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O microscópio do GH de Tomocube permite a quantificação etiqueta-livre do índice celular do lipido

Em uma descoberta para a pesquisa coloca tão diverso quanto o diabetes, a aterosclerose e os combustíveis biológicos, a massa, a concentração, o volume, e a área de superfície de gotas individuais do lipido foram medidos nas pilhas vivas, unstained que usam pela primeira vez um microscópio de Tomocube (HT) Holotomography. A eliminação de todas as etapas preparatórios ou manchando, e a definição lateral de 110 nanômetro do microscópio do GH de Tomocube, significam que os pesquisadores podem agora facilmente seguir mudanças na distribuição do lipido ao longo do tempo na alta resolução, permitindo estudos metabólicos do índice celular do lipido.

O microscópio do GH de Tomocube permite a quantificação etiqueta-livre do índice celular do lipido
Holotomography de um hepatocyte humano, Huh-7. imagem da fluorescência das imagens do tomogram 3D (deixadas) (direita). As gotas Altas-RI correlacionam às gotas do lipido manchadas pelo vermelho do Nilo. 95,5% dos organelles cujo RI avalia é mais alto do que n = 1,375 são sobrepor às gotas do lipido manchadas pelo vermelho do Nilo. Reproduzido do 6:36815 científico dos relatórios de Kim e outros.

As imagens quantitativas imediatas da fase da morfologia intacto de pilhas vivas são uma vantagem chave da microscopia do GH comparada a outras tecnologias imagiológicas. Holotomography detecta o R.I. absoluto (RI) de cada voxel medindo o atraso da fase. Desde que o RI das gotas do lipido é distintamente mais alto do que o citoplasma ou outros componentes celulares, o contraste é facilmente suficiente à imagem na alta resolução. Se o microscópio de Tomocube HT-2H é usado, que apoia o holotomography e a imagem lactente da fluorescência 3D, as experiências da co-localização são possíveis com da rotulagem apenas da proteína do alvo ou do tipo específico de ácido gordo um pouco do que tendo que manchar a gota do lipido e a molécula do alvo.

Compare isto ao brilhante-campo ou à microscopia do contraste da fase, que visualizam convenientemente a morfologia celular mas forneça somente a informação qualitativa. A microscopia de fluorescência Confocal captura as imagens 3D estruturais de alta resolução mas envolve os procedimentos de rotulagem invasores que induzem inevitàvel a fototoxicidade ou photobleaching.”

Aubrey Lamberto, director de marketing, Tomocube

O lipido tem um papel crucial em modular muitas funções celulares e uma divisão em seu regulamento é associada com o diabetes, a aterosclerose e outras doenças metabólicas. A genética das algas bacterianas e fotossintéticas lipido-ricas para aumentar o rendimento de ácidos gordos é igualmente uma área de pesquisa importante na revelação dos combustíveis biológicos. Em ambos os casos, a quantidade de lipido precisa de ser determinada para estudar in vitro a dinâmica metabólica.

Até aqui, visualizar o lugar do lipido exigiu pilhas ser preparado usando pontas de prova de mancha lipido-específicas, tais como o vermelho do Nilo ou lubrifica vermelho-o, interferindo com os processos celulares nativos. Entrementes, a cromatografia foi amplamente utilizada determinar o índice do lipido embora esta medisse somente a média das centenas de algas após procedimentos experimentais demorados.

De acordo com Lamberto, “Holotomography é serido muito à detecção de moléculas altas de RI, que é uma característica de gotas do lipido. Contudo, é ingualmente aplicável ao estudo de outras moléculas altas-RI, tais como polímeros, nanoparticles, ou lipossoma, e os pesquisadores podem aplicar aproximações idênticas àquela da imagem lactente do lipido usando a microscopia do GH.

“A quantificação rápida do índice celular do lipido é uma característica original da imagem lactente do GH e tem o potencial enorme para a adopção na biologia celular assim como no campos da tecnologia biológica ou da indústria dos combustíveis biológicos.”

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