Dal nostro banco a vostro: Consiglio dell'anticorpo da Proteintech

insights from industryDr. Karolina SzczesnaProduct Manager and Technical SupportProteintech
Un'intervista con Dott. Karolina Szczesna da Proteintech a SfN 2018, discutente i segni indicatori di buon anticorpo e come Proteintech sta funzionando per migliorare i risultati sperimentali per gli scienziati.

Possono voi presentarti prego ed il ruolo che effettuate a Proteintech?

Sono uno scienziato e un product manager tecnici a Proteintech. Il mio ruolo comprende aiutare i nostri clienti ottimizza i loro risultati della ricerca ed indirizza tutte le preoccupazioni attraverso supporto tecnico dividendo i nostri suggerimenti sperimentali ed impegnando gli scienziati tramite nostro canale del blog. Egualmente scrivo gli articoli sulle tecniche imminenti e sulle applicazioni novelle di nostri prodotti.

molekuul_bemolekuul_be | Shutterstock

Egualmente eseguo i masterclasses tecnici per i giovani scienziati, con i webinars di addestramento. I nostri masterclass seguenti è il 29 gennaio 2019, all'università di Newcastle, in cui insegneremo agli studenti a padroneggiare macchiare e l'immunofluorescenza occidentali, compreso i suggerimenti su come ottimizzare i vostri protocolli e superare gli ostacoli sperimentali comuni.

Che cosa prepara un anticorpo buon o cattivo? Come può uno scienziato dire se un venditore è in maniera fidata oppure no?

Nel generare un anticorpo, potete immunizzare con un'intera proteina o un piccolo frammento sintetico del peptide che siete interessato nella rilevazione. A Proteintech, adottiamo un intero approccio della proteina agli anticorpi che offriamo mentre questo fornisce parecchi vantaggi per il ricercatore.

Novantacinque per cento degli anticorpi di Proteintech sono sollevati contro le intere proteine, lascianti il sistema immunitario scegliere i migliori epitopi per la generazione degli anticorpi. Questo approccio fornisce l'anticorpo superiore che lega alla proteina bersaglio indigena agli epitopi multipli confrontati agli immunogeno del peptide e secondariamente, la specificità e la sensibilità dell'analisi sono migliorate.

Il vantaggio definitivo è che l'anticorpo può essere utilizzato nelle più applicazioni. Per esempio, molte analisi possono essere usate per studiare un singolo antigene, ma ogni analisi può richiedere un anticorpo leggermente differente secondo l'epitopo.

Alcune regioni della proteina possono essere migliori per l'un'applicazione che un altro, in modo dalla disponibilità di interi anticorpi dei rendimenti della proteina che possono lavorare per le applicazioni multiple. Ciò è più probabile accadere con un intero approccio della proteina confrontato ad un singolo frammento. Poiché il sistema immunitario può generare gli anticorpi contro tutta la regione di intera proteina, c'è egualmente un'alta probabilità della reattività attraverso le specie dovuto conservazione.

Per riassumere, i tre vantaggi principali degli anticorpi della intero-proteina sono:

  • più ampia applicabilità,
  • più alte sensibilità ed affinità obbligatorie,
  • riconoscimento superiore delle proteine indigene e intatte.

Un altro segno dell'affidabilità è se la società che vende l'anticorpo è un produttore e un distributore commerciale, o appena un distributore commerciale (rivenditore). Ciò è importante perché se avete un'emissione o una query circa un anticorpo, voi deve potere ottenere i dati DA RIVEDERE di convalida. Se quei dati non sono stati raccolti in-house, cattureranno più lungamente affinchè la società la collazionino, che può potenzialmente ritardare i vostri esperimenti.

Proteintech - un produttore diretto (credito: Proteintech)

A Proteintech, tutti i nostri dati sono liberamente accessibili in linea ed i nostri anticorpi sono stati citati nelle centinaia di pubblicazioni. Quando un'applicazione oscura è interrogata, possiamo fornire i dati di convalida per supportare o confutare l'esperimento e per agire in tal modo in 24 ore.

