Advertencia: Esta página es una traducción de esta página originalmente en inglés. Tenga en cuenta ya que las traducciones son generadas por máquinas, no que todos traducción será perfecto. Este sitio Web y sus páginas están destinadas a leerse en inglés. Cualquier traducción de este sitio Web y su páginas Web puede ser imprecisa e inexacta en su totalidad o en parte. Esta traducción se proporciona como una conveniencia.

Nueva plataforma de secuencia masiva ejecutada para las pruebas genéticas del preimplantation doble del factor

Un equipo de investigación del Universitat Autònoma de Barcelona (UAB), en colaboración con la inclinación lateral de la sangre y de tejido de Cataluña, ha manejado ejecutar una plataforma de secuencia masiva para las pruebas genéticas de Preimplantation (PGT) por primera vez en historia.

El trabajo de investigación ha adaptado el TruSight una (TSO) plataforma, una de hoy la mayoría de los paneles genéticos completos con sobre 4.800 genes responsables de las enfermedades (hereditarias) monogenéticas mas comunes, a las pruebas genéticas de Preimplantation del factor doble (DF-PGT).

El estudio, publicado en PLoS UNO, fue llevado por Joaquima Navarro y Jorge Benet, investigadores del departamento de UAB de la biología, de la fisiología y de la inmunología celulares, e incluyó la colaboración de las personas llevadas por Francisco Vidal de la inclinación lateral de la sangre y de tejido de Cataluña.

“Manejamos con éxito ejecutar una estrategia innovadora, prometedora y universal, preparada para una diagnosis simultánea de mutaciones genéticas y de cambios cromosómicos dentro de los embriones obtenidos por la fertilización in vitro (IVF), de la ventaja a las familias del candidato de DF-PGT con las mutaciones que causaban las enfermedades incluidas en la plataforma de la TSO. Además, requiere solamente un único experimento del laboratorio y sin la necesidad de preparar previamente la metodología de la diagnosis. Esto acelera substancialmente el proceso del estudio y la disponibilidad de los resultados de los únicos desordenes del gen de la familia. Hasta ahora, había una necesidad de elaborar los procedimientos específicos antes de conducto la diagnosis de cada uno de las mutaciones”, Joaquima Navarro señala.

La nueva herramienta permitirá diagnosticar las mutaciones ambas directa e indirectamente, que aumenta el nivel de seguridad de la diagnosis. Al mismo tiempo, permite la caracterización cromosómica dentro de embriones, para la totalidad de los 23 pares del cromosoma humano, y descubre si el embrión es aneuploide, con un número anormal de cromosomas y por lo tanto intransferible, o el euploide, con el número correcto y por lo tanto viable y con mayores ocasiones de la implantación.

Las personas llevadas por profesor Navarro desarrollaron la estrategia de DF-PGT en 2009. Una técnica pionera aplicada con éxito en numerosas ocasiones desde entonces, consiste en analizar dentro de un mismo ciclo de IVF las mutaciones genéticas específicas que causan enfermedades hereditarias, así como una dotación cromosómica embrionaria completa (citogenética) con una técnica genomic comparativa del hibridación. Esto permite el determinar y el seleccionar de los embriones que están libres de las enfermedades y de los defectos cromosómicos que obstaculizan su evolución. En 2009, 2013 y 2015, este grupo era el primero para utilizar otra estrategia de DF-PGT para seleccionar embriones sanos y para ayudar a descendientes sanos de diverso nacimiento de las familias: los gemelos liberan del síndrome de Von Hippel-Lindau, de los gemelos libres del síndrome de Lynch, y de dos otros bebés sanos a partir de dos familias a riesgo de anemia de células falciformes y de fibrosis quística, respectivamente. En esas ocasiones, los científicos primero tuvieron que preparar los métodos de la diagnosis de las mutaciones responsables de la enfermedad genética específica; considerando que en la estrategia actual propuesta, no hay preparación específica necesaria.

Vencer limitaciones de la DNA en células embrionarias

La generación siguiente que ordena (NGS) técnicas representa un salto gigante adelante en la calidad de los procedimientos genéticos del análisis, dado que permiso el estudiar de millones de series de la DNA masivo y simultáneamente en un mismo experimento. Estas herramientas potentes se están utilizando con éxito para la caracterización de la sangre y de las muestras de tejido, en la cual la cantidad de DNA no es un factor de restricción.

“La metodología propuesta vence las limitaciones que existen hasta ahora. Fue desarrollada para ser aplicada a las muestras de solamente 6-8 células del trophoderm del blastocyst con la previsión de un ciclo congelado de la transferencia del embrión, en el caso de los resultados que indicaban una ausencia de enfermedades de la familia y el embrión”, explica Joaquima Navarro.

Antes de ejecutar de la nueva plataforma había una necesidad de determinar cuáles de los cuatro sistemas más de uso general de la amplificación de la DNA eran los más convenientes para la identificación adecuada de mutaciones. Los investigadores eran así también los primeros para conducto una caracterización cromosómica con el programa de cómputo de la biología del nexo usando la base de datos de la TSO.

“La herramienta está también de interés en PGTs con el riesgo de cambios cromosómicos debido a la edad maternal avanzada, cambios encontrados en los cromosomas del padre, así como en casos de abortos involuntarios relanzados. También en casos de los oocytes de donantes jovenes, puesto que cierto riesgo de aneuploide también se ha descrito”, el investigador de UAB señala.

Los investigadores se sienten confiados que esta nueva metodología pronto estará disponible para el uso con el panel de la TSO o aplicándolo a los paneles nuevos, aún más completos, tales como los que está capaces de analizar el exome entero o de la secuencia entera del genoma. Están también segura que en el término central será aplicado simultáneamente a muchas muestras, de tal modo reduciendo su costo.

Además de los investigadores del UAB y de la inclinación lateral de la sangre y de tejido de Cataluña, este estudio incluyó la implicación de especialistas del instituto de investigación del d'Hebron de Vall (VHIR), del asiento de Puigvert, el en Red de Enfermedades Cardiovasculares (CIBERCV), el centro de Medicina Embrionària (CME), el d'Infertilitat i Reproducció Humana (CIRH) del centro y el instituto de investigación biomédico de agosto pi i Sunyer (IDIBAPS) de Centro de Investigación.

“Nuestro trabajo representa una piedra miliaria muy importante en la línea de la investigación que conducto en pruebas genéticas del preimplantation. Un campo en el cual el UAB estaba en la vanguardia global en los años 80 bajo la orientación del profesor de la biología celular José Egozcue. Habríamos amado compartir estos resultados con él, muy lo habrían satisfecho ciertamente”, Joaquima Navarro declara.