De nuestro banco de trabajo el suyo: Consejo del anticuerpo de Proteintech

insights from industryDr. Karolina SzczesnaProduct Manager and Technical SupportProteintech
Una entrevista con el Dr. Karolina Szczesna de Proteintech en SfN 2018, discutiendo los signos indicadores de un buen anticuerpo y cómo Proteintech está trabajando para perfeccionar los resultados experimentales para los científicos.

¿Pueden usted presentarse por favor y el papel que usted realiza en Proteintech?

Soy científico y Director de producto técnicos en Proteintech. Mi papel implica el ayudar de nuestros clientes optimiza sus resultados de investigación y dirige cualquier preocupación a través de soporte técnico compartiendo nuestros extremos experimentales y contratando a científicos vía nuestro canal del blog. También escribo los artículos en técnicas próximas y usos nuevos de nuestros productos.

molekuul_bemolekuul_be | Shutterstock

También ejecuto los masterclasses técnicos para los científicos jovenes, junto con webinars del entrenamiento. Nuestros masterclass siguientes están el 29 de enero de 2019, en la universidad de Newcastle, en donde enseñaremos a estudiantes a dominar borrar e inmunofluorescencia occidentales, incluyendo extremos en cómo optimizar sus protocolos y superar obstáculos experimentales comunes.

¿Qué hace un anticuerpo bueno o malo? ¿Cómo puede un científico informar si un vendedor es digno de confianza o no?

Al generar un anticuerpo, usted puede inmunizar con una proteína entera o un pequeño fragmento sintetizado del péptido que usted está interesado en descubrir. En Proteintech, llevamos una aproximación entera de la proteína los anticuerpos que ofrecemos mientras que esto ofrece varias ventajas para el investigador.

El noventa y cinco por ciento de los anticuerpos de Proteintech se aumenta contra las proteínas enteras, permitiendo el sistema inmune elige los mejores epitopos para generar los anticuerpos. Esta aproximación ofrece el anticuerpo superior que ata a la proteína nativa del objetivo en los epitopos múltiples comparados a los inmunógenos del péptido, y en segundo lugar, la especificidad y la sensibilidad del análisis se perfeccionan.

La ventaja final es que el anticuerpo se puede utilizar en más usos. Por ejemplo, muchos análisis se pueden utilizar para estudiar un único antígeno, pero cada análisis puede requerir un anticuerpo ligeramente diverso dependiendo del epitopo.

Algunas regiones de la proteína pueden ser mejores para un uso que otro, así que la disponibilidad de los anticuerpos enteros de los rendimientos de la proteína que pueden trabajar para los usos múltiples. Esto es más probable ocurrir con una aproximación entera de la proteína comparada a un único fragmento. Puesto que el sistema inmune puede generar los anticuerpos contra cualquier región de la proteína entera, hay también una alta ocasión de la reactividad a través de la especie debido a la protección.

Para resumir, las tres ventajas principales de los anticuerpos de la entero-proteína son:

  • una aplicabilidad más amplia,
  • una sensibilidad y una afinidad obligatorias más altas,
  • reconocimiento superior de proteínas nativas, intactas.

Otro signo de la confiabilidad es si la compañía que vende el anticuerpo es fabricante y un distribuidor, o apenas un distribuidor (revendedor). Esto es importante porque si usted tiene una entrega o una interrogación sobre un anticuerpo, usted necesita poder obtener datos SIN PROCESAR de la validación. Si esos datos no han sido internos cerco, durarán para que la compañía la compagine, que puede potencialmente demorar sus experimentos.

Proteintech - un fabricante directo (haber: Proteintech)

En Proteintech, todos nuestros datos son libremente accesibles en línea y nuestros anticuerpos se han citado en centenares de publicaciones. Cuando se pregunta un uso indeterminado, podemos ofrecer los datos de la validación para soportar o para refutar el experimento y para hacer tan en el plazo de 24 horas.

