Tirer le meilleur de Microdialysis pour l'analyse de neurotransmetteur

insights from industryMartin EysbergDirector of Sales and MarketingAntec Scientific

Nouvelles-Médical parle à Martin Eysberg, qui discute les effets des monoamines telles que la dopamine sur le comportement et la maladie neurologique et fournit une introduction à l'analyseur de neurotransmetteur d'ALEXYS, un détecteur extrêmement précis d'UHPLC-EC qui est idéal pour l'étude de la neurotransmission au fil du temps.

Comment le microdialysis est-il employé pour promouvoir notre compréhension de la neurotransmission ?

Microdialysis est une technique d'échantillonnage qui est employée pour rassembler le liquide extracellulaire du cerveau. Il est employé pour étudier une gamme des conditions, y compris Parkinson, Alzheimer, la dépendance, comportement par rapport à la crainte, neuroactivity suivant la consommation d'alcool et ainsi de suite.

Une illustration de la neurotransmission entre deux cellules nerveuses. Initié d'anatomie | Shutterstock

Dans la recherche biomédicale, le microdialysis souvent effectués en combination avec la chromatographie liquide pour prendre des mesures directes des analytes dans le cerveau ou pour rassembler des échantillons dans de petites fioles.

Cette installation peut être employée pour observer des changements de la concentration des neurotransmetteurs après stimulation, ou un déclencheur. Par exemple, des changements internes de la neurotransmission et de la concentration en neurotransmetteur peuvent être mesurés après la gestion de l'alcool à un sujet.

Pourquoi le microdialysis est-il souvent combiné avec la CLHP pour le dépistage de monoamine ?

Microdialysis est devenu un outil inestimable qui fournit l'information en temps réel des niveaux de neurotransmetteur in vivo. Des échantillons de Microdialysis sont rassemblés et enregistrés ou analysés immédiatement dans une configuration en ligne utilisant UHPLC et dépistage électrochimique (ECD).

Il y a deux raisons principales pourquoi la combinaison de ces technologies est nécessaire ; la sensibilité de la technique et du petit volume témoin procurables. C'est un défi analytique pour fournir des caractéristiques reproductibles et précises car les niveaux de neurotransmetteur sont souvent en dessous de gamme de concentration nanomolar et parfois même en dessous picomolar, ainsi la sensibilité est essentielle. De plus, la plupart des systèmes de microdialysis peuvent seulement extraire 1 échantillon de µL par minute, ainsi même si vous échantillonnez plus de cinq à dix mn, vous pouvez seulement obtenir le µL 5-10 de l'échantillon.

Les détecteurs électrochimiques, également connus sous le nom de détecteurs d'analyse de trace, sont pour cette raison le choix évident pour ce type d'analyse. D'autres détecteurs, comme la milliseconde ou l'UV, qui exigent de plus grands volumes témoin, ne sont pas adaptés pour cette application spécifique.

Quels sont les défis les plus grands pour des scientifiques en trouvant et en analysant des neurotransmetteurs in vivo ?

L'analyse de neurotransmetteur vient avec quelques défis ; le premier est le sens scientifique. Comment les chercheurs peuvent-ils obtenir autant l'information comme possible hors d'une petite gouttelette d'échantillon ?

In vivo la neurobiologie est déjà limitée par taille de l'échantillon, particulièrement pour des chercheurs travaillant avec des souris, et si vous voulez faire fonctionner l'échantillonnage à haute fréquence pour améliorer votre résolution temporelle, les échantillons deviennent encore plus petits (vers le bas à 1 µL). Développer les technologies qui peuvent analyser de petits échantillons sans sensibilité compromettante est très un défi important.

L'autre difficulté est que la plupart des scientifiques travaillant en neurologie ont des formations dans la biologie. Ceci signifie que beaucoup de scientifiques le trouvent contester pour analyser de petits échantillons tels que des monoamines (par exemple dopamine) avec la sensibilité élevée.

Illustration des cellules nerveuses dans le cerveau - neurotransmetteursTatiana Shepeleva | Shutterstock

Comment l'analyseur de neurotransmetteur d'ALEXYS aborde-t-il ces éditions ?

