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La prova di LC-MS/MS per progesterone supera i immunoassays tradizionali

I ricercatori hanno redatto un modo economico, non invadente e specifico riflettere la produzione del progesterone in donne. La nuova tecnica usa la spettrometria di massa del cromatografia-tandem del liquido e della saliva (LC-MS/MS). La ricerca è stata pubblicata negli annali della biochimica clinica.

La prova di LC-MS/MS per progesterone supera i immunoassays tradizionaliTimonina | Shutterstock

Gli scienziati hanno aggirato l'esigenza dei immunoassays di limitato-specificità impiegando LC-MS/MS che fornisce il vantaggio aggiunto di essere alto-capacità di lavorazione. Questa analisi novella permette al delineamento del progesterone, un indicatore di ovulazione, in tutto la mestruazione; un contributore ai riusciti mezzi sia di canali riproduttivi assistiti che non assistiti.

I livelli del progesterone sono un forte indicatore di fertilità di punta e sono essenziali per la gravidanza. Come tale, il video delle concentrazioni nel progesterone è una parte cruciale delle terapie riproduttive e mezzi per diminuire l'incidenza delle nascite premature.

Le tecniche correnti contano sulla raccolta del campione di sangue ripetuta multiplo dalle donne nell'ambito della sorveglianza dei clinici. Quindi, l'uso della saliva abroga l'esigenza del personale clinico, che presenta sia un efficace, riduzione dei costi che il mezzo non invadente di autosomministrato, acquisizione del multi-campione.

Immunoassays contro LC-MS/MS

I metodi tradizionali e disponibili nel commercio di quantificazione di progesterone contano sui immunoassays che soffrono dalla specificità limitata. LC-MS/MS rappresenta i mezzi attraenti di impedire questo, eppure la sua applicazione è stata ostacolata entro i lunghi tempi di lavorazione del preparato e del campione richiesti. Quindi, l'esigenza di una alto-capacità di lavorazione e di un'analisi affidabile, come diventata dai ricercatori dall'università di Birmingham, presenta i mezzi migliori di delineamento futuro del progesterone.

La ricerca priore ha indicato che la saliva, rispetto a sangue, fornisce una misura più accurata del modulo bioactive di progesterone, riflettente esattamente la concentrazione libera dell'ormone che è correlato forte con concentrazione totale durante la gravidanza.

Le analisi salivarie precedenti sono state usate per diagnosticare i difetti di nascita e quindi per essere suggerite come biomarcatore per la nascita prematura.

Il gruppo, piombo dal professor Schiffner e colleghi ha sviluppato un singolo punto preparatorio, seguito da un'analisi ad alta velocità di LC-MS/MS per la quantificazione di progesterone negli interi campioni della saliva. La convalida della prestazione analitica ha dimostrato l'idoneità del metodo ad uso sistematico, misurante il progesterone durante il periodo di mestruazione.

I campioni salivari sono un'alternativa vantaggiosa del `'

Il metodo è stato messo a punto e sperimentato stato su nove campioni della saliva dalle donne in buona salute con i cicli mestruali regolari, non catturanti la contraccezione orale. I partecipanti sono stati chiesti di evitare pulire i denti prima della raccolta del campione per evitare la contaminazione di sangue (l'ultimo è conosciuto per elevare erroneamente i livelli steroidi salivari). I campioni erano conforme ad un singolo punto che richiede soltanto l'liquido-estrazione per l'isolamento di progesterone che è stato ricostituito in etanolo di 40%.

I ricercatori successivamente hanno eseguito la cromatografia a fase mobile liquida di ultra-alto-pressione (UPLC) che successivamente è stata accoppiata con il ms del tandem (MS/MS). Il potenziale per concentrazione nel progesterone che scende sotto il limite di rilevazione e l'assenza di normalizzazione dei campioni è stato sormontato dall'analisi di LC-MS/MS che fornisce la specificità e la selettività necessarie per l'applicazione sistematica.

La convalida rigorosa della prestazione analitica dell'analisi inventata di LC-MS/MS è stata effettuata per assicurare l'accuratezza e la precisione.

Nessun'interferenza dai composti in relazione con lo steroide

L'analisi ha dimostrato l'alta selettività ed era esente dalla risposta alterata del rivelatore (conosciuta come soppressione dello ione) che successivamente ha indicato precisione di inter analisi e l'intra. Inoltre, i campioni sono rimanere stabili dopo la ricostituzione.

Il preparato una tappa del campione di intera saliva ha permesso al trattamento rapido, con un tempo di esecuzione di 5,5 minuti. Il successo dell'analisi di LC-MS/MS è stato riflesso tramite l'aumento osservato nella concentrazione salivaria di progesterone in sette dei nove campioni durante la fase luteale, concorrente con il ciclo mezzo mestruale di ovulazione di punta.

Le concentrazioni massime nel progesterone hanno fatto parte dei limiti imposti dalla concentrazione standard. L'analisi ha dimostrato con successo la sua applicazione nel video di alto-capacità di lavorazione delle concentrazioni fisiologiche nel progesterone a parecchi punti durante il ciclo mestruale in un modo non invadente. Fondamentalmente, a differenza dei immunoassays, l'analisi di LC-MS/MS non dimostra interferenza dai composti in relazione con lo steroide.

Inoltre, alcuni campioni hanno raggiunto una concentrazione nel progesterone sotto il limite più basso di quantificazione (LLOQ) (20 pmol/L) a determinati punti di tempo del ciclo mestruale. I ricercatori indicano, tuttavia, che la piccola dimensione del campione (n=9) successivamente preclude la definizione di un intervallo sano del progesterone e delle variazioni naturali.

Lo sviluppo dell'analisi salivaria del progesterone di alto-capacità di lavorazione LC-MS/MS dal professor Schiffer e colleghi stende il fondamento per lo sviluppo dei campi di riferimento robusti per le concentrazioni nel progesterone in tutto il ciclo mestruale dai grandi studi popolazione di ampiezza.

È sperato che la tecnica sia estesa per comprendere l'applicazione nella terapia di malattia - specificamente in iperplasia adrenale congenita, dove il progesterone è un biomarcatore per la terapia steroide insufficiente della sostituzione.


Riferimento del giornale:

Un'analisi novella di alto-capacità di lavorazione per la misura di progesterone salivario tramite spettrometria di massa del tandem di cromatografia a fase mobile liquida. Annali di biochimica clinica. 2018. DOI: 10.1177/0004563218780904

Questo studio ha avuto approvazione etica completa dal comitato di revisione etico di scienza, della tecnologia, di assistenza tecnica e di matematica dell'università di Birmingham.

Hidaya Aliouche

Written by

Hidaya Aliouche

Hidaya is a science communications enthusiast who has recently graduated and is embarking on a career in the science and medical copywriting. She has a B.Sc. in Biochemistry from The University of Manchester. She is passionate about writing and is particularly interested in microbiology, immunology, and biochemistry.

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