Somos orgullosos mostrar los datos realistas que “no se han limpiado” para parecer perfectos pero le daremos una idea de cómo la mancha blanca /negra occidental, por ejemplo, observará muchas veces. Pienso que es un signo determinado bueno de la fiabilidad.

¿Por qué es la reproductibilidad importante y cómo Proteintech asegura esto para cada uno de sus anticuerpos?

Cada científico quiere conseguir los mismos resultados cada vez al trabajar con el mismo anticuerpo. Como mencioné, somos el único fabricante, así que podemos proporcionar el apoyo inmediato para los científicos que están localizando averías sus métodos.

Otro signo de la calidad es el método de la purificación usado. Utilizamos la cromatografía de afinidad, que hace uso de la fuerza obligatoria de una proteína para su ligand. Otro método popular es la purificación de la proteína A/G, que utiliza la proteína recombinante A/G de la fusión de Escherichia Coli. La purificación de la proteína A/G rendirá todo el IgGs en el suero, no apenas los anticuerpos deseados. La cromatografía de afinidad selecciona para apenas las que está con la afinidad más alta hacia el objetivo.

También validamos nuestros anticuerpos con golpe de gracia y la precipitación (KO/KD) estudia. Proteintech era la primera compañía para ejecutar los experimentos de la validación de la precipitación del siRNA, el patrón oro para la especificidad de prueba del anticuerpo. El proceso de validación implica el usar del pequeño ARN de interferencia para golpear hacia abajo la expresión génica en un producto del anticuerpo - fijando si la señal se desploma con la expresión del gen del objetivo.

Esto es crítico para asegurar resultados constantes y seguros y es lejos superior a la validación usando mandos positivos solamente. En 2016 nos concedieron el premio de CiteAb para “la mayoría de la iniciativa emocionante de la validación del anticuerpo”.

El año siguiente, Proteintech era la compañía con el aumento más grande del porcentaje de las citaciones basadas en los datos recopilados entre enero de 2017 y diciembre de 2017 (“supplier altamente elogiado del anticuerpo en CiteAb 2018 recompensas ").

También comparamos todo nuestro lote-a-lote de los anticuerpos, que nos ayuda a descubrir cambios en funcionamiento entre las mezclas. Si un nuevo lote no puede realizarse así como o mejorar que el anterior, es unsellable, y comenzamos la producción en otro lote.

¿Es posible utilizar el mismo anticuerpo para los usos múltiples? ¿Cómo está el funcionamiento de Proteintech para perfeccionar esto?

Como científicos, amaríamos tener un anticuerpo para todos los usos, pero lamentablemente, esto es un reto. Puesta simple, la bioquímica de cada análisis es marcado diferente. Por ejemplo, en Westerns, se desnaturaliza la proteína, pero en immunohistochemistry (IHC), la proteína está en forma nativa en su contexto celular.

Sin embargo, una cosa que estamos intentando hacer pues una compañía es ofrecer protocolos específicos del anticuerpo, que un científico puede encontrar fácilmente en nuestro Web site. Esto pudo significar un rato ligeramente más largo de la incubación, un paso de la extracción del antígeno (en el caso de IHC o SI), o un diversos paso, etc. que cegaban.

Usted compró recientemente Humanzyme, compañía que produce las proteínas humanas recombinantes. ¿Por qué usted aserraba al hilo esto era un paso necesario para Proteintech y qué ventajas las proteínas recombinantes ofrecen?

Por más de 15 años, hemos estado intentando crear los mejores anticuerpos resistiendo la tendencia de usar los péptidos y en lugar de otro usando inmunógenos de la entero-proteína. Humanzyme ha estado haciendo las mejores proteínas renunciando bacterias y hámsteres y usando las células humanas (HEK293) para hacer las proteínas humanas con el glycosylation, el multimerization, y el tramitación nativos. ¡Usted podría decir que vamos juntos como un anticuerpo y una proteína!

