Tecnologia de interrupção do ensaio da microplaqueta com avanços novos

insights from industryDr. Lindsay ParkesSenior Research ScientistPorvair Sciences

Uma entrevista com Dr. Lindsay Parkes, cientista superior da pesquisa, ciências de Porvair

Na última década houve muitos avanços em ensaios da microplaqueta satisfaz dá uma vista geral da tecnologia® do ensaio da microplaqueta de Chromatrap e que melhorias foram feitas?

A tecnologia® da microplaqueta de Chromatrap é um método grânulo-livre de executar a microplaqueta. O potencial da tecnologia emergiu de nossas capacidades em fabricar filtros plásticos porosos para a filtragem e a separação de materiais biológicos. Functionalising o filtro com proteínas da captação (por exemplo Pro-Um, Pro-G), nós identificamos uma maneira nova fresca de executar a microplaqueta que elimina o uso dos grânulos conseqüentemente que superam os desafios comuns associados com estes ensaios tradicionais da microplaqueta.

Chromatrap® continua a melhorar nossos tecnologia e produtos em resposta às necessidades dos clientes e muda no mercado. Recentemente, nós fizemos melhorias à sensibilidade do ensaio da microplaqueta. Nossas proteínas excepcionalmente orientadas asseguram-se de que cada bolso obrigatório esteja acessível aos complexos da anticorpo-cromatina que maximizam assim a eficiência da captação. Com os pesquisadores que procuram uns ensaios mais sensíveis nós empurramos a revelação de nossos jogos não somente para ser o melhor para usar mas entregar a sensibilidade a mais alta para uma vasta gama de amostras biológicas.

Como isto compara a outras tecnologias padrão do ensaio da microplaqueta?

Ao contrário dos ensaios grânulo-baseados padrão da microplaqueta, Chromatrap® usa um sistema filtro-baseado original para a captação e o enriquecimento selectivo de proteínas obrigatórias ADN-associadas.  Eliminando perla (magnético e agarose) de nossa tecnologia da microplaqueta, nós podíamos desenvolver um ensaio da microplaqueta que fosse, mais rapidamente, um mais robusto e mais importante ainda mais sensível distante mais fáceis do que ensaios padrão da microplaqueta.

Por que é importante usar um ensaio de circuito integrado da microplaqueta um pouco do que um sistema grânulo-baseado? Que são as vantagens e as limitações?

Quando se trata dos ensaios da microplaqueta, a sensibilidade é uma chave. Chromatrap® usa nosso material plástico poroso inerte patenteado, Vyon. Isto reduz significativamente o ruído de fundo encontrado frequentemente nos resultados da utilização dos ensaios da microplaqueta magnética ou dos grânulos do agarose, que podem inerente atrair o emperramento não específico e o contribuir a um backround e a uma máscara mais altos dos resultados.

Da extracção da cromatina à eluição do ADN arranjar em seqüência-pronto, os ensaios grânulo-baseados da microplaqueta podem tomar até 5 dias para terminar. Isto pode ser feito em apenas 5 horas que usam o sistema® de Chromatrap com ele é proteínas óptima orientadas e mistura molecular melhorada.

Com Chromatrap®, todas as etapas são realizadas dentro pela centrifugação. Isto supera os problemas com o múltiplo que introduz com pipeta etapas e perda da amostra retendo complexos encadernados no filtro até a eluição. Não somente isto acelera o benefício dos trabalhos mas® de usuários de Chromatrap de sua acessibilidade.

Como com o qualquer jogo comercial do ensaio, a optimização do usuário pode ser exigida. Nossa equipe de suporte laboral dedicada é sempre disponível fornecer a orientação e o conselho. Chromatrap® fornece todos os reagentes que você precisa da extracção da cromatina ao IP à purificação do ADN.

Que tamanho prova pode ser usado com ensaios® da microplaqueta de Chromatrap? Que são as aplicações destes tamanhos do ensaio?

Chromatrap® foi desenvolvido para entregar um jogo robusto e altamente sensível compatível com uma vasta gama de amostras. A microplaqueta pode ser executada do tão pouco quanto 1000 pilhas ou 50mg do tecido. A flexibilidade do sistema significa até a cromatina 50µg pode ser usada pelo ensaio.

Chromatrap® tem o alcance dinâmico o mais largo de todo o ensaio disponível da microplaqueta que significa que pode ser usado para qualquer aplicação das amostras clínicas preciosas às linha celular abundantes. Nos casos tais como laboratórios clínicos, os pesquisadores podem somente mandar o acesso às amostras pacientes limitadas e conseqüentemente exigir um jogo altamente sensível.

Arranjar em seqüência a jusante do PCR e da próxima geração são os passos seguintes comuns para a cromatina enriquecida, que vantagens são lá para o ensaio® da microplaqueta de Chromatrap sobre outros métodos de uso geral?

A sensibilidade do ensaio® da microplaqueta de Chromatrap permite a detecção de alvos do gene no qPCR da mais baixa quantidade de material começar. A captação maximizada de complexos de anticorpo-ADN do alvo nas colunas® de Chromatrap e em nenhuma perda da amostra permite a amplificação mesmo dos baixos alvos abundantes do gene que podem ser indetectáveis com sistemas grânulo-baseados.

