El nuevo immunoensayo puede descubrir las pequeñas moléculas con mayor sensibilidad de 50 dobleces

Pues la ciencia médica ha venido entender que el cuerpo humano es controlado en el nivel molecular por las diversas proteínas, las hormonas, las drogas, y otras substancias, las tecnologías se han convertido para descubrir los niveles de estas moléculas para vigilar salud y diagnosticar enfermedad. Sin embargo, muchas de estas moléculas son que no pueden ser descubiertas por lo más extensamente posible - técnicas disponibles tan pequeñas del análisis, dejando preguntas sobre substancias cruciales como los aminoácidos, los azúcares, y los lípidos en gran parte por contestar.

Ahora, los científicos en el instituto de Wyss para la ingeniería biológico inspirada en la Universidad de Harvard y Brigham y el hospital de las mujeres (BWH) han creado un nuevo tipo de immunoensayo que es capaz de descubrir las pequeñas moléculas con mayor sensibilidad de 50 dobleces que métodos de detección convencionales, y pueden ser integrados fácilmente en las plataformas diagnósticas existentes. La investigación se describe en el gorrón de la sociedad de substancia química americana.

“La sensibilidad analítica aumentada de nuestro análisis habilita mediciones de pequeñas moléculas en extremadamente - las concentraciones inferiores, y abre una ventana en los fenómenos biológicos que eran previamente inalcanzables,” dijo a David mayor Walt autor, Ph.D., miembro del profesorado de la base del instituto de Wyss que es también el profesor de Hansjörg Wyss de la ingeniería biológico inspirada en la Facultad de Medicina de Harvard (HMS) y profesor de la patología en BWH, así como profesor de HHMI.

La nueva aproximación se basa en un tipo de análisis llamado un immunoensayo competitivo, en el cual una cantidad sabida de una molécula etiqueta del interés y una muestra con una cantidad desconocida de la molécula ambas se agregan a un arsenal de los anticuerpos a los cuales atan. Las moléculas etiqueta y sin etiqueta entonces “compiten” para los mismos puntos de enlace del anticuerpo. Analizando la cantidad de la molécula etiqueta del interés que está limitado a los anticuerpos comparó al número total de sitios disponibles del anticuerpo, él es posible concluir que los sitios restantes son limitados por la molécula sin etiqueta de la muestra, permitiendo que la concentración de esa molécula sea determinada.

Los investigadores crearon dos tipos de immunoensayos competitivos que utilizaron ligeramente métodos diferentes para capturar las pequeñas moléculas del interés, sobre la base del sistema de Simoa de Quanterix™. El primer método utiliza los microbeads magnéticos recubiertos con la molécula del objetivo como el competidor, mientras que el segundo método sujeta la molécula del objetivo a la beta-galactosidasa de la enzima, que entonces ata a las molduras magnéticas para formar el complejo del competidor. Después de las mezclas de la moldura/del anticuerpo se permiten mezclarse con una muestra que contiene una cantidad desconocida de la molécula del objetivo, las molduras se enjuagan para quitar cualquier molécula desatada y después se agregan a un disco de Simoa que contiene millares de microwells, que pueden esperar una moldura limitada a una molécula del objetivo. Una reacción entonces ocurre que hace cualquier pozo que contiene una moldura con la molécula etiqueta del objetivo para ser fluorescente. Menos número de pozos fluorescentes, las menos moléculas etiqueta del objetivo están limitadas a las molduras, y así al mayor es la concentración de la molécula sin etiqueta del objetivo presente en la muestra.

Dos pequeñas moléculas que son importantes para la función normal del cuerpo humano eran analizadas: cortisol y PGE2. El cortisol es ampliamente utilizado evaluar la función de las casquillos del prensaestopas suprarrenales, pituitarias, y del hipotálamo, mientras que PGE2 es a hormona-como la molécula de la prostaglandina que influencia la inflamación, la fertilidad, y la función inmune. Los nuevos métodos competitivos podían descubrir sus objetivos con hasta 50 veces mayor sensibilidad que un ELISA convencional (análisis enzima-conectado del inmunosorbente), en más o menos de una hora.

“Nuestro plan es utilizar este método en los diagnósticos para la detección perfeccionada de hormonas en muestras de sangre,” dijo a primer Xu Wang autor, Ph.D., profesor investigador postdoctoral en BWH y el instituto de Wyss. “Estamos trabajando para intentar comercializar esta tecnología para la detección rápida de las pequeñas moléculas para una variedad de usos clínicos y ambientales.”

“Las personas de Walt continúan activar el envolvente en el campo de diagnósticos con este avance. Detectando las moléculas previamente imperceptibles dentro de una hora, abren totalmente nuevas aproximaciones en los diagnósticos y la supervisión clínica que deben perfeccionar grandemente salud humana. Es exacto el tipo de innovación de translación que esperamos habilitar y autorizar en el instituto de Wyss,” dijo al director de fundación Donald Ingber, M.D., el Ph.D., que es también el profesor de Judah Folkman de la biología vascular en el HMS y del programa vascular de la biología en el hospital de niños de Boston, así como profesor del instituto de Wyss de la bioingeniería en la escuela de Harvard de la ingeniería y de las ciencias aplicadas (MARES).

Fuente: https://wyss.harvard.edu/

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