Para los usos y la investigación humanos, un sistema de la expresión de la célula humana es ideal. Encuentro esta fascinación: Los productos de Humanzyme se pueden utilizar para estudiar la modificación y el plegamiento de proteína poste-de translación nativos en remedio regenerador.

Las proteínas recombinantes ofrecen muchas ventajas sobre las proteínas derivadas de otros organismos. La primera ventaja mayor es potencia; las células recombinantes producen las proteínas con una potencia más alta que las proteínas coli-derivadas E., por ejemplo.

Además, las proteínas humanas recombinantes son glycosylated por las señoras de compañía de la proteína, que están solamente disponibles en células eucarióticas. El insecto y las células chinas del ovario (CHO) del hámster no pueden hacer esto, y el resultado es un producto que es menos representante de la proteína nativa y no trabaja con muchos análisis.

Comparación de las proteínas producidas usando diversos sistemas de la expresión. Los círculos coloreados denotan llano de semejanza a las proteínas humanas. (Haber: Proteintech)

¿Qué el futuro parece para Proteintech?

Por los próximos años, nos centraremos en desplegar nuestros productos humanos recombinantes de la proteína mientras que también observan en las nuevas aplicaciones para nuestros productos actuales.

Pusimos en marcha recientemente una línea de productos llamada CoraLite, que es una serie de anticuerpos conjugados fluorescente-tinte que se puedan utilizar en cytometry de la inmunofluorescencia y de flujo. CoraLite permite que los científicos produzcan hermoso SI las imágenes de la etiqueta directa.

Anticuerpos conjugados fluorescente-tinte de Coralite Proteintech (haber: Proteintech)

Nuestra esperanza está para que Humanzyme crezca muy rápidamente, especialmente cuando los productos son aprobados para el uso en los laboratorios de la buena práctica (GMP) de fabricación, que deben suceso el próximo año. Esto abrirá la puerta para que Proteintech comience a trabajar con compañías más farmacéuticas y más biomédicas. ¡Total, el futuro parece brillante!

¿Dónde pueden los programas de lectura encontrar más información?

Para más información, visite por favor el Web site de Proteintech.

Sobre Karolina Szczesna

El Dr. Karolina Szczesna es un producto y gestor de proyecto experimentados con más de 7 años' de experiencia en coordinar proyectos internacionales múltiples, incluyendo los planes y administración, los métodos de cribado nuevos de prueba, nuevos productos que lanzan del proyecto, y desarrollar lazos entre los investigadores y los socios comerciales.

Su foco científico se relaciona sobre todo con el sistema nervioso central y los modelos Oncological de la enfermedad (e.g., células madres del cáncer, epigenetics del cáncer, y estudios relacionados con las enfermedades raras del neurodevelopment). Los logros científicos de Karolina se reflejan en más de 10 publicaciones de PubMed.

En Proteintech ella es Director de producto y especialista multilingües del soporte técnico, siendo responsable de la coordinación de colaboraciones internacionales y del mercado que califican por todo el mundo, incluyendo el discurso sobre novedad de la ciencia y universidades en la parte superior europeas de la tecnología.

Sobre Proteintech

Proteintech es un anticuerpo y fabricante humano de la proteína que venden directamente a los científicos y que venden solamente sus propios productos para mantener el del más alto nivel del control de calidad, llevando al estado coherente superior de la reproductibilidad y del lote. Con sobre 2/3 del genoma humano terminó, nosotros tienen un catálogo sobre de 12.000 anticuerpos contra 12.000 objetivos que revestían una amplia gama de las áreas de investigación.

Nos han citado en decenas de miles de publicaciones y ofrecemos la validación interna de nuestros anticuerpos en WB, IHC, SI, FC, IP, y VIRUTA, además de realizar la validación de la precipitación del siRNA de nuestros anticuerpos. Además, ofrecemos las proteínas célula-expresadas ser humano que tienen el glycosylation y plegamiento auténticos, rindiendo una actividad y una estabilidad más altas sobre las proteínas de otros ordenadores principal.