicament régénérateur.

Les protéines recombinées fournissent beaucoup d'avantages par rapport aux protéines dérivées d'autres organismes. Le premier principal bénéfice est pouvoir ; les cellules recombinées produisent des protéines avec un pouvoir plus élevé que les protéines coli-dérivées par E., par exemple.

De plus, les protéines humaines recombinées sont glycosylées par les chaperons de protéine, qui sont seulement procurables en cellules eucaryotes. L'insecte et les cellules chinoises d'ovaire (CHO) de hamster ne peuvent pas faire ceci, et le résultat est un produit qui est moins de préposé du service de la protéine indigène et ne fonctionne pas avec beaucoup d'analyses.

Comparaison des protéines produites utilisant différents systèmes d'expression. Les cercles colorés indiquent à niveau de la similitude aux protéines humaines. (Crédit : Proteintech)

Queest-ce que le contrat à terme ressemble à pour Proteintech ?

Pendant les prochaines années, nous nous concentrerons sur augmenter nos produits humains recombinés de protéine tout en également examinant des applications neuves pour nos produits actuels.

Nous avons récent lancé une ligne de produits CoraLite appelé, qui est une suite d'anticorps conjugués parteinture qui peuvent être employés en immunofluorescence et cytométrie de flux. CoraLite permet à des scientifiques de produire beau SI des images à partir du marquage direct.

Anticorps conjugués parteinture de Coralite Proteintech (crédit : Proteintech)

Notre espoir est pour que Humanzyme se développe très rapidement, particulièrement quand les produits sont approuvés pour l'usage dans les laboratoires de bonne pratique en matière (GMP) de fabrication, qui devraient se produire l'année prochaine. Ceci ouvrira la trappe pour que Proteintech commence à fonctionner avec des compagnies plus pharmaceutiques et plus biomédicales. De façon générale, le contrat à terme semble lumineux !

Où peuvent les lecteurs trouver plus d'informations ?

Pour plus d'information, visitez s'il vous plaît le site Web de Proteintech.

Au sujet de Karolina Szczesna

M. Karolina Szczesna est un produit et un chef de projet expérimentés avec plus de 7 ans' d'expérience de combiner des projets internationaux multiples, y compris les régimes et le management de projet, les méthodes de dépistage nouvelles de contrôle, lançant des produits nouveaux, et développant des relations entre les chercheurs et les associés commerciaux.

Son orientation scientifique est liée en grande partie au système nerveux central et aux modèles encologiques de la maladie (par exemple, cellules souche de cancer, epigenetics de cancer, et études liées aux maladies rares de neurodevelopment). Les accomplissements scientifiques de Karolina sont réfléchis en plus de 10 publications de PubMed.

Chez Proteintech il est un chef de produit et une spécialiste multilingues en support technique, étant responsable de la coordination des collaborations internationales et du marquage à chaud du marché mondial, y compris parler au sujet de la nouveauté de la science et des universités en haut européennes de technologie.

Au sujet de Proteintech

Proteintech est un anticorps et un constructeur humain de protéine se vendant directement aux scientifiques et vendant seulement ses propres produits afin de mettre à jour le de plus haut niveau du contrôle qualité, menant à la régularité supérieure de reproductibilité et de sort. Avec plus de 2/3 du génome humain complété, nous avons un catalogue de plus de 12.000 anticorps contre 12.000 objectifs couvrant un large spectre des champs de recherche.

Nous avons été cités dans les dizaines de milliers de publications et fournissons la validation interne de nos anticorps dans WB, IHC, SI, FC, IP, et FRITE, en plus d'exécuter la validation de précipitation de siRNA de nos anticorps. Supplémentaire, nous fournissons les protéines cellule-exprimées par être humain qui ont la glycosylation authentique et le pliage, fournir plus de forte activité et la stabilité au-dessus des protéines d'autres hôtes.