De nosso banco a seu: Conselho do anticorpo de Proteintech

insights from industryDr. Karolina SzczesnaProduct Manager and Technical SupportProteintech
Uma entrevista com Dr. Karolina Szczesna de Proteintech em SfN 2018, discutindo os sinais indicadores de um bom anticorpo e como Proteintech está trabalhando para melhorar resultados experimentais para cientistas.

Por favor podem você introduzir-se e o papel que você se realiza em Proteintech?

Eu sou um cientista e um Director de produto técnicos em Proteintech. Meu papel envolve ajudar nossos clientes aperfeiçoa seus resultados de pesquisa e endereça todos os interesses através do suporte laboral compartilhando de nossas pontas experimentais e contratando cientistas através de nosso canal do blogue. Eu igualmente escrevo artigos em próximos técnicas e em aplicações novas de nossos produtos.

molekuul_bemolekuul_be | Shutterstock

Eu igualmente executo masterclasses técnicos para cientistas novos, junto com webinars do treinamento. Nossos masterclass seguintes estão o 29 de janeiro de 2019, na universidade de Newcastle, onde nós estaremos ensinando estudantes dominar a mancha e a imunofluorescência ocidentais, incluindo derrubam em como aperfeiçoar seus protocolos e superar obstáculos experimentais comuns.

Que faz um anticorpo bom ou ruim? Como pode um cientista dizer se um vendedor é de confiança ou não?

Ao gerar um anticorpo, você pode imunizar com uma proteína inteira ou um fragmento sintético pequeno do peptide que você está interessado na detecção. Em Proteintech, nós tomamos uma aproximação inteira da proteína aos anticorpos que nós oferecemos enquanto este fornece diversos benefícios para o pesquisador.

Os por cento da Noventa-cinco de anticorpos de Proteintech são aumentados contra as proteínas inteiras, deixando o sistema imunitário escolher os melhores resumos para gerar anticorpos. Esta aproximação fornece o anticorpo superior que liga à proteína nativa do alvo nos resumos múltiplos comparados aos imunogénio do peptide, e em segundo lugar, a especificidade e a sensibilidade do ensaio são melhoradas.

A vantagem final é que o anticorpo pode ser usado em mais aplicações. Por exemplo, muitos ensaios podem ser usados para estudar um único antígeno, mas cada ensaio pode exigir um anticorpo ligeira diferente segundo o resumo.

Algumas regiões da proteína podem ser melhores para uma aplicação do que outra, assim que a disponibilidade dos anticorpos inteiros dos rendimentos da proteína que podem trabalhar para aplicações múltiplas. Isto é mais provável ocorrer com uma aproximação inteira da proteína comparada a um único fragmento. Desde que o sistema imunitário pode gerar anticorpos contra toda a região da proteína inteira, há igualmente uma possibilidade alta da reactividade através da espécie devido à conservação.

Para resumir, as três vantagens principais de anticorpos da inteiro-proteína são:

  • aplicabilidade mais larga,
  • sensibilidade e afinidade obrigatórias mais altas,
  • reconhecimento superior de proteínas nativas, intactos.

Um outro sinal da confiança é se a empresa que vende o anticorpo é um fabricante e um distribuidor, ou apenas um distribuidor (re-vendedor). Isto é importante porque se você tem uma edição ou uma pergunta sobre um anticorpo, você precisa de poder obter dados CRUS da validação. Se esses dados não foram em-casa recolhida, tomarão mais por muito tempo para que a empresa ordene-a, que pode potencial atrasar suas experiências.

Proteintech - um fabricante directo (crédito: Proteintech)

Em Proteintech, todos nossos dados são livremente acessíveis em linha e nossos anticorpos foram mencionados nas centenas de publicações. Quando uma aplicação obscura é perguntada, nós podemos fornecer os dados da validação para apoiar ou refutar a experiência e para fazê-la assim dentro de 24 horas.