Usando o sistema® de Chromatrap, os dados arranjando em seqüência complexos podem ser obtidos de Microplaqueta-segs. de umas quantidades significativamente mais baixas de material começar. O rendimento alto do ADN da microplaqueta® de Chromatrap permite NGS que arranja em seqüência de um único IP do tão pouco quanto 1000 pilhas sem nenhuma necessidade para a associação da amostra. Um ADN mais alto da entrada melhora a complexidade da biblioteca de NGS.

Como pode a automatização de protocolos do ensaio da microplaqueta melhorar a qualidade, a complexidade e a precisão da pesquisa?

A automatização da microplaqueta que usa uma tecnologia como Chromatrap® permite que os dados complexos exactos sejam obtidos ràpida e sem o risco de introduzir com pipeta ou de segurar erros. Com este formato, os pesquisadores podem investigar alvos múltiplos do anticorpo e do gene paralelamente.

A tecnologia® de Chromatrap é serida perfeitamente aos ensaios da alto-produção. Chromatrap® 96 placas boas contem uma Proteína-Um ou um filtro functionalised Proteína-G em cada um dos 96 poços. Apenas como nossos jogos padrão da coluna, os 96 produtos bons da alto-produção contêm todos os amortecedores e reagentes que você precisa de começar e terminar seu ensaio. Precise bem--bem à consistência permite resultados reprodutíveis e repetíveis exactos em cada ensaio.

O sistema® do GH de Chromatrap 96 pode igualmente estabelecer-se para o líquido automatizado que segura fornecendo um mesmo método mais rápido e mais eficiente para executar ensaios da microplaqueta. As grandes, séries de dados seguras podem ser recolhidas eficientemente, permitindo efeitos difundidos de ser estudado através das amostras múltiplas e dos tipos múltiplos da pilha; tudo realizado simultaneamente.  

Que impacto pode a tecnologia melhorada do ensaio da microplaqueta ter em áreas de pesquisa importantes tais como o cancro e a pesquisa epigenética?

Epigenetics é uma área de pesquisa vital no estudo da saúde. As alterações que não causam uma mudança na seqüência subjacente do ADN são do interesse particular nas patologias tais como o cancro devido a sua natureza reversível. A microplaqueta é a ferramenta a mais poderosa em compreender as interacções dos histones e dos factores da transcrição com ADN do alvo que chave ellicit que sinaliza respostas. As drogas epigenéticas, tais como inibidores de HDAC, têm crescido na popularidade no tratamento dos cancros e seus efeitos são testados frequentemente na microplaqueta.

Ter a maioria de informação delicada sobre os efeitos, e fora do alvo, destas drogas pode somente ajudar a melhorar a longo prazo resultados da saúde. Mais rapidamente, uns ensaios mais sensíveis e mais reprodutíveis da microplaqueta permitem uma pesquisa mais alta da produção nos mecanismos que são a base de doenças e do teste de seus tratamentos.

Que é o futuro da tecnologia do ensaio da microplaqueta, e para Chromatrap®?

Com foco crescente em factores epigenéticos na pesquisa e no tratamento da saúde, a microplaqueta continuará a crescer na popularidade. As tecnologias precisarão inevitàvel de melhorar na sensibilidade, na eficiência e na produção para acelerar esta pesquisa. Chromatrap® manterá sua posição no pelotão da frente da tecnologia da microplaqueta ao desenvolver nosso sistema para assegurar-se de que entregue sempre uns ensaios mais eficientes, mais sensíveis e simples da microplaqueta para a cromatina de uma grande variedade de fontes. Nós continuaremos a adaptar o a tecnologia, já compatível com uma vasta gama de processos do downsteam, às técnicas analíticas emergentes.

O sucesso de Chromatrap® na microplaqueta e nas vantagens que originais fornece sobre os presentes grânulo-baseados dos ensaios que excitam oportunidades para a tecnologia em uma escala de aplicações larga. Nossa equipe está adaptando a plataforma de circuito integrado nova para estabelecido e está emergindo técnicas epigenéticas e biológicas do enriquecimento de modo que mais pesquisadores possam tirar proveito de seus muitos vantagens e foco nas perguntas mais grandes em sua pesquisa.  

Onde podem os leitores encontrar mais informação?

Visite www.chromatrap.com para encontrar mais sobre Chromatrap®, publicações recentes, notas de aplicação e informações sobre o produto.

Sobre o Dr. Lindsay Parkes

O Dr. Lindsay Parkes é o cientista do chumbo no R&D de tecnologias novas e existentes em ciências de Porvair. Seu foco preliminar é desenvolver os materiais originais manufacturados em ciências de Porvair em produtos inovativos e em pedidos para a ciência da vida e a investigação médica.

Após ter começado sua carreira como um geneticista bacteriano na universidade de Swansea, Lindsay foi concedido um PhD na biologia molecular e na genética. Para seguir seu interesse na biologia molecular na pesquisa académico, Lindsay continuou com um papel pos-doctoral em testar a eficácia das drogas antimicrobiais chaves. Durante sua pesquisa, o Dr. Parkes tornou-se involvido em um projecto académico da indústria colaboradora com o Porvair na investigação e desenvolvimento de produtos® de Chromatrap.

Trabalhar com ciências de Porvair forneceu o Dr. Lindsay Parkes a oportunidade perfeita de estabelecer uma carreira desafiante e emocionante que combina sua paixão para a pesquisa e interesse durante o desenvolvimento de produtos.

Citations

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