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Plataforma arranjando em seqüência maciça nova executada para o teste genético do preimplantation dobro do factor

Uma equipa de investigação do Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), em colaboração com o banco do sangue e de tecido de Catalonia, controlou executar pela primeira vez uma plataforma arranjando em seqüência maciça para o teste genético (PGT) de Preimplantation na história.

O trabalho de pesquisa adaptou o TruSight uma (TSO) plataforma, um de hoje a maioria de painéis genéticos completos com sobre os 4.800 genes responsáveis para as doenças (hereditárias) monogenetic as mais comuns, ao teste genético de Preimplantation do factor dobro (DF-PGT).

O estudo, publicado em PLoS UM, foi conduzido por Joaquima Navarro e por Jordi Benet, pesquisadores do departamento de UAB da biologia, da fisiologia e da imunologia celulares, e incluiu a colaboração da equipe conduzida por Francisco Vidal do banco do sangue e de tecido de Catalonia.

“Nós controlamos com sucesso executar uma estratégia inovativa, prometedora e universal, preparada para um diagnóstico simultâneo de mutações genéticas e de alterações cromossomáticas dentro dos embriões obtidos in vitro pela fecundação (IVF), do benefício às famílias do candidato de DF-PGT com as mutações que causam as doenças incluídas na plataforma do TSO. Além, exige somente uma única experiência do laboratório e sem a necessidade de preparar previamente a metodologia do diagnóstico. Isto acelera substancialmente o processo do estudo e a disponibilidade dos resultados desordens do gene da família das únicas. Até aqui, havia uma necessidade de preparar os procedimentos específicos antes de conduzir o diagnóstico para cada um das mutações”, Joaquima Navarro indica.

A nova ferramenta tornará possível diagnosticar directa e indirectamente mutações ambas, que aumenta o nível de segurança do diagnóstico. Ao mesmo tempo, permite a caracterização cromossomática dentro dos embriões, para a totalidade de todos os 23 pares do cromossoma humano, e detecta se o embrião é aneuploid, com um número anormal de cromossomas e conseqüentemente não-transferível, ou o euploid, com o número correcto e conseqüentemente viável e com maiores possibilidades da implantação.

A equipe conduzida pelo professor Navarro desenvolveu a estratégia de DF-PGT em 2009. Uma técnica de abertura de caminhos aplicada com sucesso em numerosas ocasiões desde então, consiste em analisar dentro de um mesmo ciclo de IVF as mutações genéticas específicas que causam doenças hereditárias, assim como em uma doação cromossomática embrionária completa (citogenética) com uma técnica genomic comparativa da hibridação. Isto reserva identificar e selecionar os embriões que estão livres das doenças e dos defeitos cromossomáticos que impedem sua evolução. Em 2009, 2013 e 2015, este grupo era o primeiro - nunca para usar uma outra estratégia de DF-PGT para seleccionar embriões saudáveis e para ajudar a prole saudável do nascimento diferente das famílias: os gêmeos livram da síndrome de Von Hippel-Lindau, dos gêmeos livres da síndrome de Lynch, e outros de dois bebês saudáveis de duas famílias em risco da doença da célula falciforme e da fibrose cística, respectivamente. Naquelas ocasiões, os cientistas primeiramente tiveram que preparar os métodos do diagnóstico das mutações responsáveis para a doença genética específica; considerando que na estratégia actual propor, nenhuma preparação específica é necessária.

Superando limitações do ADN nas células embrionárias

A próxima geração que arranja em seqüência (NGS) técnicas representa um pulo gigante para a frente na qualidade de procedimentos genéticos da análise, dada que permitem estudar milhões de seqüências do ADN maciça e simultaneamente em uma mesma experiência. Estas ferramentas poderosas estão sendo usadas com sucesso para a caracterização do sangue e das amostras de tecido, em que a quantidade de ADN não é um factor de limitação.

“A metodologia propor supera as limitações que existem até aqui. Foi desenvolvida para ser aplicada às amostras de somente 6-8 pilhas do trophoderm do blastocyst com o programa de um ciclo congelado de transferência do embrião, no caso dos resultados que indicam uma ausência de doenças da família e o embrião”, explica Joaquima Navarro.

Antes de executar a plataforma nova havia uma necessidade de determinar qual dos quatro sistemas os mais de uso geral da amplificação do ADN era o mais apropriado para a identificação adequada das mutações. Os pesquisadores eram assim igualmente os primeiros - nunca para conduzir uma caracterização cromossomática com o programa computacional da biologia do nexo usando a base de dados do TSO.

“A ferramenta é igualmente do interesse em PGTs com risco de alterações cromossomáticas devido a idade materna avançada, alterações encontradas nos cromossomas do pai, assim como nos casos de aborto repetidos. Igualmente nas caixas dos oocytes de doadores novos, desde que um determinado risco de aneuploidy foi descrito igualmente”, o pesquisador de UAB indica.

Os pesquisadores estão seguros que esta metodologia nova estará logo disponível para o uso com o painel do TSO ou aplicando o aos painéis novos, ainda mais completos, tais como esses capazes de analisar o exome inteiro ou do arranjar em seqüência inteiro do genoma. Estão igualmente certos que no termo médio estará aplicado simultaneamente a muitas amostras, reduzindo desse modo seu custo.

Além do que pesquisadores do UAB e o banco do sangue e de tecido de Catalonia, este estudo incluiu a participação dos especialistas do instituto de investigação do d'Hebron de Vall (VHIR), da fundação de Puigvert, o en Vermelho de Enfermedades Cardiovasculares (CIBERCV), o centro de Medicina Embrionària (CME), o d'Infertilitat do centro mim Reproducció Humana (CIRH) e o pi de Centro de Investigación de agosto mim o instituto de investigação biomedicável de Sunyer (IDIBAPS).

“Nosso trabalho representa um marco miliário muito importante na linha de pesquisa que nós conduzimos no teste genético do preimplantation. Um campo em que o UAB estava no pelotão da frente global nos anos 80 sob a orientação do professor da biologia celular Josep Egozcue. Nós amaríamos compartilhar destes resultados com ele, seria satisfeito certamente muito”, Joaquima Navarro declara.