L'analyseur d'ALEXYS combine le pouvoir d'UHPLC avec la sensibilité du dépistage électrochimique, lui effectuant l'outil parfait pour le dépistage des neurotransmetteurs.

Avec l'ALEXYS, notre objectif était de faciliter la durée du scientifique. Nous avons voulu aborder le manque d'expérience de l'industrie et rendre faisant fonctionner ces expériences plus simple et plus efficace. La mesure des échantillons est une part, mais les scientifiques ont besoin également d'une méthode robuste et fiable.

Nous avons développé ceci par l'ALEXYS, et surveillons maintenant continuellement ce qui usine un peu est sur le marché pour améliorer la définition, l'injection témoin, et la vitesse, tout en diminuant la consommation précieuse témoin.

En conclusion, l'analyseur d'ALEXYS est monté par un de nos scientifiques, qui passeront cinq jours dans le laboratoire effectuant l'installation et la formation. Quand nous quittons le laboratoire, même le neurologiste le plus inexpérimenté aura la connaissance pour faire fonctionner leurs propres échantillons pour une application spécifique.

Comment l'analyseur de neurotransmetteur d'ALEXYS peut-il être employé pour étudier des niveaux de dopamine par rapport aux problèmes comportementaux (par exemple dépendance) et aux troubles neurologiques (par exemple maladie de Parkinson) ?

Le cerveau est un organe dynamique où la concentration des neurotransmetteurs peut changer rapidement après un déclencheur. Il peut, pour cette raison, venu comme aucune surprise que les chercheurs dans ce domaine veulent rassembler autant caractéristique comme possible sur très une courte période.

Dans le passé, les scientifiques rassemblaient 20 échantillons de microdialysis de µL, aux débits élevés (2 ou 3 µL/min), leur donnant le µL 40-60 d'un échantillon très dilué. Ceci l'a rendu difficile d'obtenir la résolution temporelle suffisante (c.-à-d. rassemblent assez de points d'informations dans une courte période) et sans ceci, vous ne pouvez pas trouver des variations rapides dans la concentration en neurotransmetteur.

C'est pourquoi nous avons développé un système qui pourrait analyser les volumes très petits témoin (par exemple µL 1,5) a obtenu toutes les 1,5 mn, sans compromettre sur la sensibilité (approximativement environ 100 P.M.).

Que d'autres échantillons peuvent-ils l'ALEXYS être employés pour étudier ?

Il y a trois analyses principales utilisées pour l'analyse des neurotransmetteurs. La première analyse est pour des monoamines et des métabolites telles que la dopamine, la nopépinéphrine, et la sérotonine.

Ensuite, nous avons une analyse pour des acides aminés tels que le GABA et le glutamate. Cette analyse exige de la dérivatisation de pré-fléau et d'une analyse très sélectrice d'UHPLC de séparer le glutamate, du GABA, dans le même chromatogramme.

Notre analyse finale est pour l'acétylcholine et la choline et est effectuée utilisant un réacteur immobilisé de réacteur (IMER) de l'enzyme où vous convertissez l'acétylcholine/choline en peroxyde.

Ce sont nos trois groupes importants. Cependant, il y a également des scientifiques qui emploient notre système pour le dépistage d'autres produits chimiques, qui ajoutent un autre détecteur. Par exemple, si un chercheur doit trouver des neuropeptides, ils peuvent employer le même analyseur avec un détecteur UV.

Où peuvent les lecteurs trouver plus d'informations ?

Au sujet de Martin Eysberg

Photo de Martin EysbergMartin est le directeur des ventes et marketing pour Antec scientifique, et a orienté les produits/applications autour des besoins analytiques des neurologistes. Il a en particulier intéressé dans les changements de comportement tels que la dépendance, et les troubles neurologiques provoqués par des défectuosités dans la neurotransmission.

Martin aboutit le développement du marché pour des produits nouveaux, et a récent lancé la CEE de ROXY, un système d'électrochimie pour la spectrométrie de masse. La ligne de produits avec l'orientation sur la simulation des réactions redox naturelles en conformité avec Mme.