Siamo fieri mostrare i dati realistici che “non sono stati puliti„ per sembrare perfetti ma vi daremo un'idea di come la macchia occidentale, per esempio, guarderà ripetutamente. Penso che è un segno particolarmente buon di attendibilità.

Perché è la riproducibilità importante e come Proteintech assicura questo per ciascuno dei loro anticorpi?

Ogni scienziato vuole ottenere ogni volta gli stessi risultati quando lavora con lo stesso anticorpo. Ho citato, siamo il solo produttore, in modo da possiamo fornire il supporto istantaneo per gli scienziati che stanno eliminando l'errore sui loro metodi.

Un altro segno di qualità è il metodo di depurazione impiegato. Usiamo la cromatografia di affinità, che usa la resistenza obbligatoria di una proteina per il suo legante. Un altro metodo popolare è depurazione della proteina A/G, che usa la proteina recombinante A/G di fusione da Escherichia coli. La depurazione della proteina A/G renderà tutto il IgGs nel siero, non appena gli anticorpi desiderati. La cromatografia di affinità seleziona per appena quelle con il più alta affinità verso l'obiettivo.

Egualmente convalidiamo i nostri anticorpi con l'espulsione ed il colpo (KO/KD) studia. Proteintech era la prima società per applicare gli esperimenti di convalida di colpo del siRNA, il sistema monetario aureo per la specificità difficile dell'anticorpo. Il trattamento di convalida comprende usando il piccolo RNA d'interferenza per abbattere l'espressione genica in un prodotto dell'anticorpo - valutando se il segnale si abbassa con l'espressione del gene dell'obiettivo.

Ciò è critica per l'assicurazione dei risultati coerenti ed affidabili ed è lontano superiore alla convalida facendo uso dei comandi positivi soltanto. Nel 2016 abbiamo ricevuto il premio di CiteAb per “la maggior parte della iniziativa emozionante di convalida dell'anticorpo„.

Il seguente anno, Proteintech era la società con il più grande aumento di percentuale nelle citazioni basate sui dati riuniti fra gennaio 2017 e dicembre 2017 (“supplier altamente lodato dell'anticorpo in CiteAb 2018 premi ").

Egualmente confrontiamo tutto il nostro lotto--lotto degli anticorpi, che ci aiuta ad individuare i cambiamenti nella prestazione fra i batch. Se un nuovo lotto non riesce ad eseguire come pure o a migliorare che quello precedente, è unsellable e cominciamo la produzione su un altro lotto.

È possibile usare lo stesso anticorpo per le applicazioni multiple? Come è il funzionamento di Proteintech per migliorare questo?

Come scienziati, ameremmo avere un anticorpo per tutte le applicazioni, ma purtroppo, questa è una sfida. Messa semplicemente, la biochimica di ogni analisi è contrassegnato differente. Per esempio, in Westerns, la proteina è denaturata, ma in immunohistochemistry (IHC), la proteina è nel modulo indigeno nel suo contesto cellulare.

Tuttavia, una cosa che stiamo provando a fare poichè una società deve fornire i protocolli specifici dell'anticorpo, che uno scienziato può trovare facilmente sul nostro sito Web. Ciò potrebbe significare un tempo leggermente maggiore di incubazione, un punto di recupero dell'antigene (nel caso di IHC o SE), o un punto di didascalia, ecc. differenti.

Recentemente avete approvvigionato Humanzyme, una società che produce le proteine umane recombinanti. Perché avete ritenuto questo eravate un punto necessario per Proteintech e che vantaggi le proteine recombinanti forniscono?

Per oltre 15 anni, stiamo provando a creare i migliori anticorpi da urtare la tendenza di usando i peptidi ed invece facendo uso degli immunogeno della intero-proteina. Humanzyme sta facendo le migliori proteine rinunciando ai batteri ed ai criceti ed usando le cellule umane (HEK293) per fare le proteine umane con la glicosilazione, il multimerization ed elaborare indigeni. Potreste dire che andiamo insieme come un anticorpo e una proteina!

