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TEST-1 usando SPR para confrontar a crise da reprodutibilidade do anticorpo

Qualquer um que pediu nunca anticorpos de um fornecedor do anticorpo, problemas encontrados com selectividade do anticorpo, especificidade e reprodutibilidade, ou os anticorpos retornados ao fornecedor, simplesmente para receber uma amostra mais adicional da má qualidade, terão sofrido da pandemia de anticorpos “ruins”.

Calcula-se que ao redor 50% de todas as compras do anticorpo são “mau”, esclarecendo aproximadamente $350 milhões USD no consumo dissoluto nos E.U. apenas. Porque há mais de quatro milhão anticorpos do uso da pesquisa (RUO) somente disponíveis aos pesquisadores, dois critérios são da importância crítica: boa fonte e em-casa quevalidam (sempre que seja possível).

Este artigo introduz a importância de validar os parâmetros (isto é selectividade, especificidade, taxas de ligar/desligar, constantes de equilíbrio) de anticorpos comprados, assim assegurando o recibo de um anticorpo da qualidade superior que seja útil para as aplicações relevantes, assim salvar o tempo e o dinheiro do usuário.

3 tipos de anticorpos

Há três categorias principais de anticorpos: monoclonal; polyclonal e de recombinação. Os anticorpos Polyclonal e monoclonais são produzidos no sistema imunitário pelas B-pilhas da memória que respondem a um antígeno estrangeiro segregando anticorpos. Um anticorpo monoclonal pode reconhecer e ligar um único resumo em um único antígeno, quando um anticorpo polyclonal possuir a capacidade reconhecer e ligar resumos divergentes no mesmo antígeno.

A diferença principal entre estas categorias de anticorpo relaciona-se a sua especificidade; os anticorpos monoclonais representam a especificidade alta, visto que os anticorpos polyclonal são mais prováveis causar a reactividade cruzada, diminuindo a especificidade em conseqüência.

Interessante, embora o comportamento de anticorpos de recombinação (isto é aqueles produzidos in vitro através da recombinação do ADN, da expressão, da purificação etc.) seja similar àquele de anticorpos monoclonais, o anteriores exemplificam um número de vantagens da produção tais como a produção rápida, uma rotação mais rápida e a não-exigência para um animal do anfitrião. Supor que a tecnologia de recombinação do anticorpo se transformará a metodologia preliminar da produção do anticorpo (Bradbury, A., & Plückthun, 2015).

Edições com qualidade do anticorpo

As últimas décadas testemunharam uma SHIFT das drogas pequenas convencionais da molécula às terapias anticorpo-baseadas e, a este respeito, a procura para anticorpos disponíveis no comércio aumentou. Isto conduziu a uma multiplicação rápida de produtores e de distribuidores novos, pavimentando a maneira para um valor de mercado previsto de mais de $22 bilhões USD em 2025 (pesquisa grande da vista, 2017).

Contudo, deve-se notar que, como com toda a SHIFT ascendente do mercado esta tendência é provável ser seguida por interesses em relação à segurança e à normalização de qualidade.

As técnicas convencionais da produção dos anticorpos são sitiadas inerente pela variabilidade do grupo-à-grupo. Por exemplo, os hybridomas, o vector em que os anticorpos monoclonais são gerados, são suscetíveis à tracção genética. Essencialmente, isto significa que um anticorpo em que um projecto inteiro foi baseado por anos não pôde personificar a mesma especificidade, selectividade e/ou capacidade que foi esperado previamente. Isto pode conduzir às inconveniências significativas do projecto, assim como tempo desperdiçado e dinheiro.

Embora um número produtores e de distribuidores do anticorpo emitam um certificado de análise (CoA), de manchas ocidentais e/ou de dados de ELISA, determinadas empresas não oferecem esta informação. Além disso, os produtores numerosos que oferecem os anticorpos que foram validados usando técnicas tais como manchas ocidentais ou ELISA afirmará sua conformidade para uma disposição larga de aplicações (isto é IHC ou cytometry de fluxo), mas não fornecerão nenhuma documentação suplementar. Conseqüentemente, é crucial permanecer vigilante e obter esperta e prudente anticorpos.

Não obstante, um comprometimento para a segurança de qualidade do anticorpo da em-casa emergiu. Validando parâmetros de anticorpos comprados compreenda dados da seqüência e taxas, especificidade, selectividade, e constantes de equilíbrio de ligar/desligar.  Estes critérios podem assegurar-se de que os produtores estejam guardarados para explicar, se assegurando de que o consumidor receba um anticorpo da qualidade superior esse funções para suas aplicações.

Constantes obrigatórias e ressonância de superfície do Plasmon

Em um papel 2016 publicado nas introspecções jornal da química analítica, X os autores afirma que, porque as constantes obrigatórias do anticorpo são propriedades estáticas, e desde que somente uma porcentagem pequena de vendas do anticorpo é acompanhada dos dados da afinidade, “é uma pena que a determinação de constantes da afinidade está executada raramente para anticorpos e seus antígenos respectivos” (Weller, 2016).

No mesmo papel, os autores postulam que a solução a mais dada boas-vindas à caracterização de constantes obrigatórias e à validação da qualidade do anticorpo é ressonância de superfície do plasmon (SPR). Embora haja umas tecnologias alternativas disponíveis para caracterizar constantes obrigatórias, tipicamente estas aproximações utilizam muita amostra, necessitam etiquetas, geram a insuficiente informação e/ou envolvem a despesa em investimento substancial. Notàvel, a ressonância de superfície do plasmon (SPR) representou o modelo para adquirir dados obrigatórios quantitativos da cinética por um número de décadas.

Significativamente, OpenSPR representa uma baixa manutenção, solução de fácil utilização do benchtop SPR. Actualmente sendo utilizado pelas centenas de pesquisadores, acesso do banco de laboratório à tecnologia de SPR está rendendo os dados de alta qualidade que são exigidos para a publicação bem sucedida. Além disso, embora SPR seja necessário para publicações, é igualmente importante para a revelação de muitos campos da medicina e da investigação médica, como demonstrado pelo aumento significativo nas publicações que confiam nos dados de SPR, apresentados abaixo.

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Recursos

  1. Valor do mercado da produção do anticorpo $22,6 bilhões em 2025. (2017, março). 10 de junho de 2019 recuperado, de https://www.grandviewresearch.com/press-release/global-antibody-production-market
  2. Bradbury, A., & Plückthun, A. (2015). Reprodutibilidade: Estandardize os anticorpos usados na pesquisa. Natureza, 518(7537), 27-29. doi: 10.1038/518027a
  3. Weller, M.G. (2016). Introduções de qualidade de anticorpos da pesquisa. Introspecções da química analítica, doi 11.: 10.4137/aci.s31614

Sobre Nicoya Lifesciences

Nicoya Lifesciences

Nicoya Lifesciences é uma equipe dos coordenadores e dos cientistas com a experiência extensiva que trabalha no pelotão da frente da nanotecnologia, da bioquímica, e de sensores ópticos.

Vêm de algumas das instituições de pesquisa principais do mundo tais como a faculdade imperial de Londres e da universidade de Waterloo. São baseados em Waterloo, Ontário - conhecido como o Silicon Valley de Canadá.

Sua missão é trazer os produtos de alta qualidade do sensor com projectos originais, inovativos ao mercado para resolver alguns dos problemas os mais importantes do mundo. Querem conduzir a inovação dando a mais povos o acesso às tecnologias e às ferramentas de sensor poderosas.


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