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Le microscope de HT de Tomocube active la quantification marque marque du teneur cellulaire de lipide

Dans une découverte pour la recherche met en place aussi divers que le diabète, l'athérosclérose et les combustibles organiques, la masse, la concentration, le volume, et la surface de différentes gouttelettes de lipide ont été mesurés en cellules sous tension et non souillées pour la première fois utilisant un microscope de Tomocube (HT) Holotomography. L'élimination de toutes les opérations préparatoires ou souillantes, et la définition transversale de 110 nanomètre du microscope de HT de Tomocube, signifie que les chercheurs peuvent maintenant facilement suivre des changements de distribution de lipide au fil du temps dans la haute résolution, activant des études métaboliques de teneur cellulaire de lipide.

Le microscope de HT de Tomocube active la quantification marque marque du teneur cellulaire de lipide
Holotomography d'un hépatocyte humain, Huh-7. image de fluorescence d'images du tomogramme 3D (laissées) (droite). Les gouttelettes de Haut-RI marquent avec les gouttelettes de lipide souillées par le rouge du Nil. 95,5% d'organelles dont le RI évalue est plus élevé que n = 1,375 sont superposés aux gouttelettes de lipide souillées par le rouge du Nil. Reproduit du 6:36815 scientifique d'états de Kim et autres.

Les images quantitatives immédiates de phase de la morphologie intacte des cellules sous tension est un avantage clé de microscopie de HT comparé à d'autres technologies de l'image. Holotomography trouve l'indice de réfraction d'absolu (RI) de chaque voxel en mesurant le délai de phase. Puisque le RI des gouttelettes de lipide est distinctement plus élevé que le cytoplasme ou d'autres éléments cellulaires, le contraste est facilement suffisant à l'image dans la haute résolution. Si le microscope de Tomocube HT-2H est utilisé, qui supporte le holotomography et la représentation de la fluorescence 3D, les expériences de Co-localisation sont possibles en marquant juste la protéine cible ou le type spécifique d'acide gras plutôt que devant souiller la gouttelette de lipide et la molécule-cible.

Comparez ceci au lumineux-inducteur ou à la microscopie de contraste de phase, qui conçoivent commodément la morphologie cellulaire mais fournissez seulement les informations qualitatives. La microscopie à fluorescence confocale saisit des images structurelles de la haute définition 3D mais concerne les procédures de marquage invasives qui induisent inévitablement la phototoxicité ou photobleaching. »

Aubrey Lambert, Directeur de Marketing, Tomocube

Le lipide a un rôle essentiel en modulant beaucoup de fonctions cellulaires et une panne dans son règlement est associée au diabète, à l'athérosclérose et à d'autres maladies métaboliques. Le génie génétique des algues bactériennes et photosynthétiques riches en lipide pour augmenter la puissance d'acides gras est également un champ de recherche important dans le développement des combustibles organiques. Dans les deux cas, la quantité de lipide doit être mesurée pour étudier la dynamique métabolique in vitro.

Jusqu'ici, la visualisation de l'emplacement du lipide a exigé des cellules d'être préparées utilisant le lipide-détail souillant des sondes, telles que le rouge du Nil ou le pétrole refont, nuisant les processus cellulaires indigènes. En attendant, la chromatographie a été très utilisée pour mesurer le teneur de lipide bien que ceci mesure seulement la moyenne des centaines d'algues après des méthodes expérimentales longues.

Selon Lambert, « Holotomography est très adapté au dépistage des molécules élevées de RI, qui est une caractéristique des gouttelettes de lipide. Cependant, il s'applique également à l'étude d'autres molécules de haut-RI, telles que des polymères, des nanoparticles, ou des liposomes, et les chercheurs peuvent s'appliquer des approches identiques à celle de la représentation de lipide utilisant la microscopie de HT.

« La quantification rapide du teneur cellulaire de lipide est une fonctionnalité unique de la représentation de HT et a le potentiel énorme pour l'adoption en biologie cellulaire ainsi que dans les domaines de la bio-ingénierie ou de l'industrie de combustibles organiques. »

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