Per le applicazioni e la ricerca umane, un sistema di espressione della cellula umana è ideale. Trovo questo affascinare: I prodotti di Humanzyme possono essere usati per studiare la modifica e la folding proteico post-di traduzione indigene nella medicina a ricupero.

Le proteine recombinanti forniscono molti vantaggi sopra le proteine derivate da altri organismi. Il primo vantaggio principale è potenza; le celle recombinanti producono le proteine con un'più alta potenza che le proteine coli-derivate E., per esempio.

Inoltre, le proteine umane recombinanti sono glicosilate dai chaperon della proteina, che sono soltanto disponibili in celle eucariotiche. Le celle dell'ovaia del criceto di cinese e (CHO) dell'insetto non possono fare questa ed il risultato è un prodotto che è meno rappresentante della proteina indigena e non funziona con molte analisi.

Confronto delle proteine prodotte facendo uso dei sistemi differenti di espressione. I cerchi colorati denotano a livello di similarità alle proteine umane. (Credito: Proteintech)

Che cosa il futuro assomiglia per a Proteintech?

Per i prossimi anni, metteremo a fuoco sull'espansione dei nostri prodotti umani recombinanti della proteina mentre però esaminando le nuove applicazioni per i nostri prodotti correnti.

Recentemente abbiamo lanciato una serie di prodotti chiamata CoraLite, che è una serie di anticorpi coniugati fluorescente-tintura che possono essere utilizzati nell'immunofluorescenza e nella citometria a flusso. CoraLite permette che gli scienziati producano bello SE immagini dal contrassegno diretto.

Anticorpi coniugati fluorescente-tintura di Coralite Proteintech (credito: Proteintech)

La nostra speranza è affinchè Humanzyme si sviluppi molto rapidamente, particolarmente quando i prodotti sono approvati per uso nei laboratori di buona pratica (GMP) di fabbricazione, che dovrebbero accadere l'anno prossimo. Ciò aprirà la porta affinchè Proteintech cominci lavorare con le società più farmaceutiche e più biomediche. In generale, il futuro sembra luminoso!

Dove possono i lettori trovare più informazioni?

Per più informazioni, visualizzi prego il sito Web di Proteintech.

Circa Karolina Szczesna

Il Dott. Karolina Szczesna è un prodotto e un project manager con esperienza con più di 7 anni' di esperienza di coordinazione dei progetti internazionali multipli, compresi le pianificazioni del progetto e gestione, metodi di vagliatura novelli difficili, nuovi prodotti di lancio e di sviluppare le relazioni fra i ricercatori ed i partner commerciali.

Il suo fuoco scientifico è riferito principalmente al sistema nervoso centrale ed ai modelli oncologici di malattia (per esempio, cellule staminali del cancro, epigenetics del cancro e studi relativi alle malattie rare di neurodevelopment). I risultati scientifici di Karolina sono riflessi in più di 10 pubblicazioni di PubMed.

A Proteintech è Product Manager multilingue e uno specialista del supporto tecnico, essendo responsabile del coordinamento delle collaborazioni internazionali e del servizio che marcano a caldo universalmente, compreso parlare della novità di scienza e delle università in cima europee della tecnologia.

Circa Proteintech

Proteintech è un anticorpo e un produttore umano della proteina che vendono direttamente agli scienziati e che vendono soltanto i sui propri prodotti per mantenere il più ad alto livello di controllo di qualità, piombo alla consistenza superiore del lotto e della riproducibilità. Con oltre 2/3 del genoma umano ha completato, noi hanno un catalogo oltre di 12.000 anticorpi contro 12.000 obiettivi che riguardano un'ampia gamma di aree di ricerca.

Siamo stati citati in decine di migliaia di pubblicazioni e forniamo la convalida interna dei nostri anticorpi in WB, IHC, SE, FC, IP e CHIP, oltre a realizzare la convalida di colpo del siRNA dei nostri anticorpi. Ulteriormente, forniamo le proteine cella-espresse essere umano che hanno la glicosilazione autentica e piegatura, rendendo il più alte attività e stabilità sopra le proteine da altri host.