Nós somos orgulhosos mostrar os dados realísticos que “não foram limpados” para olhar perfeitos mas dar-lhe-emos uma ideia de como a mancha ocidental, por exemplo, olhará repetidas vezes. Eu penso que é um sinal particularmente bom da fiabilidade.

Por que é a reprodutibilidade importante e como Proteintech assegura este para cada um de seus anticorpos?

Cada cientista quer obter todas as vezes os mesmos resultados ao trabalhar com o mesmo anticorpo. Como eu mencionei, nós somos o único fabricante, assim que nós podemos fornecer o apoio imediato para os cientistas que estão pesquisando defeitos seus métodos.

Um outro sinal da qualidade é o método da purificação usado. Nós usamos a cromatografia de afinidade, que utiliza a força obrigatória de uma proteína para sua ligante. Um outro método popular é a purificação da proteína A/G, que usa a proteína de recombinação A/G da fusão de Escherichia Coli. A purificação da proteína A/G renderá todo o IgGs no soro, não apenas os anticorpos desejados. A cromatografia de afinidade selecciona para apenas essas com a afinidade a mais alta para o alvo.

Nós igualmente validamos nossos anticorpos com o KO e o knockdown (KO/KD) estuda. Proteintech era a primeira empresa para executar as experiências da validação do knockdown do siRNA, a bandeira de ouro para a especificidade de teste do anticorpo. O processo de validação envolve usar o RNA de interferência pequeno para bater para baixo a expressão genética em um produto do anticorpo - avaliando se o sinal se abranda com a expressão do gene do alvo.

Isto é crítico para assegurar resultados consistentes e seguros e é distante superior à validação usando controles positivos somente. Em 2016 nós fomos concedidos o prêmio de CiteAb para “a maioria de iniciativa emocionante da validação do anticorpo”.

O seguinte ano, Proteintech era a empresa com o aumento o maior da porcentagem nas citações baseadas nos dados recolhidos entre os janeiro de 2017 e dezembro de 2017 (“supplier altamente recomendado do anticorpo em CiteAb 2018 concessões ").

Nós igualmente comparamos todo nosso lote-à-lote dos anticorpos, que nos ajuda a detectar mudanças no desempenho entre grupos. Se um lote novo não executa assim como nem não melhora do que precedente, é unsellable, e nós começamos a produção em um outro lote.

É possível usar o mesmo anticorpo para aplicações múltiplas? Como é o funcionamento de Proteintech para melhorar isto?

Como cientistas, nós amaríamos ter um anticorpo para todas as aplicações, mas infelizmente, este é um desafio. Posta simplesmente, a bioquímica de cada ensaio é marcada diferente. Por exemplo, em Westerns, a proteína é desnaturada, mas no immunohistochemistry (IHC), a proteína está no formulário nativo em seu contexto celular.

Contudo, uma coisa que nós estamos tentando fazer porque uma empresa deve fornecer protocolos específicos do anticorpo, que um cientista pode encontrar facilmente em nosso Web site. Isto pôde significar uma estadia ligeira mais longa da incubação, uma etapa da recuperação do antígeno (no caso de IHC ou SE), ou uma etapa, etc. de obstrução diferentes.

Você comprou recentemente Humanzyme, uma empresa que produzisse proteínas humanas de recombinação. Por que você sentiu este era uma etapa necessária para Proteintech e que vantagens as proteínas de recombinação fornecem?

Por mais de 15 anos, nós temos tentado criar os melhores anticorpos resistindo de usar peptides e pelo contrário de usar imunogénio da inteiro-proteína. Humanzyme tem feito as melhores proteínas abandonando as bactérias e os hamster e usando as pilhas humanas (HEK293) para fazer proteínas humanas com glycosylation, o multimerization, e processamento nativos. Você poderia dizer que nós vamos junto como um anticorpo e uma proteína!

