Fabricación la mayor parte del Microdialysis para el análisis del neurotransmisor

insights from industryMartin EysbergDirector of Sales and MarketingAntec Scientific

Noticia-Médico habla a Martin Eysberg, que discute los efectos de monoamines tales como dopamina sobre comportamiento y enfermedad neurológica y ofrece una introducción al analizador del neurotransmisor de ALEXYS, un detector extremadamente exacto de UHPLC-EC que sea ideal para el estudio de la neurotransmisión en un cierto plazo.

¿Cómo el microdialysis se está utilizando para fomentar nuestra comprensión de la neurotransmisión?

Microdialysis es una técnica de muestreo que se utiliza para cerco el líquido extracelular del cerebro. Se utiliza para estudiar un alcance de condiciones, incluyendo Parkinson, Alzheimer, apego, comportamiento en relación al miedo, neuroactivity que sigue el consumo de alcohol y así sucesivamente.

Un ejemplo de la neurotransmisión entre dos células nerviosas. Iniciado de la anatomía | Shutterstock

En la investigación, el microdialysis biomédicos realizados a menudo conjuntamente con la cromatografía líquida para tomar mediciones directas de analitos en el cerebro o para cerco muestras en pequeños frascos.

Este montaje se puede utilizar para observar cambios en la concentración de neurotransmisores después del estímulo, o un gatillo. Por ejemplo, los cambios internos en la neurotransmisión y la concentración del neurotransmisor se pueden medir después de la administración del alcohol a un tema.

¿Por qué el microdialysis se combina a menudo con la CLAR para la detección de la monoamina?

Microdialysis se ha convertido en una herramienta inestimable que ofrece la información en tiempo real de los niveles del neurotransmisor in vivo. Las muestras de Microdialysis cerco y se salvan o se analizan inmediatamente en una configuración en línea usando UHPLC y la detección electroquímica (ECD).

Hay dos razones principales por las que combinar estas tecnologías es necesario; la sensibilidad de la técnica y del pequeño volumen de muestra disponibles. Es un reto analítico para ofrecer datos reproductivos y exactos pues los niveles del neurotransmisor están a menudo abajo de alcance de concentración nanomolar y a veces incluso abajo picomolar, así que la sensibilidad es esencial. Además, la mayoría de los sistemas del microdialysis pueden extraer solamente 1 muestra del µL por minuto, así que incluso si usted muestrea durante cinco a diez minutos, usted puede solamente obtener el µL 5-10 de la muestra.

Los detectores electroquímicos, también conocidos como detectores del análisis de trazo, son por lo tanto la opción obvia para este tipo de análisis. Otros detectores, como el ms o ULTRAVIOLETA, que requieren volúmenes de muestra más grandes, no son convenientes para este uso específico.

¿Cuáles son los retos más grandes para los científicos al descubrir y analizando los neurotransmisores in vivo?

El análisis del neurotransmisor viene con un par de retos; el primer es la dirección científica. ¿Cómo pueden los investigadores conseguir tanta información como sea posible fuera de una pequeña gotita de la muestra?

In vivo la neurobiología es limitada ya por tamaño de muestra, especialmente para los investigadores que trabajan con los ratones, y si usted quiere funcionar con el muestreo de alta frecuencia para perfeccionar su resolución de tiempo, las muestras llegan a ser incluso más pequeñas (hacia abajo a 1 µL). Desarrollar las tecnologías que pueden analizar pequeñas muestras sin sensibilidad de compromiso es mismo un gran reto.

La otra dificultad es que la mayor parte de los científicos que trabajan en neurología tienen formaciones académicas en biología. Esto significa que muchos científicos lo encuentran el desafiar para analizar pequeñas muestras tales como monoamines (e.g dopamina) con alta sensibilidad.

Ejemplo de las células nerviosas en el cerebro - neurotransmisoresTatiana Shepeleva | Shutterstock

¿Cómo el analizador del neurotransmisor de ALEXYS aborda estas entregas?

