Het maken van het grootste deel van Microdialysis voor de Analyse van de Neurotransmitter

insights from industryMartin EysbergDirector of Sales and MarketingAntec Scientific

Nieuws-medisch spreekt aan Martin Eysberg, dat de gevolgen van monoamines zoals dopamine op gedrag en neurologische ziekte bespreekt en een inleiding aan de Analysator van de Neurotransmitter ALEXYS, een uiterst nauwkeurige detector verstrekt de uhplc-EG die voor de studie van neurotransmissie in tijd ideaal is.

Hoe is om microdialysis die worden gebruikt om ons begrip van neurotransmissie te bevorderen?

Microdialysis is een bemonsteringstechniek die wordt gebruikt om extracellulaire vloeistof van de hersenen te verzamelen. Het wordt gebruikt om een waaier van voorwaarden, met inbegrip van Parkinson, Alzheimer, verslaving, gedrag met betrekking tot vrees, neuroactivity na de consumptie van alcohol etc. te bestuderen.

Een illustratie van neurotransmissie tussen twee zenuwcellen. De Insider van de anatomie | Shutterstock

In biomedisch onderzoek, microdialysis die vaak in combinatie met vloeibare chromatografie wordt uitgevoerd om directe metingen van analytes in de hersenen te nemen of steekproeven in kleine flesjes te verzamelen.

Deze opstelling kan worden gebruikt om veranderingen in de concentratie van neurotransmitters na stimulatie, of een trekker waar te nemen. Bijvoorbeeld, kunnen de interne veranderingen in neurotransmissie en neurotransmitterconcentratie na het beleid van alcohol aan een onderwerp worden gemeten.

Waarom wordt microdialysis vaak gecombineerd met HPLC voor monoamine opsporing?

Microdialysis is een onschatbaar hulpmiddel geworden dat informatie in real time in vivo van neurotransmitterniveaus verstrekt. De steekproeven van Microdialysis worden of verzameld en opgeslagen of onmiddellijk in een online configuratie gebruikend UHPLC en elektrochemische opsporing geanalyseerd (ECD).

Er zijn twee belangrijke redenen waarom combineren van deze technologieën noodzakelijk is; de gevoeligheid van de techniek en het kleine beschikbare steekproefvolume. Het is een analytische uitdaging om reproduceerbare en nauwkeurige gegevens te verstrekken aangezien de neurotransmitterniveaus vaak onder nanomolar en soms zelfs onder picomolar concentratiewaaier zijn, zodat is de gevoeligheid essentieel. Bovendien kunnen de meeste microdialysissystemen 1 steekproef µL per minuut slechts halen, zodat zelfs als u meer dan vijf tot tien minuten bemonstert, kunt u slechts 5-10 µL van steekproef verkrijgen.

De elektrochemische detectors, die ook als de detectors van de spooranalyse worden bekend, zijn daarom de duidelijke keus voor dit type van analyse. Andere detectors, zoals lidstaten of UV, die grotere steekproefvolumes vereisen, zijn niet geschikt voor deze specifieke toepassing.

Wat zijn de grootste uitdagingen voor wetenschappers wanneer in vivo het ontdekken van en het analyseren van neurotransmitters?

De analyse van de neurotransmitter komt met een paar uitdagingen; de eerste is de wetenschappelijke richting. Hoe kunnen de onderzoekers zoveel mogelijk informatie uit een klein druppeltje van steekproef krijgen?

De neurobiologie in vivo wordt reeds beperkt door steekproefgrootte, vooral voor onderzoekers die met muizen werken, en als u bemonstering met hoge frekwentie wilt in werking stellen om uw tijdresolutie te verbeteren, worden de steekproeven nog kleiner (onderaan aan 1 µL). Het ontwikkelen van technologieën die kleine steekproeven kunnen analyseren zonder gevoeligheid te compromitteren is een zeer grote uitdaging.

De andere moeilijkheid is dat de meeste wetenschappers die in neurologie werken onderwijsachtergronden in biologie hebben. Dit betekent dat heel wat wetenschappers het vinden opwindend om kleine steekproeven zoals monoamines (b.v. dopamine) met hoge gevoeligheid te analyseren.

Illustratie van zenuwcellen in de hersenen - neurotransmittersTatiana Shepeleva | Shutterstock

Hoe behandelt de Analysator van de Neurotransmitter ALEXYS deze kwesties?