Para aplicações e a pesquisa humanas, um sistema da expressão da pilha humana é ideal. Eu encontro este fascinar: Os produtos de Humanzyme podem ser usados para estudar a alteração e a dobradura de proteína cargo-translational nativas na medicina regenerativa.

As proteínas de recombinação fornecem muitas vantagens sobre as proteínas derivadas de outros organismos. O primeiro benefício principal é potência; as pilhas de recombinação produzem proteínas com uma potência mais alta do que proteínas coli-derivadas E., por exemplo.

Além, as proteínas humanas de recombinação são glycosylated pelos acompanhante da proteína, que estão somente disponíveis em pilhas eucarióticas. O insecto e as pilhas chinesas do ovário (CHO) do hamster não podem fazer este, e o resultado é um produto que seja menos representante da proteína nativa e não trabalhe com muitos ensaios.

A comparação das proteínas produziu usando sistemas diferentes da expressão. Os círculos coloridos denotam ao nível da similaridade às proteínas humanas. (Crédito: Proteintech)

Que o futuro olha como para Proteintech?

Por os próximos anos, nós estaremos centrando-nos sobre a expansão de nossos produtos humanos de recombinação da proteína ao igualmente olhar em novas aplicações para nossos produtos actuais.

Nós lançamos recentemente uma linha de produtos chamada CoraLite, que é uma série de anticorpos conjugados fluorescente-tintura que podem ser usados no cytometry da imunofluorescência e de fluxo. CoraLite permite que os cientistas produzam bonito SE imagens da rotulagem directa.

Anticorpos conjugados fluorescente-tintura de Coralite Proteintech (crédito: Proteintech)

Nossa esperança é para que Humanzyme cresça muito rapidamente, especialmente quando os produtos são aprovados para o uso nos laboratórios da boa prática (GMP) de fabricação, que devem acontecer o próximo ano. Isto abrirá a porta para que Proteintech comece trabalhar com empresas mais farmacêuticas e mais biomedicáveis. Total, o futuro olha brilhante!

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

Para mais informação, visite por favor o Web site de Proteintech.

Sobre Karolina Szczesna

O Dr. Karolina Szczesna é um produto e um gestor de projecto experientes com mais de 7 anos' de experiência em coordenar projectos internacionais múltiplos, em incluir planos do projecto e gestão, métodos de selecção novos de teste, produtos novos de lançamento, e em desenvolver relacionamentos entre pesquisadores e sócios comerciais.

Seu foco científico é relacionado na maior parte ao sistema nervoso central e aos modelos Oncological da doença (por exemplo, células estaminais do cancro, epigenetics do cancro, e estudos relativos às doenças raras do neurodevelopment). As realizações científicas de Karolina são reflectidas em mais de 10 publicações de PubMed.

Em Proteintech é um Director de produto e um especialista multilingues do suporte laboral, sendo responsável para a coordenação de colaborações internacionais e de mercado que marcam no mundo inteiro, incluindo o discurso sobre a novidade da ciência e a tecnologia em universidades européias superiores.

Sobre Proteintech

Proteintech é um anticorpo e um fabricante humano da proteína que vendem directamente aos cientistas e que vendem somente seus próprios produtos a fim manter o mais de nível elevado do controle da qualidade, conduzindo à consistência superior da reprodutibilidade e do lote. Com sobre o 2/3 do genoma humano terminou, nós têm um catálogo sobre de 12.000 anticorpos contra 12.000 alvos que cobrem um espectro largo de áreas de pesquisa.

Nós fomos mencionados nos dez dos milhares de publicações e fornecemos a validação da em-casa de nossos anticorpos em WB, IHC, SE, FC, IP, e MICROPLAQUETA, além do que a execução da validação do knockdown do siRNA de nossos anticorpos. Adicionalmente, nós fornecemos as proteínas pilha-expressadas ser humano que têm o glycosylation e a dobradura autênticos, rendendo uma actividade e uma estabilidade mais altas sobre proteínas de outros anfitriões.