El analizador de ALEXYS combina la potencia de UHPLC con la sensibilidad de la detección electroquímica, haciéndole la herramienta perfecta para la detección de neurotransmisores.

Con el ALEXYS, nuestra meta era hacer la vida del científico más fácil. Quisimos abordar la falta de experiencia en la industria y hacerla ejecutando estos experimentos más simple y más eficiente. La medición de muestras es una porción, pero los científicos también necesitan un método robusto, de confianza.

Desarrollamos esto con el ALEXYS, y ahora vigilamos constante qué clase de herramientas están en el mercado para perfeccionar la resolución, la inyección de la muestra, y la velocidad, mientras que consumo precioso de disminución de la muestra.

Finalmente, el analizador de ALEXYS es instalado por uno de nuestros científicos, que pasarán cinco días en el laboratorio que realiza la instalación y el entrenamiento. Cuando salimos del laboratorio, incluso el neurólogo más inexperto tendrá el conocimiento para funcionar con sus propias muestras para un uso específico.

¿Cómo se puede el analizador del neurotransmisor de ALEXYS utilizar para estudiar niveles de la dopamina en relación a los problemas del comportamiento (e.g apego) y a los desordenes neurológicos (e.g. la enfermedad de Parkinson)?

El cerebro es un órgano dinámico donde la concentración de neurotransmisores puede cambiar rápidamente después de un gatillo. Puede, por lo tanto, venido como ninguna sorpresa que los investigadores en este campo quieren cerco tantos datos como sea posible durante mismo un corto período de tiempo.

En el pasado, los científicos cerco 20 muestras del microdialysis del µL, a los altos flujos (2-3 µL/min), dándoles el µL 40-60 de una muestra muy diluída. Esto hizo difícil obtener la resolución de suficiente tiempo (es decir cerco suficiente puntos de referencias en un corto período de tiempo) y sin esto, usted no puede descubrir fluctuaciones rápidas en la concentración del neurotransmisor.

Por eso desarrollamos un sistema que podría analizar los volúmenes de muestra muy pequeños (e.g. µL 1,5) obtuvo cada 1,5 minutos, sin el compromiso en la sensibilidad (áspero alrededor 100 P.M.).

¿Qué otras muestras se pueden el ALEXYS utilizar para estudiar?

Hay tres análisis principales usados para el análisis de neurotransmisores. El primer análisis está para los monoamines y los metabilitos tales como dopamina, noradrenalina, y serotonina.

Después, tenemos un análisis para los aminoácidos tales como GABA y glutamato. Este análisis requiere la derivatización de la pre-olumna y un análisis muy selectivo de UHPLC separar el glutamato, de GABA, en el mismo cromatógrama.

Nuestro análisis final está para la acetilcolina y la colina y se realiza usando un reactor inmovilizado del reactor (IMER) de enzima donde usted convierte la acetilcolina/la colina en el peróxido.

Éstos son nuestros tres grupos importantes. Sin embargo, hay también los científicos que están utilizando nuestro sistema para la detección de otras substancias químicas, que agregan otro detector. Por ejemplo, si un investigador necesita descubrir neuropeptides, pueden utilizar el mismo analizador con un detector ULTRAVIOLETA.

¿Dónde pueden los programas de lectura encontrar más información?

Sobre Martin Eysberg

Foto de Martin EysbergMartin es el director de ventas y del márketing para Antec científico, y enfocó los productos/los usos alrededor de las necesidades analíticas de neurólogos. Él ha interesado determinado en cambios del comportamiento tales como apego, y desordenes neurológicos causados por defectos en la neurotransmisión.

Martin lleva el revelado del mercado para los nuevos productos, y puso en marcha recientemente la EC de ROXY, un sistema de la electroquímica para la espectrometría de masa. La línea de productos con el foco en la simulación de reacciones redox naturales conforme a ms.