De analysator ALEXYS combineert de macht van UHPLC met de gevoeligheid van elektrochemische opsporing, die tot het maakt het perfecte hulpmiddel voor de opsporing van neurotransmitters.

Met ALEXYS, ons doel was het leven van de wetenschapper gemakkelijker te maken. Wij wilden de onervarenheid in de industrie aanpakken en het runnen van deze eenvoudiger en efficiëntere experimenten maken. Het meten van steekproeven is één deel, maar de wetenschappers hebben ook een robuuste, betrouwbare methode nodig.

Wij ontwikkelden dit door ALEXYS, en nu constant monitor welk soort hulpmiddelen in de markt is om resolutie, steekproefinjectie, en snelheid te verbeteren, terwijl dalende kostbare steekproefconsumptie.

Tot slot wordt de analysator ALEXYS geïnstalleerd door één van onze wetenschappers, die vijf dagen in het laboratorium uitvoerend installatie en opleiding zullen doorbrengen. Wanneer wij het laboratorium verlaten, zelfs zal de meest onervaren neuroloog de kennis hebben om hun eigen steekproeven voor een specifieke toepassing in werking te stellen.

Hoe kan de Analysator van de Neurotransmitter ALEXYS op studiedopamine niveaus met betrekking tot gedragsproblemen (b.v. verslaving worden gebruikt) en neurologische wanorde (b.v. Ziekte van Parkinson)?

De hersenen zijn een dynamisch orgaan waar de concentratie van neurotransmitters snel na een trekker kan veranderen. Het kan, daarom, als geen verrassing dat komen de onderzoekers op dit gebied zoveel mogelijk gegeven willen verzamelen over een zeer korte periode.

In het verleden, verzamelden de wetenschappers 20 µL microdialysissteekproeven, aan hoge stroomtarieven (2-3 µL/min), gevend hen 40-60 µL van een zeer verdunde steekproef. Dit maakte het moeilijk om voldoende tijdresolutie (verzamel d.w.z. genoeg gegevenspunten in een korte periode) en zonder dit te verkrijgen, kunt u snelle schommelingen in neurotransmitterconcentratie ontdekken niet.

Dat is waarom wij een systeem dat ontwikkelden zeer kleine verkregen steekproefvolumes (b.v. 1.5 µL) kon analyseren om de 1.5 minuten, zonder het compromitteren op gevoeligheid (ruwweg rond 100 p.m.).

Welke andere steekproeven kunnen ALEXYS aan studie worden gebruikt?

Er zijn drie belangrijke analyses die voor de analyse van neurotransmitters worden gebruikt. De eerste analyse is voor monoamines en metabolites zoals dopamine, norepinephrine, en serotonine.

Daarna, hebben wij een analyse voor aminozuren zoals GABA en glutamaat. Deze analyse vereist pre-kolomafleiding en een zeer selectieve analyse UHPLC aan afzonderlijk Glutamaat, van GABA, in het zelfde chromatogram.

Onze definitieve analyse is voor acetylcholine en choline en gebruikend een Geïmmobiliseerde reactor uitgevoerd van de Reactor (IMER) van het Enzym waar u acetylcholine/choline in peroxyde omzet.

Dit zijn onze drie belangrijke groepen. Nochtans, zijn er ook wetenschappers die ons systeem voor de opsporing van andere chemische producten gebruiken, die een andere detector toevoegen. Bijvoorbeeld, als een onderzoeker moet ontdekken neuropeptides, kunnen zij de zelfde analysator met een UVdetector gebruiken.

Waar kunnen de lezers meer informatie vinden?

Ongeveer Martin Eysberg

Foto van Martin EysbergMartin is de Directeur van Verkoop en Marketing voor Wetenschappelijke Antec, en concentreerde de producten/de toepassingen rond de analytische behoeften van neurologen. Hij heeft in het bijzonder in gedragsveranderingen zoals verslaving geïnteresseerd, en neurologische wanorde die door tekorten in neurotransmissie wordt veroorzaakt.

Martin leidt de ontwikkeling van de markt voor nieuwe producten, en lanceerde onlangs ROXY de EG, een elektrochemiesysteem voor massaspectrometrie. De productlijn met de nadruk op simulatie van natuurlijke redoxreacties overeenkomstig lidstaten.